馮月男，孫思邈，卞敬琦，牛雯穎，張玉坤，肖洪彬

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040)

欣通膠囊對(duì)犬急性心肌梗死血液流變學(xué)指標(biāo)的影響

馮月男，孫思邈，卞敬琦，牛雯穎，張玉坤，肖洪彬*

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040)

目的:探討欣通膠囊對(duì)急性心肌梗死模型犬血液流變學(xué)的影響。方法：30只中華田園犬，隨機(jī)分為空白組、模型組、欣通膠囊高、中、低劑量組及陽(yáng)對(duì)藥組，除空白組外，其他組結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支，復(fù)制心肌梗死動(dòng)物模型，一次性十二指腸給藥，觀察給藥前及給藥后15、30、60、120、180、360 min不同劑量組模型犬全血黏度、紅細(xì)胞壓積的變化。結(jié)果：與模型組比較，欣通膠囊高劑量組可以降低6 h各個(gè)切變率下的全血黏度及HCT值(P<0.05)；中劑量組降低3 S-1、60 S-1全血黏度(P<0.05)；低劑量組可降低60 S-1全血黏度(P<0.05)。結(jié)論：欣通膠囊可降低急性心肌梗死引起的全血黏度及紅細(xì)胞壓積，從而降低梗死導(dǎo)致血瘀帶來(lái)的損害，對(duì)受損心肌起到保護(hù)作用。

欣通膠囊；急性心肌梗死；全血黏度；紅細(xì)胞壓積

急性心肌梗死(Acute myocardial infarction，AMI) 發(fā)病原因是冠狀動(dòng)脈產(chǎn)生病理性改變，引發(fā)冠脈血流的供應(yīng)突發(fā)性減少甚至中斷，從而導(dǎo)致病變區(qū)域的心肌細(xì)胞發(fā)生嚴(yán)重持久地急性缺血，引發(fā)疾病[1]。血栓形成的生理過(guò)程具有多樣性和復(fù)雜性，受許多因素影響，如血小板聚集，生化和血液流變學(xué)指標(biāo)改變的影響[2]。因此，血小板聚集及血液流變學(xué)指標(biāo)，人體患心血管系統(tǒng)疾病時(shí)預(yù)防血栓的臨床檢驗(yàn)指標(biāo)。該實(shí)驗(yàn)通過(guò)復(fù)制犬急性心肌梗死模型，觀察模型犬全血黏度各個(gè)切變率的變化及紅細(xì)胞壓積的改變，從而證明欣通膠囊對(duì)犬急性心肌梗死血液流變學(xué)指標(biāo)的影響，說(shuō)明受試藥欣通膠囊對(duì)心肌梗死模型引起的血液流變學(xué)變化的作用，從而為欣通膠囊在治療臨床急性心肌梗死時(shí)用藥做出實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)藥品

陽(yáng)性對(duì)照藥：地奧心血康膠囊(成都地奧制藥集團(tuán)有限公司)；受試藥物：欣通膠囊(黑龍江久久藥業(yè)有限公司)。

1.2 試劑

檸檬酸鈉(北京化工廠，批號(hào)：20151209)；生理鹽水(哈爾濱三聯(lián)藥業(yè)，批號(hào)：150107D14)；復(fù)方酒精消毒液 (山東利爾康消毒科技股份有限公司，批號(hào)：150403)；戊巴比妥鈉(上海化學(xué)試劑公司 ，批號(hào)：F971104)。

1.3 動(dòng)物

清潔級(jí)中華田園犬(由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)安全評(píng)價(jià)中心提供)，體質(zhì)量 15～20 kg，雌雄各半。

1.4 主要檢測(cè)指標(biāo)儀器

XC-40型血沉儀(北京普利生儀器有限公司)；LBY-N6型全自動(dòng)血流變儀(北京普利生儀器有限公司)；LBY-BX型紅細(xì)胞變形儀(北京普利生儀器有限公司)。

