楊曉光，羊禮榮，顧 倩

(安徽省池州市人民醫(yī)院兒科 247100)

·經(jīng)驗(yàn)交流·

安徽省池州市2014-2015年嬰幼兒病毒性腹瀉標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果及杜寶拉療效觀察

楊曉光，羊禮榮，顧 倩

(安徽省池州市人民醫(yī)院兒科 247100)

目的 觀察安徽省池州市2014-2015年嬰幼兒病毒性腹瀉病原體的分布狀況及杜寶拉治療的療效。方法 將該院2014-2015 年收治的病毒性腹瀉嬰幼兒183例作為研究對(duì)象，分為觀察組和對(duì)照組，對(duì)照組采用普通止瀉藥物，觀察組采用杜寶拉，對(duì)比兩組治療療效。將183例患兒糞便樣品送市疾病預(yù)防控制中心檢測(cè)，采用ELISA檢測(cè)人輪狀病毒(HRV)抗原，RT-PCR法檢測(cè)基因分型。結(jié)果 觀察組總有效率為88.04%(81/92)，對(duì)照組總有效率64.84%(59/91)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。病毒性腹瀉的主要病原體是人杯狀病毒(HuCV)和HRV，G血清型以G3、G9型為主，P基因型以P8、P4型為主。結(jié)論 池州市嬰幼兒病毒性腹瀉的主要病原體是HuCV和HRV，杜寶拉較普通腹瀉藥物療效更好。

病毒性腹瀉；杜寶拉；療效觀察

嬰幼兒腹瀉病是我國(guó)最常見的一組由多病原、多因素引起的消化道綜合征，主要臨床表現(xiàn)為大便次數(shù)增多、大便性狀發(fā)生改變[1]。引起嬰幼兒病毒性腹瀉的主要病原有輪狀病毒、杯狀病毒、星狀病毒和腸道腺病毒[2-5]。本文觀察杜寶拉治療病毒性腹瀉嬰幼兒的療效，并對(duì)其糞便標(biāo)本進(jìn)行ELISA、RT-PCR檢測(cè)[6-7]，觀察病原體的分布狀況，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2014-2015年本院收治的病毒性腹瀉嬰幼兒183例為研究對(duì)象，患兒均為5 歲以下因腹瀉住院的兒童，將其分為兩組，對(duì)照組91例采用普通治療腹瀉用藥，觀察組92例采用杜寶拉。將183例患兒糞便樣品送市疾病預(yù)防控制中心檢測(cè)，收集并記錄患兒基本信息于腹瀉病例調(diào)查表，將腹瀉糞便樣品置于-20 ℃保存?zhèn)溆肹8-9]。病毒性腹瀉診斷標(biāo)準(zhǔn)：大便次數(shù)增加，每天3 次或者3次以上；大便性狀發(fā)生明顯改變。檢測(cè)依據(jù)、檢測(cè)項(xiàng)目及檢測(cè)儀器依據(jù)《全國(guó)病毒性腹瀉監(jiān)測(cè)方案(2007修訂版)》，檢測(cè)項(xiàng)目為人輪狀病毒(HRV)核酸、人杯狀病毒(HuCV)核酸、星狀病毒(AstV)核酸、腺病毒(AdV)核酸。

1.2 儀器與試劑 全自動(dòng)核酸分離純化儀(MagNA Pure 96，瑞士ROCHE)；病毒核酸提取試劑盒(RB050,VR100，Geneaid Biotech)；酶標(biāo)儀(SM800，美國(guó)Thermo公司)；洗板機(jī)(Wellwash，美國(guó)Thermo公司)；生物安全柜(1374，美國(guó)Thermo公司)；熒光定量PCR儀(AriaMx，安捷倫公司)；PCR儀(ProFlex 3 x 32 well PCR system，ABI公司)；臺(tái)式高速離心機(jī)(5427 R，德國(guó)Eppendorf公司)；Taq 酶(Promega M1665S，上海 Promega 公司)；ELISA試劑盒(DAKO，美國(guó)Proteintech公司)；引物合成(CX160106298-S，北京華大基因公司)；反轉(zhuǎn)錄試劑盒(K1622，美國(guó)Fermentas公司)；藥物杜寶拉(國(guó)藥準(zhǔn)字H20050411，四川百利藥業(yè)集團(tuán))。

