李佳君，劉璐，李曉東

（1.黑龍江省搖籃乳業(yè)股份有限公司，哈爾濱150010；2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院，哈爾濱150030）

干燥方式對(duì)鼠李糖乳桿菌微膠囊的活力及儲(chǔ)藏穩(wěn)定性的影響

李佳君1，劉璐2，李曉東2

（1.黑龍江省搖籃乳業(yè)股份有限公司，哈爾濱150010；2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院，哈爾濱150030）

為了提高鼠李糖乳桿菌在人體胃腸道傳遞中的活力，以乳清蛋白和低聚異麥芽糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物為壁材，通過(guò)內(nèi)源乳化冷凝膠方法制作出微膠囊，研究不同干燥方式微膠囊儲(chǔ)藏穩(wěn)定性。研究結(jié)果表明：美拉德產(chǎn)物壁材組微觀結(jié)構(gòu)更光滑，無(wú)縫隙、破裂現(xiàn)象。乳清蛋白與低聚異麥芽糖混合壁材組和美拉德產(chǎn)物壁材組微膠囊經(jīng)噴霧干燥菌活力下降3.26 g-1和3.15 g-1（對(duì)數(shù)值），4℃冷藏儲(chǔ)藏30 d后微膠囊菌活力分別為6.23 g-1和6.61 g-1（對(duì)數(shù)值），而冷凍干燥菌活力損失為1.62 g-1和1.51g-1（對(duì)數(shù)值），4℃冷藏儲(chǔ)藏30 d兩種壁材微膠囊菌活力分別為7.31 g-1和8.26 g-1（對(duì)數(shù)值）。美拉德產(chǎn)物壁材微膠囊冷凍干燥后水活度較低，擁有較好的儲(chǔ)藏穩(wěn)定性。

干燥方式；美拉德反應(yīng)；微膠囊；鼠李糖乳桿菌；活力

0 引言

益生菌具有多種生理功能[1,2]，但其活力容易受到不利環(huán)境的影響。研究者通常采用微膠囊法保證益生菌的活力[3]。乳清蛋白是一種常用的壁材，具有良好緩沖能力[4]。目前已有研究表明美拉德反應(yīng)可以提高蛋白質(zhì)抗氧化性、乳化性和抗過(guò)敏性等[5,6]且乳清蛋白美拉德產(chǎn)物作為壁材對(duì)活性物質(zhì)具有良好的包埋效果[7,8]。目前，微膠囊制備通常采用噴霧干燥[9,10]和冷凍干燥。噴霧干燥法具有省時(shí)、易操作、可大規(guī)模生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)；冷凍干燥法可以有效保留原料中的活性物質(zhì)[11-12]。

本研究將乳清蛋白與低聚異麥芽糖（IMO）的混合溶液（WIMIX）、乳清蛋白與IMO的美拉德反應(yīng)產(chǎn)物（WIMRPs）作為壁材包埋鼠李糖乳桿菌，比較噴霧干燥和冷凍干燥對(duì)微膠囊儲(chǔ)存性及益生菌活力的影響。

1 實(shí)驗(yàn)

1.1 材料

乳清蛋白（WPC-80），低聚異麥芽糖；鼠李糖乳桿菌6134等。

1.2 儀器與設(shè)備

ULTRA-TURRAX T8均質(zhì)機(jī)，VD-1320超凈工作臺(tái)，DH5000A電熱恒溫培養(yǎng)箱，SYQ-DSX-280B手提式蒸汽滅菌鍋，BCKMAN Allegra 64R離心機(jī)，Leica DM2000顯微鏡，DHG-9240A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，HZQ-X100振蕩培養(yǎng)箱，B-290噴霧干燥器，YB-FD-12冷凍干燥機(jī)等。

