李 進，張峰領(lǐng)，黎 敏，張 濤，冶生芳，魯衛(wèi)平△

(1.第三軍醫(yī)大學大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所，重慶 400042；2.西藏自治區(qū)人民醫(yī)院，拉薩 850000)

論著·臨床研究

不同海拔地區(qū)NICU血培養(yǎng)常見病原菌分布及耐藥性的對比分析*

李 進1，張峰領(lǐng)1，黎 敏1，張 濤2，冶生芳2，魯衛(wèi)平1△

(1.第三軍醫(yī)大學大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所，重慶 400042；2.西藏自治區(qū)人民醫(yī)院，拉薩 850000)

目的 對比分析不同海拔地區(qū)新生兒重癥監(jiān)護病房(NICU)血培養(yǎng)陽性病原菌的分布與耐藥性的影響因素。方法 回顧性分析2015年西藏人民醫(yī)院(高海拔地區(qū)醫(yī)院)與重慶大坪醫(yī)院(低海拔地區(qū)醫(yī)院)臨床NICU患兒血培養(yǎng)陽性主要病原菌的分布情況與耐藥情況。結(jié)果 2015年西藏人民醫(yī)院NICU患兒血培養(yǎng)陽性病原菌中，表皮葡萄球菌19株(18.4%)，大腸埃希菌18株(17.5%)，肺炎克雷伯菌14株(13.6%)，溶血葡萄球菌14株(13.6%)，嗜麥芽窄食單胞菌12株(11.7%)；重慶大坪醫(yī)院NICU患兒血培養(yǎng)病原菌主要為表皮葡萄球菌31株(19.7%)，木糖氧化產(chǎn)堿桿菌27株(17.2%)，溶血葡萄球菌18株(11.5%)，肺炎克雷伯菌14株(8.9%)，鮑曼不動桿菌14株(8.9%)。西藏人民醫(yī)院革蘭陰性桿菌檢出率較高，重慶大坪醫(yī)院革蘭陽性球菌檢出率較高，兩家醫(yī)院血培養(yǎng)主要病原菌分布差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。重慶大坪醫(yī)院耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)、產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)和多重耐藥鮑曼不動桿菌(MDRAB)陽性率均明顯高于西藏人民醫(yī)院，血培養(yǎng)主要病原菌耐藥情況差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結(jié)論 不同海拔環(huán)境因素對NICU患兒血培養(yǎng)病原菌分布及耐藥性具有重要的影響作用。

海拔；病原菌；藥物耐受性；藥敏試驗

近年來，全國各地醫(yī)院報道新生兒重癥監(jiān)護病房(NICU)患兒細菌耐藥性呈逐年增多趨勢，主要原因為病情危重，病原菌種類繁多，住院時間長，抵抗力低下，侵襲性操作增多，交叉感染增多[1]。細菌耐藥性的連續(xù)性監(jiān)測有助于了解細菌耐藥性的變遷，準確指導(dǎo)臨床醫(yī)生合理使用和選擇抗菌藥物。本文對2015年不同海拔同級別醫(yī)院的NICU患兒血培養(yǎng)病原菌的分布與耐藥性作進行分析，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 菌種來源和鑒定 菌株為2015年重慶大坪醫(yī)院(低海拔地區(qū)醫(yī)院)與西藏人民醫(yī)院(高海拔地區(qū)醫(yī)院)NICU患兒的血液標本中分離得到的所有病原菌(剔除同一患者相同部位重復(fù)分離的相同細菌)。采用法國生物梅里埃公司VETEK-MS質(zhì)譜儀和ATB菌種鑒定儀分別對分離所獲菌株鑒定。校準菌株：大腸埃希菌ATCC8739。質(zhì)控菌株為糞腸球菌ATCC19433、光滑假絲酵母菌ATCC MYA-2950(購于衛(wèi)計委臨檢中心)。

1.2 儀器與試劑 GNP29270型恒溫培養(yǎng)箱(上海精宏實驗室設(shè)備有限公司)、VETEK-MS質(zhì)譜儀、VITEK-2 Compact 全自動微生物鑒定藥敏儀、法國生物梅里埃ATB細菌分析系統(tǒng)，VITEK MS-DS靶板和VITEK MS-CHCA基質(zhì)液，血瓊脂、巧克力瓊脂、麥康凱和M-H瓊脂及藥敏紙片均購自英國OXOID公司，試劑均在有效期內(nèi)使用。