1.3 方法

1.3.1 用藥治療 兩組臨床治療中均給予靜脈補(bǔ)液糾正脫水及退熱等治療[10]。觀察組患兒服用杜拉寶，每次1袋，1日3次；對(duì)照組選用普通止瀉藥物。

1.3.2 病毒核酸的提取 加入適量磷酸鹽緩沖液(PBS)于183份糞便標(biāo)本，用臺(tái)式離速離心機(jī)離心，制備出10% 的大便標(biāo)本懸液上清備用。取 400 μL前期處理好的大便標(biāo)本上清液，使用病毒核酸提取試劑盒和全自動(dòng)核酸分離純化儀進(jìn)行核酸提取，按說(shuō)明書進(jìn)行操作[11]。

1.3.3 病毒檢測(cè) 首先ELISA檢測(cè)HRV，結(jié)果為陽(yáng)性的標(biāo)本進(jìn)行RT-PCR基因分型，然后用RT-PCR檢測(cè)糞便標(biāo)本的HuCV、AstV，PCR檢測(cè)AdV。

1.3.4 瓊脂糖凝膠電泳 取10 μL產(chǎn)物在EB膠上進(jìn)行電泳，依據(jù)有無(wú)目的條帶判斷結(jié)果是否為陽(yáng)性，以及判別病毒株類型。

1.3.5 療效標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)1998年全國(guó)腹瀉病防治學(xué)術(shù)研討會(huì)通過(guò)的急性腹瀉病的療效標(biāo)準(zhǔn)判定療效[12]。治療后3 d內(nèi)患兒糞便性狀及次數(shù)恢復(fù)正常，全身癥狀消失為顯效；3 d時(shí)糞便性狀及次數(shù)明顯好轉(zhuǎn)，全身癥狀改善為有效；糞便性狀、次數(shù)及全身癥狀均無(wú)好轉(zhuǎn)甚至惡化為無(wú)效。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS21.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，兩組療效比較采用非參數(shù)/t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組療效比較 觀察組總有效為88.04% (81/92)，對(duì)照組總有效率64.84%(59/91)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組療效比較

2.2 患兒糞便病毒檢測(cè)情況 見表2。

2.3 HRV G分型分布 183份標(biāo)本中G血清型以G3(43.17%)、G9(33.88%)型為優(yōu)勢(shì)株。見表3。

2.4 HRV P 分型分布 183份標(biāo)本中P基因型以 P8(54.1%)、P4 (18.03%)型為優(yōu)勢(shì)株。見表4。

表2 患兒糞便病毒檢測(cè)情況

表3 HRV G分型分布

表4 HRV P分型分布

3 討 論

病毒性腹瀉是嬰幼兒時(shí)期的常見病和多發(fā)病， 在我國(guó)是危害兒童健康的主要疾病[13-14]。導(dǎo)致嬰幼兒病毒性腹瀉的主要病原體有HRV、HuCV包括諾如病毒、沙波病毒，HRV與HuCV組成病毒性腹瀉主要的病原體，此外還有AstV、AdV等。這些病毒在不同的地區(qū)、不同時(shí)期、不同人群中分布不同，且病毒性腹瀉的病原體構(gòu)成存在差異[15-16]。

為了探討安徽省池州市嬰幼兒病毒性腹瀉的病原體分布狀況，本研究對(duì)本院2014-2015年收治的病毒性腹瀉嬰幼兒的糞便標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示主要病原體是HRV和HuCV，且HRV所占比例最大，與其他地區(qū)檢測(cè)結(jié)果相一致[17-18]。通過(guò)對(duì)所測(cè)病毒進(jìn)行分型，結(jié)果顯示G型的病毒株以G3(43.17%)、G9(33.88%)型為優(yōu)勢(shì)株，P型的病毒株以P8(54.1%)、P4(18.03%)型為優(yōu)勢(shì)株，血清型分布情況與文獻(xiàn)[19]報(bào)道的亞洲地區(qū)HRV的主要分型相一致。

本研究結(jié)果顯示，杜拉寶的有效率大于普通止瀉藥物，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。且臨床反饋顯示，患兒對(duì)杜拉寶的耐受性要比普通止瀉藥好，無(wú)明顯不良反應(yīng)，該藥物臨床上對(duì)癥治療嬰幼兒腹瀉安全有效。