1.3 方法

1.3.1 內(nèi)源乳化冷凝膠法制備鼠李糖乳桿菌微膠囊

通過(guò)前期實(shí)驗(yàn)[13]驗(yàn)證優(yōu)化后美拉德反應(yīng)產(chǎn)物作為益生菌微膠囊壁材具有較好的性能，本研究選擇兩組壁材，對(duì)照組為混合組(WIMIX)，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%乳清蛋白90℃加熱2.5 h后加入1/4質(zhì)量的低聚異麥芽糖；實(shí)驗(yàn)組為乳清蛋白與低聚異麥芽糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物組（WIMRPs），質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%乳清蛋白加入1/4質(zhì)量的低聚異麥芽糖，加熱溫度90℃，加熱時(shí)間2.5 h。

微膠囊的制備按照Sadeghi等[14]的方法，并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行部分調(diào)整：取不同條件的壁材溶液20 mL，將鼠李糖乳桿菌濃縮液與壁材溶液比例（菌膠比）為1∶10，混合均勻，加入質(zhì)量濃度為0.35 g/L葡萄酸內(nèi)酯（GDL），濃度為0.1 mol/L的CaCl2后立即加入到5倍豆油的三角瓶中，放在磁力攪拌器，轉(zhuǎn)速為900 r/min，40℃，恒溫加熱2 h，使其充分凝膠形成微膠囊。將微膠囊和油混合液分離，采用離心機(jī)分離，5 000 g，5 min。

1.3.2 干燥方式對(duì)鼠李糖乳桿菌微膠囊活性的影響

（1）冷凍干燥法制作鼠李糖乳桿菌微膠囊。將上述乳化凝膠法得到的濕益生菌微膠囊放入平皿中放入-20℃冰箱中預(yù)凍12 h，然后將平皿放入凍干機(jī)，凍干溫度設(shè)置為-50℃，凍干真空度為5.0 Pa，冷凍干燥16 h后得到微膠囊凍干品。

（2）噴霧干燥法制作鼠李糖乳桿菌微膠囊。取保藏菌種活化3代，接種于MRS瓊脂平板上，37℃厭氧培養(yǎng)48 h。挑取新鮮單菌落接種于1 000 mL液體MRS基中，37℃靜置培養(yǎng)48 h。4℃，6 000 g離心5 min，適量生理鹽水清洗離心3次獲得菌泥，加入適量生理鹽水制成菌懸液，備用。將壁材溶液與濃縮菌液按照體積（10∶1）充分混合，將此混合液進(jìn)行噴霧干燥，噴霧干燥的工藝參數(shù)進(jìn)風(fēng)溫度160℃，泵速15 mL/min。收集噴霧干燥器的底部微膠囊粉末。

（3）干燥方式對(duì)鼠李糖乳桿菌微膠囊活性影響。準(zhǔn)確稱取0.5 g微膠囊干燥樣品，加入到4.5 mL生理鹽水中。微膠囊菌活力計(jì)算，參照Reid等[15]機(jī)械破碎法略有改動(dòng)，取過(guò)濾得到微膠囊0.5 g，加入4.5 mL濃度為50 mmol/L的檸檬酸鈉溶液，在均質(zhì)機(jī)轉(zhuǎn)速為10 000 r/min（45 s），打破微膠囊釋放鼠李糖乳桿菌。連續(xù)10倍稀釋，取100 μL涂布平板法培養(yǎng)48 h，計(jì)算活菌數(shù)。

1.3.3 干燥方式對(duì)鼠李糖乳桿菌微膠囊微觀結(jié)構(gòu)的影響

將干燥后的微膠囊置于玻璃皿內(nèi)，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.0%的四氧化鋨氣體固定，用雙面膠將其粘在樣品臺(tái)上，離子濺射后用掃描電鏡觀察微膠囊表面結(jié)構(gòu)，加速電壓5.0 kV。