1.3 藥敏試驗 參照2015年美國臨床和實驗室標準化協(xié)會推薦的Kirby-Bauer紙片擴散法和VITEK-2全自動細菌分析系統(tǒng)檢測細菌的最小抑菌濃度(MIC)法進行抗菌藥物敏感性試驗。質(zhì)控菌株為：金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、肺炎鏈球菌ATCC49619和流感嗜血桿菌ATCC49247；系統(tǒng)將所得的數(shù)據(jù)按2015年美國實驗室標準化委員會標準進行判斷，以敏感、中介、耐藥報告結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計學處理 采用WHONET5.6軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，SPSS17.0軟件進行χ2檢驗分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 病原菌分布及構(gòu)成 2015年1-12月從高低海拔兩家醫(yī)院NICU患兒送檢血液標本中分離到病原菌分別為103株和157株。西藏人民醫(yī)院革蘭陰性桿菌56株(54.4%)，革蘭陽性球菌47株(45.6%)；主要為表皮葡萄球菌19株(18.4%)，大腸埃希菌18株(17.5%)，肺炎克雷伯菌14株(13.6%)，溶血葡萄球菌14株(13.6%)，嗜麥芽窄食單胞菌12株(11.7%)。重慶大坪醫(yī)院革蘭陰性桿菌73株(46.5%)，革蘭陽性球菌84株(53.5%)；主要為表皮葡萄球菌31株(19.7%)，木糖氧化產(chǎn)堿桿菌27株(17.2%)，溶血葡萄球菌18株(11.5%)，肺炎克雷伯菌14株(8.9%)，鮑曼不動桿菌14株(8.9%)。西藏人民醫(yī)院革蘭陰性桿菌檢出率較高，重慶大坪醫(yī)院革蘭陽性球菌檢出率較高，不同海拔地區(qū)醫(yī)院血培養(yǎng)主要病原菌分布差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。兩家醫(yī)院NICU患兒血培養(yǎng)病原菌的分布情況見圖1。

圖1 2015年1-12月不同海拔地區(qū)醫(yī)院病原菌的 分布情況

2.2 主要病原菌的耐藥情況

2.2.1 革蘭陽性球菌耐藥情況 2015年重慶大坪醫(yī)院NICU患兒血培養(yǎng)檢出主要為凝固酶陰性葡萄球菌(67株)，其中耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS) 52株(77.6%)。西藏人民醫(yī)院NICU患兒血培養(yǎng)檢出凝固酶陰性葡萄球菌為47株，其中MRCNS 22株(46.8%)。兩家醫(yī)院NICU患兒MRCNS菌株陽性率差異有統(tǒng)計學意義(χ2=11.51，P<0.05)，見表1。

表1 兩家醫(yī)院凝固酶陰性葡萄球菌中 MRCNS陽性率比較

2.2.2 革蘭陰性桿菌耐藥情況 西藏人民醫(yī)院、重慶大坪醫(yī)院NICU患兒血培養(yǎng)腸桿菌科細菌中產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(extended spectrum β-lactamases，ESBLs)菌株檢出率分別為25.0%和53.8%，ESBLs菌株陽性率差異有統(tǒng)計學意義(χ2=5.07，P<0.05)，見表2。重慶大坪醫(yī)院NICU患兒血培養(yǎng)鮑曼不動桿菌對各種抗菌藥物的耐藥率均高于西藏人民醫(yī)院，檢出率分別為35.7%、24.8%，見表3。

表2 腸桿菌科細菌中ESBLs陽性率比較

表3 2015年兩家醫(yī)院鮑曼不動桿菌對各種抗菌藥物的 耐藥率、敏感率比較

3 討 論

新生兒血流感染是一種嚴重的全身感染性疾病，血培養(yǎng)是確診血流感染的重要依據(jù)[2-3]。了解不同海拔地區(qū)血培養(yǎng)病原菌的分布與耐藥性，對指導(dǎo)臨床合理用藥，有效控制血流感染有重要意義。NICU患兒血流感染主要因素有免疫功能低下、住院時間長、使用多種抗菌藥物、侵入性操作等[4-5]。NICU患兒多為低體質(zhì)量新生兒、早產(chǎn)兒，幾乎所有患兒免疫系統(tǒng)均存在較大缺陷或發(fā)育不全，容易發(fā)生感染[6]；長期住院的患兒隨著住院時間的加長接觸病原菌的可能性增加，導(dǎo)致醫(yī)院感染率的增加[7]；多種抗菌藥物的使用一方面是醫(yī)師控制不到位，另一方面也使得病原菌的耐藥性越來越強[8-9]，增加了細菌侵襲的可能，造成醫(yī)院感染；侵入性診療操作使患兒組織器官容易接觸外部不良媒介[10]，顯著增加了感染的發(fā)生率。

