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        高效液相色譜法測定腎舒康膠囊淫羊藿苷含量

        2016-12-27 16:45:09徐殿鵬
        科學與財富 2016年29期
        關(guān)鍵詞:測定含量

        徐殿鵬

        摘 要:本文采用高效液相法對腎舒康膠囊中的淫羊藿苷的進行了含量測定。采用奧泰公司C18色譜柱(220mm×4.6mm,5μm),乙腈-甲醇-水(25∶10:65)為流動相,檢測波長為270nm,流速為1.0ml/min,柱溫為30℃。淫羊藿苷在50~300μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。淫羊藿苷平均回收率分別為99.6%。結(jié)論:本法簡便、準確,可用于腎舒康膠囊中淫羊藿苷的含量測定。

        關(guān)鍵詞:腎舒康膠囊;含量;測定

        腎舒康膠囊由淫羊藿、地黃、川牛膝、王不留行等組成,主要用于腎脾兩虛。淫羊藿別名剛前(《本經(jīng)》)、仙靈脾(《雷公炮炙論》)、仙靈毗(《柳柳州集》)干雞筋、(《日華子本草》)、三枝九葉草(《本草圖經(jīng)》)、鐵打杵(《貴州民間方藥集》)、鐵菱角(《湖南藥物志》)等。淫羊藿具有補腎陽、強筋骨、祛風濕的功效。淫羊藿用于陽痿遺精、筋骨痿軟、風濕痹痛、更年期高血壓等?!度杖A子本草》記載:“治一切冷風勞氣,補腰膝,強心力,丈夫絕陽不起,女子絕陰無子,筋骨攣急,四肢不任,老人昏耄,中年健忘?!币蜣胶邢灤迹–eryl alcohol)、卅一烷(Hentriacontane)、植物甾醇(Phytosterol)、棕櫚酸(Palmitic acid)、亞油酸(Linoleic acid)、亞麻酸(Linolenic acid)、銀杏醇(Bilobanol)、木蘭堿(Magnoflorin)、β-去水淫羊藿素(β-anhy-Droicaritin)、維生素 E、淫羊藿次甙(Icariside)、去氧甲基淫羊藿甙(des-O-Methylicariin)、淫羊藿糖甙A等。淫羊藿在對骨系統(tǒng)、免疫調(diào)節(jié)和延緩衰老、生殖系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)等方面有廣泛的生理活性[1-5]。本文采用高效液相法對腎舒康膠囊中的淫羊藿苷的進行了含量測定。

        1 儀器與試藥

        1.1 儀器:LC2000液相色譜(天美(中國)科學儀器有限公司);FA124電子分析天平(上海舜宇恒平科學儀器有限公司) ;PURELAB flex純水機(威立雅水處理技術(shù)(上海)有限公司);KQ250DE超聲波清洗器超聲波檢測儀器(煙臺鑫康商貿(mào)有限公司);全自動逆流酸清洗Autoclean 100(長春星銳智能化科技有限公司)。

        1.2 色譜柱:奧泰公司 C18 色譜柱(220 mm×4.6mm,5μm)。

        1.3 對照品:淫羊藿苷

        1.4 試劑:甲醇(廣州市江順化工科技有限公司)、三乙胺(廣州市江順化工科技有限公司)、磷酸(廣州市卡朋斯化工科技有限公司)、乙腈(廣州市江順化工科技有限公司)、磷酸二氫鉀(格里斯(天津)醫(yī)藥化學技術(shù)有限公司)、冰醋酸(格里斯(天津)醫(yī)藥化學技術(shù)有限公司)。

        1.5 試藥:腎舒康膠囊

        2 測定方法確定

        2.1 色譜條件

        依據(jù)查閱文獻及考查的結(jié)果,確定色譜條件如下。流動相:乙腈-甲醇-水(25∶10:65)為流動相,檢測波長:270nm,流速:1.0ml·min-1。柱溫:30℃。理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計算應不得低于2000。

        2.2 對照品溶液的制備

        精密稱取淫羊藿苷對照品適量,置容量瓶中,加流動相制成每1mL含100μg的溶液,即得。

        2.3 供試品溶液的制備

        取供試品內(nèi)容物,研細,精密稱取,置具塞錐形瓶中,精密加入流動相10mL,密塞,精密稱定重量,超聲處理10分鐘,放冷,精密稱定,用流動相補足重量,搖勻,濾過。取續(xù)濾液,即得。