1.3.4 干燥方式對(duì)鼠李糖乳桿菌微膠囊儲(chǔ)藏穩(wěn)定性的影響

（1）鼠李糖乳桿菌微膠囊水分活度測(cè)定。取少量干燥后的微膠囊粉末，放置于快速水分活度儀中，在25℃下測(cè)定微膠囊的水分活度。

（2）鼠李糖乳桿菌微膠囊冷藏穩(wěn)定性測(cè)定。將干燥后的微膠囊放置于無(wú)菌的西林瓶中，封口后將西林瓶放置于4℃冷藏1個(gè)月，每隔15 d從西林瓶中取出0.5 g樣品，加入到4.5 mL生理鹽水中，充分復(fù)水后，參照1.3.2（3）中方法對(duì)微膠囊中的活菌數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)。

1.3.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

每個(gè)實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，結(jié)果表示為平均數(shù)(Mean)± SD。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用Statistix 8.1(分析軟件,St Paul,MN)軟件包中Linear Models程序進(jìn)行，差異顯著性(P＜0.05)分析使用Tukey HSD程序。采用Sigma?plot11.0軟件作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 干燥方式對(duì)鼠李糖乳桿菌微膠囊菌活力的影響

干燥方式對(duì)益生菌微膠囊活力影響顯著，其中冷凍干燥的低溫和噴霧干燥較高的進(jìn)風(fēng)溫度是對(duì)益生菌微膠囊產(chǎn)品活性影響最大的因素。本研究選取兩種干燥具體工藝參數(shù)，充分考慮了益生菌微膠囊的活性和產(chǎn)量，以及益生菌微膠囊的水分質(zhì)量分?jǐn)?shù)及貯存穩(wěn)定性（圖1）。

圖1 兩種干燥方法對(duì)微膠囊菌活力的影響

由圖1可以看出，采用凍干方法制備的WIMRPs微膠囊存活量（對(duì)數(shù)值）從9.55 g-1下降到7.91 g-1。WIMIX微膠囊從9.57g-1下降到7.57g-1（對(duì)數(shù)值，下同）。采用噴霧干燥方法制備的WIMRPs微膠囊中菌活力的從10.54 g-1下降到7.27g-1（對(duì)數(shù)值）。WIMIX微膠囊從10.32 g-1下降到7.06 g-1（對(duì)數(shù)值）。WIM?RPs微膠囊通過(guò)冷凍干燥方法使菌活力下降了1.6個(gè)對(duì)數(shù)值，而噴霧干燥使菌活力下降3個(gè)對(duì)數(shù)值。這是由于鼠李糖乳桿菌對(duì)高溫比較敏感，雖然噴霧干燥很短時(shí)間內(nèi)蒸發(fā)水分帶走大部分熱能，但剩余的熱量也會(huì)造成菌活力大量損失。進(jìn)風(fēng)溫度過(guò)高會(huì)使菌活性迅速下降，本研究選擇160℃時(shí)水分的蒸發(fā)速度慢，為了減少產(chǎn)品水活度，采用減少進(jìn)料量，使液滴表面水分散失加快，成膜速度提高。但進(jìn)料量降低可能使微膠囊在儀器內(nèi)停留時(shí)間延長(zhǎng)，造成活力下降。冷凍干燥下真空去除水分，此過(guò)程中壁材中低聚異麥芽糖可能起到兩個(gè)作用，隨著水分損失，可能造成糖濃度上升，使菌細(xì)胞內(nèi)外滲透壓過(guò)大，活力降低。另外，糖內(nèi)羥基可以取代水分子與菌體中某些成分結(jié)合形成氫鍵，在冷凍干燥過(guò)程保護(hù)細(xì)胞膜和胞內(nèi)蛋白中免受損傷[16]，低聚異麥芽糖可能充當(dāng)凍干保護(hù)劑，減少菌體在低溫下活力的損失。

