朱曉明

（葫蘆島市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，遼寧葫蘆島 125000）

淺談如何獲取高質(zhì)量畜禽血清樣品

朱曉明

（葫蘆島市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，遼寧葫蘆島 125000）

免疫抗體檢測(cè)是評(píng)估免疫效果的重要手段，通過(guò)免疫抗體檢測(cè)，指導(dǎo)免疫工作，確保易感動(dòng)物免疫抗體始終處于高水平，降低疫情發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。免疫抗體檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性直接影響到免疫指導(dǎo)，而影響檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性的因素有很多，例如試劑、人員操作、設(shè)備、環(huán)境、檢測(cè)方法和樣品等。樣品是開(kāi)展檢測(cè)工作的前提，樣品的好壞會(huì)直接影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。隨著病毒的變異，免疫的疫苗也不斷的進(jìn)行更換和增加，免疫抗體檢測(cè)的項(xiàng)目也有所增加，同時(shí)檢測(cè)的樣品需要留樣，因此樣品不僅要有質(zhì)還要有量。筆者根據(jù)自身工作，簡(jiǎn)單介紹下如何獲取合格的畜禽血清檢測(cè)樣品。

免疫抗體；檢測(cè)；樣品

1 個(gè)人防護(hù)

采集樣品、制備血清時(shí)要做好個(gè)人防護(hù)，防護(hù)用品包括防護(hù)服、口罩、手套、鞋套、護(hù)目鏡等，并做到一戶(hù)一換，避免人為傳播疫病。在做好生物安全防護(hù)的同時(shí)要注意自身安全，尤其是對(duì)大動(dòng)物采血時(shí)更要注意。

2 采血部位及方法

（1）牛常用采血部位為頸靜脈和尾靜脈。使用牛鼻鉗子站立保定，10ml注射器采集5ml全血。建議采集尾靜脈，相對(duì)安全，采集速度也不慢。如果在頸靜脈采集，可以安排人遮擋牛的眼睛，減少牛的躲避反抗，便于采血。

（2）羊常用采血部位為頸靜脈。保定人員可根據(jù)羊的大小，騎在羊身上進(jìn)行站立保定，大羊可以?xún)扇吮６?，一人保定住頭部，另一人控制羊后腿，5ml注射器采集3ml全血。

（3）豬常用采血部位為前腔靜脈和耳緣靜脈。前腔靜脈采血不同日齡的豬都適用，15kg以下可以仰臥保定，體重大的豬可以用豬套子進(jìn)行站立保定，根據(jù)豬的大小選擇注射器針頭的長(zhǎng)短和粗細(xì)。耳緣靜脈采血適用于耳緣靜脈明顯且較粗的豬，多為經(jīng)產(chǎn)母豬，使用5ml負(fù)壓管采集3ml全血。

（4）雞常用采血部位為翼下靜脈和心臟。翼下靜脈采血根據(jù)雞的大小適用2ml或5ml注射器進(jìn)行采集1ml或2ml全血，翼下靜脈不能采集的選擇心臟采血。

3 血清的分離

使用注射器采集的全血，采集后將注射器拉至最大刻度，針頭向上傾斜放置，防止血液凝固堵塞注射器，保證血液與空氣接觸面積，負(fù)壓管平放即可。氣溫越高，血液凝集的越快，但不能在陽(yáng)光下暴曬，冬天注意保溫，待血液凝固后再放入保存箱，帶回實(shí)驗(yàn)室處理。

根據(jù)實(shí)際情況，選擇室溫過(guò)夜或者37℃2～3h，當(dāng)血清自然析出后，將血清轉(zhuǎn)移至2ml離心管中，如血清中有血凝塊，可用離心機(jī)8000轉(zhuǎn)/min，離心3min，進(jìn)一步分離血清。按照上述方法，豬、牛、羊血清可獲得1.5ml以上，雞血清可獲得1毫升左右。血清分離后，分裝，留樣的血清-20℃保存，有條件的可以-80℃保存，檢測(cè)用的血清，如果1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)可4℃保存，-20℃保存的血清抗體效價(jià)6個(gè)月內(nèi)變化不大，應(yīng)避免反復(fù)凍融。

4 注意事項(xiàng)

（1）采集全血時(shí)要注意無(wú)菌操作，用酒精對(duì)采血部位進(jìn)行消毒，待血液凝固后盡快送至實(shí)驗(yàn)室處理，防止樣品污染腐敗。

（2）采血時(shí)要注意控制血流的速度，同時(shí)避免血液中混入酒精等導(dǎo)致溶血。

（3）采集后的樣品在運(yùn)輸過(guò)程中應(yīng)避免劇烈震動(dòng)導(dǎo)致溶血。

（4）使用離心機(jī)分離血清時(shí)，要控制好轉(zhuǎn)速和時(shí)間，否則易導(dǎo)致溶血。

[1] 徐鐵.畜禽血樣的采集和血清的分離[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2013，（14）：94.

[2] 唐修亮，李文平，唐開(kāi).畜禽采血與血清制備的幾點(diǎn)體會(huì)[J].畜禽業(yè)，2016，（2）：85-86.