王本軍，韓瑋瑋，解廣東，白克運

(1山東中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院，濟南250014；2山東中醫(yī)藥大學)

結直腸癌患者手術前后血清TGF-β1下降水平與預后的關系

王本軍1，韓瑋瑋1，解廣東2，白克運1

(1山東中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院，濟南250014；2山東中醫(yī)藥大學)

目的分析結直腸癌手術前后血清轉化生長因子β1(TGF-β1)下降水平與預后的關系。方法選擇TNM 分期為Ⅱ～Ⅲ期的結直腸癌患者114例，術前未行新輔助化療或放療，均行結直腸癌根治切除術，術后采用FOLFOX4方案化療12個周期；分別于術前及術后第1周取空腹靜脈血，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清TGF-β1；術后均至少隨訪3年，觀察復發(fā)轉移情況， 統(tǒng)計無瘤生存期。結果結直腸癌患者術后較術前血清TGF-β1水平降低(P<0.05)，血清TGF-β1下降率為37%±17%、中位數(shù)為39%。114例患者中，術后復發(fā)轉移38例，無瘤生存期(29.17±10.81)個月，無瘤生存率為66.7%(76/114)。其中，血清TGF-β1下降率≥39%者中發(fā)生復發(fā)轉移者少于下降率<39%者(P<0.05)。Pearson相關分析顯示，血清TGF-β1下降水平與結直腸癌復發(fā)或轉移患者3年無瘤生存期呈正相關(r=0.414，P=0.01)。血清TGF-β1下降率≥39%者無瘤生存率為78.9%(45/57)，高于<39%者的54.4%(31/57)，P<0.05。結論結直腸癌患者術后第1周血清TGF-β1水平較術前顯著降低，其下降程度較大者預后較好，可為結直腸癌患者預后判斷提供參考。

結直腸癌；轉化生長因子 1；疾病預后；無瘤生存期

轉化生長因子 1(TGF-β1)是一種多功能的多肽類生長因子，對結直腸癌的發(fā)生及發(fā)展具有雙向作用。在正常組織及癌變早期，TGF-β1誘導上皮細胞凋亡而發(fā)揮抑制癌變的作用；隨著腫瘤的進展，腫瘤細胞對TGF-β1誘導的抑制信號失去敏感性，TGF-β1逐漸發(fā)揮抑制免疫應答，促進腫瘤血管及腫瘤基質形成、侵襲、轉移等多種生物活性[1]。TGF-β1在評價結直腸癌患者術后預后方面具有一定的敏感性和特異性[2]，但目前研究主要集中在測定TGF-β1濃度高低來判斷預后，而動態(tài)監(jiān)測其下降水平評估結直腸癌手術患者預后的報道較少。因此，本研究觀察了結直腸癌患者術前及術后1周時血清TGF-β1下降水平與預后的關系?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集2012年8月～2014年5月在山東省中醫(yī)院肛腸科行結直腸癌根治切除術治療，且術后按AJCC7.0標準 TNM 分期為Ⅱ～Ⅲ期，術前未行新輔助化療或放療且隨訪資料完整者114例?；颊咧心?0例,女34例；年齡32～73歲，平均51.7歲； TNM分期Ⅱ期52例，Ⅲ期62例。

1.2 治療方法 患者均由本院同一組醫(yī)生行結直腸癌根治切除術，手術過程順利，術后均行常規(guī)抗感染治療及營養(yǎng)支持；術后第14天開始行常規(guī)化療，均采用FOLFOX4方案，14 d為1個周期，共化療12個周期。

1.3 血清TGF-β1檢測方法 分別于術前及術后第1周抽取清晨空腹外周靜脈血2～5 mL，采用EDTA-Na2抗凝，3 000 r/min離心5 min，取血清-80 ℃冰箱保存待測。采用 ELISA法檢測血清TGF-β1，試劑盒由上海博蘊生物科技有限公司提供，操作嚴格按試劑盒說明進行。血清TGF-β1下降率=(術前TGF-β1-術后第1周TGF-β1)/術前TGF-β1×100%。