2.2 干燥方式對(duì)鼠李糖乳桿菌微膠囊微觀結(jié)構(gòu)的影響

2.2.1 噴霧干燥法制備鼠李糖乳桿菌微膠囊電鏡圖

一般只能通過(guò)進(jìn)風(fēng)溫度、進(jìn)料速度和出風(fēng)溫度來(lái)控制噴霧干燥過(guò)程。進(jìn)風(fēng)溫度雖然很高，但進(jìn)料霧化后水分在極短時(shí)間內(nèi)吸熱蒸發(fā)，使溫度迅速降低，出風(fēng)溫度實(shí)際代表著噴霧干燥器內(nèi)的整體溫度，即微膠囊顆粒實(shí)際所處的溫度。本研究所采用的實(shí)驗(yàn)室用小型噴霧干燥器，不能調(diào)節(jié)出風(fēng)溫度，必須用進(jìn)風(fēng)溫度及速度和進(jìn)樣流量共同調(diào)節(jié)。進(jìn)風(fēng)溫度過(guò)高容易造成微膠囊表面開(kāi)裂，導(dǎo)致包埋效率和產(chǎn)率下降，但進(jìn)風(fēng)溫度過(guò)低，造成產(chǎn)品水分含量過(guò)高嚴(yán)重粘壁影響微膠囊收集和分散。此外，由于本研究芯材采用鼠李糖乳桿菌，應(yīng)用噴霧干燥法應(yīng)考慮包埋產(chǎn)率和菌體存活率兩方面。從生物學(xué)角度看，噴霧干燥參數(shù)確定對(duì)益生菌微膠囊內(nèi)菌活力影響是非常大的。本研究結(jié)合實(shí)際試驗(yàn)情況將噴霧干燥器參數(shù)定為進(jìn)風(fēng)溫度160℃，泵速15 mL/min，調(diào)節(jié)風(fēng)速控制出口溫度約80℃。將兩種壁材經(jīng)噴霧干燥法制得的微膠囊在掃描電鏡下放大1 000，2 000，5 000倍觀察微膠囊的微觀結(jié)構(gòu)，如圖2所示。

圖2 噴霧干燥微膠囊掃描電鏡圖

將壁材溶液與菌液混合經(jīng)噴霧干燥霧化后，霧滴表面是壁材液體，益生菌會(huì)處于霧滴內(nèi)部，這種微膠囊顆粒為表面略有塌凹的球形。這些表面凹陷是噴霧干燥微膠囊產(chǎn)品具有的普遍特征[17]。由圖2可以看出，WIMIX和WIMRPs壁材微膠囊外觀形態(tài)均為圓形，并且分散性較好。圖2（a）中，WIMIX壁材微膠囊微觀結(jié)構(gòu)有噴霧干燥典型的凹陷，部分表面是非連續(xù)，有裂縫和孔隙。圖2（b）與圖2（a）比較，顆粒表面光滑，產(chǎn)品顆粒較圓整，呈球形，未見(jiàn)縫隙和破裂，表明有較包埋效果較好，但是表面有一些小凹坑，這種現(xiàn)象是噴霧干燥過(guò)程的冷卻階段，由于高速率噴霧，壁材固化比熱氣流造成的微膠囊膨脹要早，壁材皺縮造成表面凹陷。噴霧干燥過(guò)程中，隨著物料中水分的蒸發(fā)，這些多支鏈結(jié)構(gòu)的分子在細(xì)菌的周圍交織結(jié)合形成一層層的囊膜，將細(xì)菌包裹起來(lái)，使其在熱風(fēng)中能夠存活下來(lái)。但由于乳清蛋白分子間與美拉德反應(yīng)產(chǎn)物分子間的結(jié)合作用力不同，形成微膠囊厚度不同，所以微觀結(jié)構(gòu)有所差異。從表面結(jié)構(gòu)來(lái)看，WIMRPs組與WIMIX組比較更適于作為益生菌微膠囊壁材。