        2.4 專屬性試驗

        依照處方取除淫羊藿,按樣品制備工藝制成陰性對照樣品,照2.3項下供試品溶液的制備方法制成陰性液,依上述方法測定,結(jié)果在淫羊藿苷出峰處陰性液無色譜峰,結(jié)果陰性試驗沒有干擾,表明本方法專屬性良好。

        2.5 精密度試驗

        精密稱取淫羊藿苷對照品適量,加流動相使溶解,制成濃度為100μg·mL-1的供試品溶液。照上述色譜條件,精密吸取10μl,連續(xù)進樣6次,記錄峰面積。結(jié)果,RSD=0.86%,表明本方法精密度良好。

        2.6 對照品的線性考察

        精密稱取適量淫羊藿苷對照品,加入流動相溶液使溶解分別配制成每毫升含50、100、150、200、250、300微克的溶液。分別精密上述溶液吸取10μL,注人液相色譜儀,依照2.1項下的色譜條件測定,記錄色譜峰。以峰面積(Y)為縱坐標,對照品進樣量(X)為橫坐標,繪制標準曲線,計算回歸方程。結(jié)果表明,淫羊藿苷在50~300μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

        2.7 重現(xiàn)性試驗

        稱取同一批的腎舒康膠囊樣品6份,按測定方法項下的方法制備供試品溶液,測定含量,并計算樣品的RSD值,結(jié)果RSD為0.73%,結(jié)果表明此方法的重現(xiàn)性良好。

        2.8 準確度試驗

        取對照品適量, 按處方比例及工藝規(guī)程制備模擬粒各20粒,含量分別相當于標示量的80%、100%、120%。取模擬片照“含量測定”項下方法試驗,計算回收率為99.6%,RSD為0.71%。

        2.9 樣品穩(wěn)定性試驗

        取同一批腎舒康膠囊樣品,按2.3項下的供試品制備方法制備供試品,將供試品置室溫下放置,分別于第0、1、2、3、4、5、6小時,精密吸取供試品溶液10?滋l 注入液相色譜儀中,記錄色譜圖。測定腎舒康膠囊中淫羊藿苷的RSD=0.53%。結(jié)果表明供試品6小時內(nèi)穩(wěn)定。

        2.10 樣品含量測定

        依照上述含量測定方法,測定腎舒康膠囊三批樣品中淫羊藿苷的含量,結(jié)果三批樣品的含量分別為1.81毫克/粒、1.86毫克/粒、1.83毫克/粒。

        3 討論

        分別考察甲醇-水-三乙胺(70∶30:0.2),乙腈-甲醇-0.2mol.L-1磷酸二氫鉀-冰醋酸(20∶5:75:0.1),水-甲醇-乙腈(50:20:30),乙腈-甲醇-0.2mol.L-1磷酸二氫鉀-冰醋酸(20∶10:69:1),乙腈-甲醇-水(25∶10:65)不同比例的流動相,結(jié)果以乙腈-甲醇-水(25∶10:65)為流動相為流動相,供試品各峰分離效果最好,故選用乙腈-甲醇-水(25∶10:65)為流動相為流動相。

        參考文獻

        [1]包宇,楊建雄,孫潤廣.淫羊藿苷可緩解腎陽虛小鼠睪酮及性腺雄激素受體基因的表達下調(diào)(英文)[J].中國生物化學與分子生物學報,2011(02).

        [2]吳瑕,楊薇,張磊,王嵐,李東曉,鄧文龍.下丘腦-垂體-性腺軸阻斷對淫羊藿促性激素作用的影響[J].中國實驗方劑學雜志,2011(05).

        [3]蔡輝,趙凌杰,袁愛紅,董曉蕾,趙智明.淫羊藿總黃酮對高脂血癥大鼠SOD活性的影響[J].廣東醫(yī)學,2011(04).

        [4]韓愛萍,張潔,丁選勝.淫羊藿總黃酮對糖尿病小鼠血管功能的影響[J].南京中醫(yī)藥大學學報,2011(03).

        [5]杜道兵,盧萬根,曹叢仁,洪樂鵬,葉秉坤,許孟杰,郝彥利,冷水龍.淫羊藿苷促進宮頸癌TC-1細胞凋亡作用的研究[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學進展,2011(04).

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