1.4 預后觀察方法 術后均至少隨訪3年或出現(xiàn)復發(fā)或轉移時截止，隨訪方式包括電話、門診及返院復診。如臨床懷疑腫瘤復發(fā)，復查血清 CEA、CA19-9水平升高，行電子結腸鏡檢查、胸腹盆腔CT掃描，必要時可行PET-CT檢查來判定結直腸癌復發(fā)。無瘤生存期定義為手術日至腫瘤復發(fā)、轉移或者任何原因引起死亡的時間。

2 結果

2.1 血清TGF-β1檢測結果 本組患者手術前后血清TGF-β1水平分為(1.34±0.16)、(0.85±0.27)ng/mL，術后較術前血清TGF-β1水平降低(P<0.05)，血清TGF-β1下降率為37%±17% 、中位數(shù)為39%。

2.2 預后隨訪結果 患者均獲得有效隨訪，無失訪病例。114例患者中，術后復發(fā)轉移38例，無瘤生存期(29.17±10.81)個月，無瘤生存率為66.7%(76/114)。其中，血清TGF-β1下降率≥39%的57例患者中復發(fā)轉移12例，<39%的57例患者中復發(fā)轉移26例，兩者復發(fā)轉移情況比較P<0.05。

2.3 血清TGF-β1下降水平與結直腸癌患者預后的關系 Pearson相關分析顯示，血清TGF-β1下降水平與結直腸癌復發(fā)或轉移患者患者3年無瘤生存期呈正相關(r=0.414，P=0.01)。血清TGF-β1下降率≥39%者無瘤生存率為78.9%(45/57)，高于<39%者的54.4%(31/57)，P<0.05。

3 討論

據(jù)統(tǒng)計，我國結直腸癌發(fā)病率居惡性腫瘤第3位、病死率居第5位，每年新發(fā)已超過 17 萬例、死亡近10萬例[4]。并且，隨著社會的發(fā)展，結直腸癌的發(fā)病率仍呈明顯上升趨勢[5]；手術切除、放療、化療是治療結直腸癌的主要手段，但其復發(fā)轉移而導致的死亡仍居高不下。如何判斷患者的預后，提高患者生理功能和生活質量，提高5年生存率，成為外科治療的最終目標[6]。

TGF-β1是一種具有潛力的靶向調控多效分子，由112個氨基酸構成，是TGF中含量最高、表達最豐富的亞型，也是目前已知的與腫瘤關系非常密切且具有代表性的細胞因子，廣泛參與細胞的分化、增殖、形態(tài)改變、黏附、轉移、細胞外基質產(chǎn)生及凋亡等[7]。在結直腸癌的發(fā)生、發(fā)展中，TGF-β1表現(xiàn)出多種生物學效應。在癌癥發(fā)生的早期，TGF-β1轉錄后可抑制癌基因C-myc 的表達，使細胞分裂間期停滯于DNA合成前期，從而發(fā)揮生長抑制、促進凋亡、保持基因穩(wěn)定等抑制癌細胞因子的作用；隨著病情的發(fā)展，癌細胞對TGF-β1抑制作用失去敏感性，TGF-β1的異常表達大量增加，通過與血管內皮生長因子的協(xié)同作用，促進腫瘤血管生成，進而加速癌細胞的浸潤、轉移，并發(fā)揮免疫抑制的作用。這種雙向作用亦可見于肺癌、乳腺癌、前列腺癌等惡性腫瘤[8～11]。