2.2.2 冷凍干燥法制備鼠李糖乳桿菌微膠囊電鏡圖

真空冷凍干燥特別適合干燥熱敏性和極易氧化的食品物料，能較大限度保留食品中活性成分及營(yíng)養(yǎng)成分。在冷凍干燥過(guò)程中受到冷凍和干燥兩種因素的作用，導(dǎo)致益生菌活力下降。低溫作用使益生菌內(nèi)外產(chǎn)生的冰晶會(huì)對(duì)細(xì)胞造成機(jī)械損傷；而干燥作用，細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)、性質(zhì)改變導(dǎo)致滲透性損傷。本研究將內(nèi)源乳化法制作的益生菌微膠囊預(yù)凍后，真空冷凍干燥參數(shù)為溫度-50℃，真空度為5.0 Pa，冷凍干燥16 h后得到微膠囊。將兩種壁材凍干微膠囊在掃描電鏡下放大1 000，2 000，5 000倍觀察微膠囊的微觀結(jié)構(gòu)，如圖3所示。

圖3 冷凍干燥后微膠囊的掃描電鏡觀察結(jié)果

由圖3可以看出，兩種壁材微膠囊在冷凍干燥后均存在聚集現(xiàn)象，隨處可見(jiàn)型狀不規(guī)則的聚集體。乳清蛋白益生菌微膠囊在凍干后的這種聚集現(xiàn)象已經(jīng)許多文獻(xiàn)所報(bào)道，這是由本身的柔軟性和易脆性所致。兩種壁材表面都較光滑，可能是由于低聚異麥芽糖加入能保留住一些水分子以抵抗表面壓力，形成較均一光滑的外壁。美拉德反應(yīng)產(chǎn)物壁材微膠囊凍干后的微觀的結(jié)構(gòu)(圖3b)和混合組(圖3a)有明顯的不同，美拉德反應(yīng)產(chǎn)物壁材微膠囊單體表面較光滑，表面致密，結(jié)構(gòu)緊實(shí)。WIMIX壁材微膠囊雖然表面也很光滑，但存在有一些的塌陷現(xiàn)象，是由于冷凍干燥過(guò)程中水分流失造成[18]。由于蛋白與糖交聯(lián)形成的聚合物在干燥過(guò)程中結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，不容易發(fā)生形變，因此冷凍干燥WIMRPs微膠囊擁有更光滑的外表。

2.3 干燥方式鼠李糖乳桿菌微膠囊冷藏穩(wěn)定性測(cè)定

2.3.1 對(duì)鼠李糖乳桿菌微膠囊水分活度

包埋方法對(duì)微膠囊的水分活度有顯著的影響，本研究的方法分別測(cè)定了微膠囊的水分活度，結(jié)果如表1所示。冷凍干燥水分活度顯著低于噴霧干燥（P＜0.5），同種干燥方法兩種壁材水分活度差異不明顯（P＞0.5）。Chávez等[19]研究發(fā)現(xiàn)益生菌儲(chǔ)藏的最高安全水分活度為0.25。本研究涉及此范圍內(nèi)的只有冷凍干燥的WIMRPs微膠囊。低聚異麥芽糖的吸濕性可能是引起的水分活度輕微升高的原因。

表1 兩種包埋方法的水分活度

2.3.2 對(duì)鼠李糖乳桿菌微膠囊儲(chǔ)藏穩(wěn)定性的影響

檢驗(yàn)兩種壁材及干燥方法制作出的微膠囊的儲(chǔ)藏穩(wěn)定性。本研究將兩種壁材不同方法制作的干微膠囊放在4℃冷藏保存，分別在15 d和30 d取樣，檢測(cè)其微膠囊中菌的活力。結(jié)果如圖4所示。