2 方法

2.1 分組及給藥

健康級(jí)中華田園犬，適應(yīng)飼養(yǎng)7 d，隨機(jī)分成6組，分別為空白組(施開(kāi)胸術(shù)，不結(jié)扎冠狀動(dòng)脈)，給予生理鹽水3 mL/kg，模型組(開(kāi)胸并結(jié)扎冠狀動(dòng)脈)，給予生理鹽水3 mL/kg，陽(yáng)性對(duì)照藥地奧心血康組(0.06 g/kg ，簡(jiǎn)稱陽(yáng)對(duì)組)，欣通膠囊高劑量組(0.8 g/kg)，中劑量組(0.4 g/kg)，低劑量組(0.2 g/kg)。受試藥按照3 mL/kg生理鹽水比例溶解，一次性經(jīng)十二指腸給藥。

2.2 造模

健康田園犬按體質(zhì)量經(jīng)前肢靜脈注射戊巴比妥鈉進(jìn)行麻醉，待犬充分麻醉后采取仰臥位方式，同時(shí)綁住四肢及頭部固定于手術(shù)臺(tái)上，之后氣管插管，連接人工呼吸機(jī)[3]。同時(shí)防止手術(shù)過(guò)程中液體流失過(guò)多或方便追加麻醉藥進(jìn)行前肢或后肢靜脈滴注Nacl，分離股動(dòng)脈，遠(yuǎn)心端結(jié)扎，插入帶有三通的軟管(軟管用生理鹽水稀釋的檸檬酸沖洗，以防止導(dǎo)管內(nèi)血液凝聚，但采血前應(yīng)放出少量血液以防止枸櫞酸鈉影響指標(biāo)測(cè)定)，動(dòng)脈夾夾住近心端，用于采血指標(biāo)測(cè)定。分離十二指腸，同時(shí)將十二指腸插入軟橡膠管后荷包式縫合，用于手術(shù)后給予受試藥物。于動(dòng)物左側(cè)第四、五助間心臟搏動(dòng)最明顯的位置施開(kāi)胸術(shù)，充分暴露心臟左側(cè)壁，表面最粗大的橫向的血管即為冠狀動(dòng)脈左前降支，將其分離，并于主干1/3交界處，穿線以備結(jié)扎[4]。此時(shí)經(jīng)股動(dòng)脈取血，作為0 h血樣，心電圖穩(wěn)定20 min后，結(jié)扎冠脈，制備心肌梗死模型。結(jié)扎后30 min經(jīng)十二指腸—次性給予受試藥物。分別于給藥后15、30、60、120、180、360 min分時(shí)采血，用于各指標(biāo)的測(cè)定。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表1 欣通膠囊對(duì)急性心肌梗死犬全血黏度200 S-1的影響

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01

200切變率下各組全血黏度在0 h無(wú)顯著差異(P>0.05)；與空白組比較，模型組全血黏度200 S-1下2 h、4 h、6 h全血黏度均變大(P<0.05 h)；與模型組比較，給藥組2 h、4 h全血黏度有增大的趨勢(shì)，但無(wú)顯著差異(P>0.05)， 6 h欣通膠囊高劑量和陽(yáng)對(duì)藥組能降低全血黏度(P<0.05)。

60S-1下各組全血黏度在0 h均無(wú)差異(P>0.05)；與空白組比較，模型組全血黏度60S-1下2 h、4 h、6 h均升高(P<0.05)；與模型組比較，各給藥組2、4 h全血黏度有降低的趨勢(shì),但無(wú)明顯差異(P>0.05)；6 h各給藥組全血黏度均降低(P<0.05)。

表2 欣通膠囊對(duì)急性心肌梗死犬全血黏度60S-1的影響

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01

全血黏度30 S-1下4 h、6 h,與空白組比較,模型組全血黏度均升高(P<0.05)；與模型組比較，6 h欣通膠囊高劑量組可降低全血黏度(P<0.05)，其他組無(wú)明顯差異(P>0.05)。

