陳芙蓉 朱丹 陳慧 袁菲 王臨英 黃鄭銘

●檢測診斷

非小細胞肺癌患者血清鱗狀細胞癌抗原水平與循環(huán)腫瘤細胞的關(guān)系研究

陳芙蓉 朱丹 陳慧 袁菲 王臨英 黃鄭銘

目的 探討非小細胞肺癌（NSCLC）患者血清鱗狀細胞癌抗原（SCC-Ag）水平與循環(huán)腫瘤細胞（CTC）的關(guān)系。方法選取NSCLC患者41例（NSCLC組）、健康體檢者40例（對照組）及良性疾病者30例（良性組），采用Cell Search系統(tǒng)檢測入選者體內(nèi)CTC數(shù)，酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清SCC-Ag水平并進行對照分析。結(jié)果 NSCLC組CTC數(shù)高于良性組及對照組（均P＜0.05）；NSCLC組CTC數(shù)與血清SCC-Ag水平呈正相關(guān)（r=0.782，P＜0.05）。 結(jié)論 對于臨床可疑的NSCLC患者檢測血清SCC-Ag水平與CTC數(shù)，能夠提高NSCLC的臨床檢出率，有助于患者進行及時有效的治療。

非小細胞肺癌 循環(huán)腫瘤細胞 鱗狀細胞癌抗原

肺癌是一類發(fā)生于支氣管黏膜上皮的惡性腫瘤，在我國乃至全世界范圍都算是一類發(fā)病率和致死率極高的疾病，臨床上非小細胞肺癌（NSCLC）的發(fā)病率占肺癌總發(fā)病率的60%左右，特別是隨著近年來隨著城市空氣污染的日趨嚴重，導(dǎo)致肺癌患者數(shù)量大幅升高[1-2]。由于早期肺癌的臨床表現(xiàn)并不明顯，所以NSCLC患者的檢出率也較低，通?；颊弑淮_診為肺癌的時候已經(jīng)處于晚期，錯過了最佳治療時間。為了能夠早期診斷NSCLC患者，對患者進行及時有效的治療，筆者將NSCLC患者體內(nèi)循環(huán)腫瘤細胞（CTC）數(shù)以及血清鱗狀細胞癌抗原（SCC-Ag）水平分別與健康體檢者和肺部良性疾病患者進行對照分析，探討NSCLC患者SCCAg水平與CTCs的相關(guān)性，以期為早期診斷NSCLC提供參考。

1 對象和方法

1.1 對象 選取本院2013年4月至2015年2月收治的NSCLC患者41例（NSCLC組），其中男24例，女17例；年齡52～82（65.3±9.2）歲；均為鱗癌。納入標準：經(jīng)氣管鏡或穿刺活檢取得病理組織，診斷為原發(fā)性NSCLC患者且尚未進行任何治療；均無器官移植史且未并發(fā)其他系統(tǒng)腫瘤。同時選取在本院進行體檢的健康者40例（對照組）以及肺部良性疾病患者30例（良性組，均表現(xiàn)為體積較小的氣管或支氣管瘤，少數(shù)有咳嗽和肺部感染等表現(xiàn)，多數(shù)無任何癥狀）。對照組男22例，女18例；年齡50～75（68.2±8.7）歲；良性組男16例，女14例；年齡55～78（66.3±6.8）歲。3組患者的年齡、性別比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05）。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準，經(jīng)患者知情同意。

1.2 方法 采用Cell Tracks Auto Prep系統(tǒng)和Cell Tracks AnalyzerⅡ系統(tǒng)（美國強生公司產(chǎn)）測定CTC及SCCAg水平，配合移液器、漩渦震蕩儀、上樣緩沖液、清洗液、去離子水以及Cell Search CTC試劑盒和質(zhì)控試劑盒。Cell Save專用收集管采集研究對象外周血，將每支Cell Save管中的7.5ml血液注入帶有適當標記的Cell Tracks Auto Prep錐形瓶中。向裝有樣本的每支錐形瓶加入6.5ml稀釋緩沖液。800g離心15min，在 Cell Tracks Auto Prep系統(tǒng)上對試管進行處理。采集血液后于室溫保存并于96h進行檢測，按照儀器操作說明進行檢測和結(jié)果判定。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件，計量資料以表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用SNK-q法；計數(shù)資料以百分率表示，組間比較之采用χ2檢驗；相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)。

2 結(jié)果

2.1 3組CTC、SCC-Ag水平比較 見表1。

由表1可見，NSCLC組CTC數(shù)及SCC-Ag水平均高于對照組及良性組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）。

表1 3組CTC、SCC-Ag水平比較

2.2 NSCLC患者CTC數(shù)與SCC-Ag水平的相關(guān)性分析 相關(guān)分析示NSCLC患者外周血液中CTC數(shù)與血清SCC-Ag水平呈正相關(guān)（r=0.782，P＜0.05）。

3 討論

隨著NSCLC患者數(shù)量逐年擴增，如何在患者早期提前檢測出腫瘤的存在問題得到了越來越多專家學(xué)者的關(guān)注。但是因為早期NSCLC的癥狀并不明顯，臨床上使用胸部X線及CT檢查等影像學(xué)診斷難以檢測出NSCLC的存在，致使大多數(shù)患者一旦被檢查出罹患肺癌已經(jīng)是處于癌癥中、晚期階段[3]。