圖4 微膠囊在4℃條件下儲(chǔ)藏穩(wěn)定性

在4℃冷藏儲(chǔ)藏30 d后發(fā)現(xiàn)，所有微膠囊中的菌活力都有不同程度的下降，兩種壁材微膠囊中鼠李糖乳桿菌的存活量都顯著下降（P＜0.05），采用冷凍干燥制得美拉德產(chǎn)物壁材微膠囊存活量（對(duì)數(shù)值）從8.57 g-1下降到8.16 g-1，混合組的從8.30 g-1下降到7.31 g-1（對(duì)數(shù)值，下同）。采用噴霧干燥制得美拉德產(chǎn)物壁材微膠囊存活量從7.15 g-1下降到6.62 g-1（對(duì)數(shù)值），混合組從7.22 g-1下降到6.25 g-1（對(duì)數(shù)值）。結(jié)果顯示美拉德產(chǎn)物壁材微膠囊經(jīng)冷凍干燥有更好的儲(chǔ)藏穩(wěn)定性。

Sandra等[20]將大米淀粉和菊粉混合經(jīng)噴霧干燥法包埋鼠李糖乳桿菌制成微膠囊，結(jié)果發(fā)現(xiàn)菊粉作為益生元能提高菌在存儲(chǔ)期的活力。Vodnar等[21]將干酪乳桿菌、植物乳桿菌加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的富硒綠茶提取物（益生元）制作微膠囊，發(fā)現(xiàn)能顯著提高30天冷藏溫度下的儲(chǔ)藏穩(wěn)定性。這主要是小分子糖對(duì)細(xì)胞壁具有穩(wěn)定作用，升高壁材玻璃化轉(zhuǎn)變溫度將有利于提高益生菌在儲(chǔ)藏過(guò)程中的穩(wěn)定性[22]。美拉德反應(yīng)產(chǎn)物具有清除氧和降低氧化還原電勢(shì)的作用[23]，為厭氧或微好養(yǎng)的益生菌細(xì)胞提供一個(gè)適宜的儲(chǔ)藏環(huán)境，而且美拉德產(chǎn)物凍干組具有較低的水分活度，一般，水分活度低有利于益生菌的儲(chǔ)藏。在4℃冷藏儲(chǔ)藏條件下，美拉德反應(yīng)產(chǎn)物為壁材的微膠囊比混合組微膠囊具有較好的儲(chǔ)藏穩(wěn)定性，儲(chǔ)藏期間給鼠李糖乳桿菌帶來(lái)更好的保護(hù)。

微膠囊壁的完整性從側(cè)面反映微膠囊對(duì)益生菌的包埋率和保護(hù)能力，通過(guò)觀察兩種壁材制作微膠囊微觀結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)美拉德產(chǎn)物壁材微膠囊表面更光滑，經(jīng)冷凍干燥后微膠囊水分活度更適合微膠囊的儲(chǔ)藏，且在4℃儲(chǔ)藏30 d后活力能保持在8.0 g-1（對(duì)數(shù)值）以上。

3 結(jié)論

本研究將混合組和美拉德產(chǎn)物壁材組經(jīng)冷凍干燥和噴霧干燥兩種方式制成干微膠囊，并對(duì)微觀結(jié)構(gòu)進(jìn)行了對(duì)比，發(fā)現(xiàn)噴霧干燥法制備美拉德產(chǎn)物壁材微膠囊顆粒噴霧干燥具有特征表面略有塌凹的球形，分散性較好。冷凍干燥美拉德產(chǎn)物壁材微膠囊表現(xiàn)為不規(guī)則的聚集體，其單體表面較光滑，表面致密，結(jié)構(gòu)緊實(shí)。從鼠李糖乳桿菌微膠囊儲(chǔ)藏活性來(lái)看冷凍干燥優(yōu)于噴霧干燥法，美拉德產(chǎn)物壁材微膠囊儲(chǔ)藏期穩(wěn)定性好于混合壁材。通過(guò)對(duì)比冷凍干燥和噴霧干燥兩種干燥方式對(duì)乳清蛋白與低聚異麥芽糖混合壁材與美拉德產(chǎn)物壁材微膠囊儲(chǔ)藏對(duì)鼠李糖乳桿菌活力的影響，發(fā)現(xiàn)冷凍干燥乳清蛋白與低聚異麥芽糖壁材微膠囊經(jīng)儲(chǔ)藏后有更高的菌活力。

[1]DASARI S,KATHERA C,JANARDHA A,et al.Surfacing role of probiotics in cancer prophylaxis and therapy:A systematic review[J]. Clinical Nutrition,2016.