表3 欣通膠囊對(duì)急性心肌梗死犬全血黏度30S-1的影響

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01

表4 欣通膠囊對(duì)急性心肌梗死犬全血黏度3S-1的影響

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01

表5 欣通膠囊對(duì)急性心肌梗死犬紅細(xì)胞壓積的影響

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01

與空白比較，模型組2 h、4 h、6 h全血黏度均增大(P<0.05)；與模型組比較，6 h欣通膠囊高、中劑量組可降低全血黏度(P<0.05)，其他組無(wú)明顯差異(P>0.05)。

與空白組比較，模型組在2 h、4 h、6 h紅細(xì)胞壓積產(chǎn)生顯著差異(P<0.05);與模型組比較，4 h陽(yáng)性對(duì)照組紅細(xì)胞壓積升高，產(chǎn)生顯著差異(P<0.05);6 h各給藥組均可降低紅細(xì)胞壓積(P<0.05)。

4 討論

欣通膠囊由黃芪、三七、西洋參、山茱萸、地龍、水蛭、土鱉蟲(chóng)、冰片8味藥組成，其功效為補(bǔ)氣養(yǎng)陰，活血化瘀，熄風(fēng)通絡(luò)，開(kāi)竅醒神[5]。方中黃芪具有補(bǔ)氣固表、益氣補(bǔ)中的功效，黃芪對(duì)心臟的影響是能夠保護(hù)心肌及改善心肌代謝，抑制心肌缺血；西洋參功能以補(bǔ)益為主，可滋陰降火，益氣生津；三七的功能為止血的同時(shí)又能活血，具有抗血小板聚集和抗血栓等作用，對(duì)預(yù)防心肌梗死等疾病具有重要意義；地龍、水蛭、土鱉蟲(chóng)三味藥具有活血化瘀功效；山茱萸具有補(bǔ)益肝腎等功效，同時(shí)可以抗心律失常；冰片具有開(kāi)竅醒腦的功效，并且能夠抗心肌梗死。由此可以看出，方中8味藥重用補(bǔ)氣藥及活血化瘀藥，能夠改善急性心肌梗死引起的血液流變學(xué)的變化，對(duì)心肌起到保護(hù)作用。

全血黏度是反映血液流變學(xué)特征的重要指標(biāo)，同時(shí)也是反映血液黏滯程度的必要因素[6-8]。全血黏度在高切變率下反映的是紅細(xì)胞的變形性，低切變率下則反映紅細(xì)胞的聚集性。紅細(xì)胞壓積(HCT)又稱紅細(xì)胞比容，也是影響全血黏度的重要指標(biāo)，HCT的增高常見(jiàn)于各種原因所致血液濃縮引發(fā)的疾病[9]。本研究的各項(xiàng)觀察指標(biāo)中，心肌梗死模型犬血液流變學(xué)指標(biāo)異常表現(xiàn)在給藥組在手術(shù)末期影響全血黏度的低切變率和紅細(xì)胞壓積，由于低切變率反應(yīng)紅細(xì)胞的聚集性，HCT反應(yīng)血液濃縮情況，與模型組比較，給藥組降低了全血黏度的低切變率，并降低了紅細(xì)胞壓積指數(shù)，結(jié)果顯示欣通膠囊可以降低急性心肌梗死導(dǎo)致模型犬的血細(xì)胞聚集性，為欣通膠囊的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

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2016-11-29

2017-01-09

黑龍江省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2012G0019-00);哈爾濱市科技局攻關(guān)項(xiàng)目(2013AA6BS011)

馮月男(1988-)，女，博士研究生，助理實(shí)驗(yàn)師，主要從事方劑配伍規(guī)律及藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究。

*通訊作者：肖洪彬(1957-)，男，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向：方劑配伍規(guī)律研究。

R285.5

A

1002-2392(2017)02-0037-03