在結直腸癌術后，因高度表達TGF-β1蛋白的腫瘤組織被切除，患者血清TGF-β1水平均有不同程度下降。臨床研究[12]證實，患者術后體內TGF-β1水平與其預后密切相關。例如，黃永紅等[13]觀察50例結直腸癌患者和25例健康體檢者外周血TGF-β1水平，發(fā)現(xiàn)結直腸癌患者術前外周血TGF-β1水平明顯高于術后以及健康對照者，差異有統(tǒng)計學意義；并且，外周血TGF-β1水平與腫瘤大小呈正相關，并隨腫瘤分期的進展而升高。故其認為TGF-β1表達與腫瘤的惡性程度相關，可用于評價結直腸癌患者的預后，又可為基于抗TGF-β1的靶向免疫治療提供臨床依據(jù)，這與本研究的結果類似。王夢潔等[14]觀察了結直腸癌術后發(fā)生轉移者44例、未發(fā)生轉移者59例，術后轉移者血清TGF-β1水平明顯高于未轉移者，差異具有統(tǒng)計學意義；其認為TGF-β1與結直腸癌的發(fā)生、發(fā)展具有顯著的相關性，且在腫瘤的轉移中可能起到關鍵作用。此外，國外相關研究報道，切除的腫瘤組織中TGF-β1的表達水平可作為獨立因子預測結直腸癌的復發(fā)；通過長期的隨訪發(fā)現(xiàn)，只有中高水平表達TGF-β1的結直腸癌患者出現(xiàn)了腫瘤的復發(fā)，所有低水平表達者獲得了長期無瘤生存[9]。亦有相關文獻[15]報道，結直腸癌根治性手術切除的患者，術后切除的腫瘤組織中TGF-β1高水平可用于預測肝轉移。因此，TGF-β1可以作為結直腸癌術后監(jiān)測預后的一個重要參考指標。

本研究引入TGF-β1下降率的概念，可以降低個體差異對血清TGF-β1值的影響，并以114例結直腸癌術后患者的TGF-β1下降率的中位數(shù)為界進行分析。結果顯示，所有患者行結腸癌或直腸癌根治術后血清TGF-β1水平皆有不同程度地下降，術后高下降率者復發(fā)或轉移率明顯低于低下降率者，差異具有統(tǒng)計學意義。復發(fā)或轉移患者血清TGF-β1下降率與無瘤生存時間呈顯著正相關，血清TGF-β1下降率越高，3年內無瘤生存期越長；從Kaplan-Meier生存曲線也顯示，TGF-β1高下降率者的3年無瘤生存率顯著高于低下降率者。分析其產(chǎn)生機制可能是:①結直腸癌患者術后TGF-β1水平高，對機體免疫系統(tǒng)抑制作用強，則癌細胞易逃脫機體的免疫監(jiān)視而擴散轉移，促進了腫瘤的發(fā)生與發(fā)展，反之則抑制了腫瘤的發(fā)生與發(fā)展。②高水平的TGF-β1導致機體內血管內皮生長因子表達過度，促使瘤體的血管生長加速，血供增加；并且，其促進了細胞外基質的合成，減少其降解，從而改善了癌細胞生長、轉錄的局部環(huán)境，增強了其侵襲能力，引起腫瘤的快速生長。因此，TGF-β1下降水平對結直腸癌術后患者的臨床治療、預后判斷有重要參考價值；下降水平較高者復發(fā)轉移率低，無瘤生存期長，患者預后越好。但是，本研究樣本量相對較少，并且未對結直腸癌患者其他指標的相關性深入研究；今后可繼續(xù)增加相關指標，進行大樣本量的多中心臨床研究。

總之，監(jiān)測手術治療前后結直腸癌患者血清TGF-β1下降水平對了解病情、觀察手術療效和判斷預后均具有實踐指導意義，并可為個體化靶向治療提供可信的依據(jù)，患者術后應用化療、放療可以TGF-β1為特異性靶點，聯(lián)合新型靶向藥物阻斷其生物學功能，從分子水平逆轉腫瘤的侵襲，從而達到治療的目的。

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10.3969/j.issn.1002-266X.2017.34.016

R735.3

B

1002-266X(2017)34-0050-03

2017-03-12)

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