臨床上除了使用胸部X線、CT等影像學(xué)檢查手段對NSCLC進行檢查之外，患者體內(nèi)的血清標志物和分子標志物等因素也是肺癌診斷及預(yù)后判斷的參考依據(jù)[4]。患者體內(nèi)SCC-Ag水平可在一定程度上體現(xiàn)NSCLC患者的臨床病情，幫助醫(yī)生進行診斷和判斷預(yù)后[5]。但是僅利用單一的腫瘤標志物對患者體內(nèi)腫瘤進行檢測判斷存在一定的局限性，并不能夠準確地檢測出患者體內(nèi)的腫瘤情況[6]。因此，本研究探索CTC數(shù)和血清SCC-Ag水平對早期診斷NSCLC的價值。腫瘤標志物是反映腫瘤存在的一類化學(xué)物質(zhì)，在細胞發(fā)生癌變和增殖的過程中產(chǎn)生[7]。其分類主要有癌胚蛋白、腫瘤相關(guān)抗原、酶、特殊血漿蛋白、激素和原癌基因、抑癌基因及其產(chǎn)物等[8]。而CTC則是存在于患者外周血液中的各類腫瘤細胞的總稱，該類腫瘤細胞是從實體腫瘤病灶上脫落進入外周血液，大部分CTC會凋亡或者被吞噬細胞吞噬，小部分CTC則會逐漸發(fā)展成轉(zhuǎn)移灶[9-10]。血清SCC-Ag首次發(fā)現(xiàn)于1977年，從宮頸鱗癌組織中分離出來，是一組腫瘤相關(guān)蛋白，與鱗狀癌細胞的侵襲、轉(zhuǎn)移以及復(fù)發(fā)和預(yù)后有著密切的關(guān)系[11]。

本次研究結(jié)果顯示，NSCLC患者外周血液中的CTC數(shù)顯著高于健康人及肺部良性疾病者，NSCLC患者血清SCC-Ag水平高于健康人及良性疾病者；NSCLC患者外周血液中的CTC數(shù)與血清SCC-Ag水平呈正相關(guān)。健康人體內(nèi)不存在CTC，只存在微量的血清SCCAg，而NSCLC患者體內(nèi)才存在CTC和大量血清SCCAg，并且在NSCLC患者與肺部良性疾病者的比較中可以發(fā)現(xiàn)，隨著患者病情的惡化，患者體內(nèi)的CTC數(shù)以及血清SCC-Ag水平均會顯著增高[12-13]。對于臨床可疑的NSCLC患者檢測血清SCC-Ag水平與CTC數(shù)，能夠提高NSCLC的臨床檢出率和降低誤診率，從而對患者進行及時有效的治療。

[1]浙江省抗癌協(xié)會抗癌藥物專業(yè)委員會專家組.浙江省非小細胞肺癌血液EGFR基因突變檢測專家共識[J].浙江醫(yī)學(xué),2016,38(4):233-236, 290.

[2]Hong D,Zhang G,Zhang X,et al.Pulmonary Toxicities of Gefitinib in Patients With Advanced Non-Small-CellLung Cancer:AMeta-Analysis of Randomized Controlled Trials[J].Medicine(Baltimore), 2016,95(9):e3008.

[3]張為迪,李輝,宋平平,等.非小細胞肺癌肺靜脈血中循環(huán)腫瘤細胞的檢測分析[J].山東醫(yī)藥,2012,52(24):51-53.

[4]Takeda M,Sakai K,Okamoto K,et al.Genome sequencing for non-small cell lung cancer identifies a basis for nintedanib sensitivity[J].Ann Oncol,2016,27(4):748-750.

[5]陳鵬,李雷.非小細胞肺癌循環(huán)腫瘤細胞檢測進展[J].中國腫瘤臨床, 2013,40(14):862-865.

[6]Decatris M P,Farrugia D,O'Byrne K J.Clinician Perspective on Molecular Profiling of Non-Small-CellLung Cancer[J].J Clin Oncol,2016,34(8):884-886.

[7]陳燕,鄧安梅.非小細胞肺癌患者循環(huán)腫瘤細胞與SCC-Ag的相關(guān)性分析[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2014,35(7):900-901.

[8]Masters G A,Temin S,Azzoli C G,et al.Systemic Therapy for Stage IV Non-Small-Cell Lung Cancer:American Society of Clinical Oncology Clinical Practice Guideline Update[J].J Clin Oncol,2015,33(30):3488-3515.

[9]王加,潘世揚,張炳峰,等.特異性循環(huán)肺癌細胞流式檢測參考區(qū)間的建立及在非小細胞肺癌化療中的應(yīng)用[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志, 2015,38(1):45-48.

[10]趙文華,劉艷萍,于起濤,等.血清CEA水平與晚期非小細胞肺癌患者腦轉(zhuǎn)移的相關(guān)因素分析[J].廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2015,32(3):401-404.

[11]Camposilvan I,Akhtar-Danesh N,Schneider L,et al.The effect of surgeon volume on procedure selection in non-small cell lung cancer surgeries[J].J Thorac Cardiovasc Surg,2015,150 (3):507-512.

[12]洪衛(wèi),林寶釵,張貝貝,等.BCL-2基因多態(tài)性與復(fù)治晚期非小細胞肺癌TKI治療療效的關(guān)聯(lián)研究[J].浙江醫(yī)學(xué),2014(5):382-385.

[13]楊慧,吳玉芬,黃勇.非小細胞肺癌腦轉(zhuǎn)移的危險因素分析[J].山東醫(yī)藥,2015,55(7):41-43.

2016-06-28）

（本文編輯：馬雯娜）

10.12056/j.issn.1006-2785.2017.39.7.2016-985

321000 金華市中心醫(yī)院呼吸內(nèi)科

陳芙蓉，E-mail：chenxi4560@163.com