本研究由于條件限制，沒有對(duì)本地區(qū)其他醫(yī)院在2014-2015年嬰幼兒病毒性腹瀉的檢測(cè)和治療資料進(jìn)行收集，所選樣本僅局限在本院，因此所得結(jié)論還需要進(jìn)一步論證。

[1]香金萍，高德玉，馬生吉，等．2011-2012年甘肅省武威市嬰幼兒腹瀉病毒監(jiān)測(cè)結(jié)果分析[J]．疾病監(jiān)測(cè)，2014，29(9)：704-708．

[2]曹文東，楊濤，皮興濤，等．染料木黃酮對(duì)高同型半胱氨酸誘導(dǎo)的人血管內(nèi)皮細(xì)胞組織因子表達(dá)的干預(yù)作用[J]．中國(guó)藥物與臨床，2010，10(6)：612-614．

[3]何麗，李冬梅，楊兆玲，等．microRNA-21及Galectin-3在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及其臨床意義[J]．山西醫(yī)藥雜志，2014(10)：1158-1160．

[4]李曉樂(lè).南京地區(qū)五歲以下兒童病毒性腹瀉的分子流行病學(xué)研究[D].南京：南京大學(xué),2012.

[5]李玉香，汪楊，鮑萬(wàn)國(guó)，等．重癥甲型H1N1流感病毒基因與特異性抗體檢測(cè)的診斷意義[J]．中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2015，25(12)：2641-2643．

[6]王承訓(xùn)，黎偉明，孫利偉，等．長(zhǎng)春市2013年小兒病毒性腹瀉病原與臨床特征研究[J]．吉林醫(yī)學(xué)，2014，57(32)：7145-7146．

[7]劉志榮，陳鑫．一起學(xué)校感染性腹瀉暴發(fā)疫情調(diào)查[J]．預(yù)防醫(yī)學(xué)情報(bào)雜志，2011，27(8)：615-617．

[8]張永紅，劉增樂(lè)，王海霞，等．銀川地區(qū)兒童急性腹瀉病的病原學(xué)及臨床特點(diǎn)分析[J]．寧夏醫(yī)學(xué)雜志，2015，37(6)：539-541．

[9]林苑琪.健脾燥濕行氣法治療脾虛濕困型小兒非感染性腹瀉的臨床研究[D].廣州：廣州中醫(yī)藥大學(xué),2008.

[10]剛敏．炎琥寧治療嬰幼兒秋季腹瀉的療效觀察[J]．中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥，2013，20(23)：93-94．

[11]李長(zhǎng)生．小兒輪狀病毒腸炎流行病學(xué)特征分析[J]．實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2014(5)：636-638．

[12]98全國(guó)腹瀉病防治學(xué)術(shù)研討會(huì)組委會(huì).98全國(guó)腹瀉病防治學(xué)術(shù)研討會(huì)會(huì)議紀(jì)要[J].中華兒科雜志,1999,37(4):27-28.

[13]李鵬．鞣酸蛋白酵母散治療小兒腹瀉的療效觀察[J]．疾病監(jiān)測(cè)與控制，2011，5(5)：273-274．

[14]董小雙，王曉鳴．小兒急性腹瀉中醫(yī)外治法應(yīng)用規(guī)律研究[J]．安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2012，31(6)：6-9．

[15]王宇．喜炎平聯(lián)合思密達(dá)治療小兒腹瀉療效觀察[J]．泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2015，37(2)：220-221．

[16]楊學(xué)梅.蘭州地區(qū)2005-2006年嬰幼兒病毒性腹瀉病原學(xué)研究[D].蘭州：蘭州大學(xué),2007.

[17]陳惠芳.2012-2013年廣州市哨點(diǎn)醫(yī)院嬰幼兒病毒性腹瀉的分子流行病學(xué)研究[D].廣州：南方醫(yī)科大學(xué),2014.

[18]楊峻山，楊曉霞，李曉春．兒童病毒性腹瀉的病原學(xué)監(jiān)測(cè)結(jié)果分析[J]．疾病預(yù)防控制通報(bào)，2015(4)：56-58．

[19]Kawai K,O′brien MA,Goveia MG,et al.Burden of rotavirus gastroenteritis and distribution of rotavirus strains in Asia:a systematic review[J].Vaccine,2012,30(7):1244-1254.

楊曉光(1979-)，主治醫(yī)師，本科，主要從事兒科重癥患兒的診治工作。

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.11.035

R720.597

B

1671-8348(2017)11-1542-03

2016-10-24

2017-01-27)