韓偉麗

摘 要：建立氣相色譜法測(cè)定復(fù)方丹參片中冰片的含量及含量均勻度。方法：以萘為內(nèi)標(biāo)物，以聚乙二醇（PEG）-20M為固定液，涂布濃度為10%，柱長(zhǎng)2m，柱溫為120攝氏度，汽化250攝氏度，載氣（N2）流速為50mL·min-1，氫氣45mL·min-1，空氣450mL·min-1。冰片在0.05～3.2mg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。冰片平均回收率分別為99.2%。結(jié)論：本法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，可用于冰片的含量測(cè)定。

關(guān)鍵詞：復(fù)方丹參片；含量；測(cè)定

復(fù)方丹參片具有活血化瘀，理氣止痛的功效。復(fù)方丹參片常用于氣滯血瘀所致的胸痹，癥見胸悶、心前區(qū)刺痛；冠心病心絞痛見上述癥侯者?，F(xiàn)在藥理研究表明復(fù)方丹參片具有可改善心腦血管急性癥狀和心電圖缺血性的改變；擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，增加冠狀動(dòng)脈血流量，減慢心率，改善心肌缺氧之功效；可抑制血小板凝集，抑制血小板的釋放反應(yīng)，降低血粘度，降低血脂。冰片其他名稱為龍腦、龍腦香、腦子、冰片、片腦、冰片腦、梅花腦、天然冰片等。冰片為從龍腦香的樹脂和揮發(fā)油中取得的結(jié)晶，是近乎純粹的右旋龍腦。冰片具有通諸竅，散郁火，去翳明目，消腫止痛的功效?！夺t(yī)林纂要》記載：“冰片主散郁火，能透骨熱，治驚癇、痰迷、喉痹，舌脹、牙痛、耳聾、鼻息、目赤浮翳、痘毒內(nèi)陷、殺蟲、痔瘡、催生，性走而不守，亦能生肌止痛。然散而易竭，是終歸陰寒也?！北哂墟?zhèn)痛、抗炎的作用[1-2]。本文采用氣相色譜法對(duì)復(fù)方丹參片中的冰片進(jìn)行了含量及含量均勻度測(cè)定。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：中亞SPGH-300高純氫氣發(fā)生器（北京桑翌實(shí)驗(yàn)儀器研究所）；GA-2000A低噪音空氣泵（GA-2000A低噪音空氣泵）；中亞 SPGN-2A氮?dú)獍l(fā)生器（北京桑翌實(shí)驗(yàn)儀器研究所）； GC-6890A型氣相色譜儀（北京中科惠分儀器有限公司）；奧豪斯Explorer專業(yè)型分析天平（奧豪斯儀器上海有限公司）；北分三譜DK-6900A型自動(dòng)頂空進(jìn)樣器（北京北分三譜儀器有限責(zé)任公司）；RE-52A實(shí)驗(yàn)室旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海比朗儀器有限公司）；XSYF-D實(shí)驗(yàn)室廢水處理設(shè)備（北京湘順源科技有限公司）；WH-8SN旋片式真空泵（北京桑翌實(shí)驗(yàn)儀器研究所）；BL10-250C雙頻加熱型超聲波清洗器（天津市恒奧科技發(fā)展有限公司）；中亞 WYB-Ⅱ靜音無油空氣發(fā)生器（北京桑翌實(shí)驗(yàn)儀器研究所）。

1.2 色譜柱：聚乙二醇（PEG）-20M為固定液，涂布濃度為10%，柱長(zhǎng)2m。

1.3 對(duì)照品：冰片對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所）。

1.4 試劑：水為純化水，醋酸乙酯（上海安譜科學(xué)儀器有限公司）。

1.5 試藥：復(fù)方丹參片。

2 測(cè)定方法確定

2.1 色譜條件

依據(jù)查閱文獻(xiàn)及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[3-5]。以萘為內(nèi)標(biāo)物，以聚乙二醇（PEG）-20M為固定液，涂布濃度為10%，柱長(zhǎng)2m，柱溫為120攝氏度，汽化250攝氏度，載氣（N2）流速為50mL·min-1，氫氣45mL·min-1，空氣450mL·min-1。