本研究表明，不同海拔地區(qū)醫(yī)院NICU患兒血培養(yǎng)陽性病原菌的分布與耐藥性明顯不同，高海拔地區(qū)大腸埃希菌和嗜麥芽窄食單胞菌檢出率相對較高，低海拔地區(qū)凝固酶陰性葡萄球菌檢出率較高，高海拔地區(qū)NICU患兒血培養(yǎng)陽性細菌對常用的抗菌藥物的敏感率明顯高于低海拔地區(qū)。除了經(jīng)濟條件、生活環(huán)境、醫(yī)療條件、各家醫(yī)院使用抗菌藥物不同等原因，環(huán)境因素對細菌的生物學影響、微生態(tài)的影響也是一個重要因素。西藏地處高原，平均海拔在4 000 m以上，高原環(huán)境具有氧分壓低、紫外線強、氣候多變等特點，是一個特殊的生態(tài)環(huán)境系統(tǒng)[11]。有研究表明，高原環(huán)境對微生態(tài)的改變是一個復(fù)雜的、相互關(guān)聯(lián)的過程，高原與平原條件下微生態(tài)環(huán)境明顯不同，同時高海拔地區(qū)與低海拔地區(qū)的抗菌藥物應(yīng)用略有不同[12-13]。本研究揭示，不同海拔NICU病原菌分布不同，對抗菌藥物的敏感性也不同，這可能是不同海拔環(huán)境因素不同，對細菌的生物學影響也不同，另外，使用不同抗菌藥物對細菌的耐藥性會產(chǎn)生不同影響。

調(diào)查不同海拔地區(qū)NICU患兒血培養(yǎng)陽性病原菌的分布與耐藥性，對于全面了解國內(nèi)不同地區(qū)NICU細菌耐藥性現(xiàn)狀，為制訂遏制細菌耐藥性蔓延的措施提供參考依據(jù)具有重要意義[14]。因地域環(huán)境、氣候的不同，臨床上應(yīng)合理使用抗菌藥物，控制醫(yī)院感染的暴發(fā)流行，防止醫(yī)院感染，尤其是多重耐藥菌株和泛耐藥菌株的傳播，尚需要臨床醫(yī)師和微生物實驗室人員的共同努力。

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Comparative analysis of pathogenic bacteria distribution and drug resistance from NICU blood culture at different altitudes*

LiJin1,ZhangFengling1,LiMin1,ZhangTao2,YeShengfang2,LuWeiping1△

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,InstituteofFieldSurgery,DapingHospital,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400042,China;2.People′sHospitalofTibetAutonomousRegion,Lhasa,Tibet850000,China)

Objective To compare and analyze the influencing factors of the distribution and drug resistance of blood culture positive pathogens in neonatal intensive care unit (NICU) at different altitude areas.Methods The distribution of blood culture positive pathogens and clinical susceptibility of children in NICU of two different altitude hospitals in 2015 were retrospectively analyzed.Results In 2015,children in NICU in upper elevation district hospital mainly infected with 19 strains(18.4%) of epidermis staphylococcus,18 strains(17.5%) of Escherichia coli,14 strains(13.6%) of Klebsiella pneumoniae,14 strains(13.6%) of Hemolysis staphylococcus,12 strains(11.7%) of Stenotrophomonas maltophilia;Children in NICU at low altitude hospital mainly infected with 31 strains(19.7%) of epidermis staphylococcus,27 strains(17.2%) of Achromobacter xylosoxidans,18 strains(11.5%) of Hemolysis staphylococcus,14 strains(8.9%) of Klebsiella pneumoniae,14 strains(8.9%) of Acinetobacter baumannii.The detection rate of Gram-negative bacilli in high-altitude hospital was higher,and the detection rate of Gram-positive cocci in low altitude hospital was higher.In high-altitude district hospital,the detection rate of methicillin-resistant coagulase-negative staphylococci (MRCNS) extended-spectrum β-lactamase (ESBLs),and multidrug-resistant Acinetobacter baumannii(MDRAB) were than low altitude hospital.Conclusion Escherichia coli and Stenotrophomonas maltophilia detection rate and common antibiotics sensitive rate are relatively high at upper elevation areas;Detection rate of coagulase negative Staphylococcus aureus and common antibiotics resistance rate are high in low altitude.Different altitudes environmental factors may play an important role in pathogens distribution and drug resistance from NICU blood culture.

altitude；pathogenic bacteria；drug tolerance；drug sensitive test

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.11.006

全軍醫(yī)學科研“十二五”計劃面上項目(CWS13J039) 。 作者簡介：李進(1986-)，初級技師，在讀碩士，主要從事病原微生物學的研究?！?/p>

，E-mail:ronnylu@126.com。

R446.5

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1671-8348(2017)11-1463-03

2016-11-05

2016-12-21)