[2]AKOGLU B,LOYTVED A,NUIDING H,et al.Probiotic Lactoba?cillus casei Shirota improves kidney function,inflammation and bowel movements in hospitalized patients with acute gastroenteritis–A pro?spective study[J].Journal of Functional Foods,2015,17:305-313.

[3]陳超,楊劍,朱俊晨,劉莉萍,孫巖嘯.益生菌微膠囊化壁材與方法的研究進(jìn)展[J].食品工業(yè)科技,2012,14:403-407.

[4]CABUK B,TELLIOGLU H S.Protection of Lactobacillus acidophi?lus NRRL-B 4495 under in vitro gastrointestinal conditions withwhey protein/pullulan microcapsules.[J].Journal of Bioscience&Bio?engineering,2015,120(6):650-656.

[5]李錚,羅永康,馮力更,等.乳清蛋白-低聚異麥芽糖的制備及抗原性研究[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2011（2）:133-137.

[6]楊赫鴻,劉騫,孔保華,李沛軍,張紅濤,常釗.美拉德反應(yīng)中乳清分離蛋白特性的變化[J].食品科學(xué),2012,23:98-102.

[7]SHAH B,DAVIDSON P M,ZHONG Q.Encapsulation of eugenol using Maillard-type conjugates to form transparent and heat stable na?noscale dispersions[J].LWT-Food Science and Technology,2012,49 (1):139-148.

[8]CHOI K O,RYU J,KWAK H S,et al.Spray-dried conjugated lin?oleic acid encapsulated with Maillard reaction products of whey pro?teins and maltodextrin[J].Food Science and Biotechnology,2010,19 (4):957-965.

[9]ARSLAN S,ERBAS M,TONTUL I,et al.Microencapsulation of probiotic Saccharomyces cerevisiae,var.boulardii,with different wall materials by spray drying[J].Lebensmittel-Wissenschaft und-Technol?ogie,2015,63(1):685-690.

[10]PAIM D R S F,COSTA S D O,WALTER E H M,et al.Microen?capsulation of probiotic jussara(Euterpe edulis,M.)juice by spray drying[J].LWT-Food Science and Technology,2016,74:21-25.

[11]胡珊,胡事君,吳清平,羅華建,梁衛(wèi)驅(qū),羅詩(shī),陳仕麗.益生菌制劑加工技術(shù)的研究概況[J].中國(guó)乳品工業(yè),2010,03:47-50.

[12]JUAREZ Tomás M S,DE GREGORIO P R,LECCESE TER?RAF M C,et al.Encapsulation and subsequent freeze-drying of Lac?tobacillus reuteri CRL 1324 for its potential inclusion in vaginal pro?biotic formulations.[J].European journal of pharmaceutical sciences: official journal of the European Federation for Pharmaceutical Scienc?es,2015,79:87.

[13]朱永明;乳清蛋白與低聚異麥芽糖美拉德產(chǎn)物包埋鼠李糖乳桿菌的研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年.

[14]SADEGHI S,MADADLOU A,YARMAND M.Microemulsifica?tion–cold gelation of whey proteins for nanoencapsulation of date palm pit extract[J].Food Hydrocolloids,2014,35:590-596.

[15]REID A A,CHAMPAGNE C P,GARDNER N,et al.Survival in food systems of Lactobacillus rhamnosus R011 microentrapped in whey protein gel particles[J].Journal of food science,2007,72(1): M031-M037.