2.2 對(duì)照品的制備

2.2.1 內(nèi)標(biāo)溶液的配制

取萘，加醋酸乙酯溶解并定容至刻度，搖勻，制成6mg·mL-1的溶液。

2.2.2 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取冰片對(duì)照品40.0mg至于10毫升棕色容量瓶中，加醋酸乙酯震蕩溶解，加醋酸乙酯定容，搖勻。

2.2.3 校正因子的測(cè)定 取冰片對(duì)照品約6mg，精密稱定，置5mL量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1mL，用醋酸乙酯溶解并稀釋至刻度，搖勻，取1μL注入氣相色譜儀，計(jì)算校正因子。

2.3 供試品溶液的制備

精密稱取復(fù)方丹參片，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入醋酸乙酯20ml，密塞，稱定重量，超聲處理（功率300W，頻率50kHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用醋酸乙酯補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液6ml，加2毫升內(nèi)標(biāo)溶液，加醋酸乙酯定容，搖勻，即得。

2.4 專屬性試驗(yàn)

依照處方取丹參 、三七，按樣品制備工藝制成陰性對(duì)照樣品，按供試品溶液的制備方法制成陰性液，依上述方法測(cè)定，結(jié)果在冰片出峰處陰性液無色譜峰，表明本方法專屬性良好。

2.5 對(duì)照品的線性考察

按對(duì)照品溶液的制備方法分別配制0.1mg·mL-1、0.2mg·mL-1、0.4mg·mL-1、0.8mg·mL-1、1.6mg·mL-1、3.2mg·mL-1、6.4mg·mL-1的對(duì)照品溶液。分別精密吸取2毫升，各精密加入內(nèi)標(biāo)溶液2毫升。取上述溶液，分別精密上述溶液吸取1μL，注人氣相色譜儀，依照2.1項(xiàng)下的色譜條件測(cè)定，記錄色譜峰。以冰片與內(nèi)標(biāo)峰面積比值（Y）為縱坐標(biāo)，濃度（X）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程。冰片的總峰面積（龍腦峰與異龍腦峰面積之和）與內(nèi)標(biāo)物萘峰面積之比（Y）與相應(yīng)濃度之比（X）的線性回歸方程，結(jié)果表明，冰片在0.05～3.2mg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.6 重現(xiàn)性試驗(yàn)

稱取同一批的冰片樣品6份，按測(cè)定方法項(xiàng)下的方法制備供試品溶液，測(cè)定含量，并計(jì)算樣品的RSD值，結(jié)果RSD為0.95%，結(jié)果表明此方法的重現(xiàn)性良好。

2.7 準(zhǔn)確度試驗(yàn)

取對(duì)照品適量，加入到樣品中，加入量分別相當(dāng)于樣品含量的80%、100%、120%。取模擬片照“含量測(cè)定”項(xiàng)下方法試驗(yàn)，計(jì)算回收率為99.2%，RSD為0.86%。

2.8 樣品穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一批冰片樣品，按2.3項(xiàng)下的供試品制備方法制備供試品，將供試品置棕色容量瓶室溫下放置，分別于0、1、2、4h進(jìn)樣4次，計(jì)算冰片的總峰面積（龍腦峰與異龍腦峰面積之和）與內(nèi)標(biāo)峰面積之比的RSD為0.83%（n=4）。結(jié)果表明溶液在4h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.9 樣品均勻度測(cè)定

依照上述含量測(cè)定方法，取10個(gè)樣品來進(jìn)行含量均勻度測(cè)試，結(jié)果表明樣品含量均勻度符合要求。

3 討論

本實(shí)驗(yàn)表明此方法分離效果好、方法簡(jiǎn)便、快捷、準(zhǔn)確，、專屬性好，可用于復(fù)方丹參片中冰片的含量測(cè)定。樣品含量均勻度符合要求。

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