[16]胡曼.兩歧雙歧桿菌培養(yǎng)及凍干保護(hù)劑的研究[D].陜西科技大學(xué), 2012.

[17]SHAMAEI S,SEIIEDLOU S S,AGHBASHLO M,et al.Microen?capsulation of walnut oil by spray drying:Effects of wall material and drying conditions on physicochemical properties of microcapsules[J]. Innovative Food Science&Emerging Technologies,2017,39: 101-112.

[18]LI X,CHEN X.Drying of micro-encapsulated lactic acid bacteria—Effects of trehalose and immobilization on cell survival and release properties[J].Journal of Ocean University of China,2009,8(1): 39-44.

[19]CHAVEZ B E,LEDEBOER A M.Drying of probiotics:optimiza?tion of formulation and process to enhance storage survival[J].Drying Technology,2007,25(7-8):1193-1201.

[20]AVILA-REYES S V,GARCIA-SUAREZ F J,JIMENEZ M T,et al.Protection of L.rhamnosus by spray-drying using two prebiotics colloids to enhance the viability[J].Carbohydrate polymers,2014, 102:423-430.

[21]VODNAR D C,SOCACIU C.Selenium enriched green tea in?crease stability of Lactobacillus casei and Lactobacillus plantarum in chitosan coated alginate microcapsules during exposure to simulated gastrointestinal and refrigerated conditions[J].LWT-Food Science and Technology,2014,57(1):406-411.

[22]ANANTA E,VOLKERT M,KNORR D.Cellular injuries and stor?age stability of spray-dried Lactobacillus rhamnosus GG[J].Interna?tional Dairy Journal,2005,15(4):399-409.

[23]RUSLI J K,SANGUANSRI L,AUGUSTIN M A.Stabilization of oils by microencapsulation with heated protein-glucose syrup mix?tures[J].Journal of the American Oil Chemists'Society,2006,83 (11):965-972.

Effects of encapsulation methods on vitality of L.rhamnosus microcapsules during storage

LI Jiajun1,LIU Lu2,LI Xiaodong2
(1Heilongjiang Yaolan Dairy Technology Stock Company Ltd,Harbin,150010,China, 2.College of Food Science,Northeast Agricultural University,Harbin,150030,China)

In order to improve the viability of Lactobacillus rhamnosus(L.rhamnosus)in the human gastrointestinal tract,L.rhamnosus was en?capsulated in whey protein/Isomaltooligosaccharide Maillard reaction products（WIMRPs）microspheres prepared by internal emulsifica?tion technique coupled with cold gelation process.The effects of encapsulation methods on vitality of L.rhamnosus microcapsules during storage was studied.The results showed that microcapsules using Maillard reaction products were smooth,seamless and non-cracking.The vitalities of bacteria encapsulated in mixture of whey protein/isomaltooligosaccharide and Maillard reaction products after spray drying were 3.26 log CFU/g,3.15 log CFU/g,respectively.While the vitalities of bacteria encapsulated in mixture of whey protein-isomaltooligosaccharide and Maillard reaction products after freeze-drying were 1.62 log CFU/g,1.51 log CFU/g,respectively.The vitalities encapsulated in mixture of whey protein/isomaltooligosaccharide and Maillard reaction products were 6.23 log CFU/g,6.61 log CFU/g in freeze-drying and 8.26 log CFU/g,7.31 log CFU/g in spray drying after refrigerated for 30 days.Aw of microcapsules using Maillard reaction products reduced after freeze-drying.Maillard reaction products had better stability of storage as wall material.

encapsulation methods;Maillard reaction;L.rhamnosus microcapsules;probiotic;viability

TS201.3

：A

：1001-2230（2017）03-0021-05

2016-08-30

黑龍江省教育廳面上項(xiàng)目(12541027)。

李佳君(1963-)，女，高級(jí)工程師，從事乳品方面的研究與開(kāi)發(fā)。

李曉東