安文靜 馮喜英 關(guān) 巍 華 毛 久 太 杜發(fā)茂 崔金霞 拉周措毛 李玉紅 劉洪千 馬維秀 時(shí)瑩慶張 娜

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院呼吸科，青海 西寧 810001)

老年慢性支氣管哮喘患者血清白細(xì)胞介素-12、-18和-35的表達(dá)

安文靜 馮喜英 關(guān) 巍 華 毛 久 太 杜發(fā)茂 崔金霞 拉周措毛 李玉紅 劉洪千 馬維秀 時(shí)瑩慶張 娜1

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院呼吸科，青海 西寧 810001)

目的 檢測(cè)老年慢性支氣管哮喘患者血清中白細(xì)胞介素(IL)-12、-18和-35的水平，探討其臨床意義。方法 確診為支氣管哮喘的老年患者62例作為觀察組，21例健康成人血清標(biāo)本作為對(duì)照組，檢測(cè)兩組血清中IL-12、IL-18和IL-35的表達(dá)水平。結(jié)果 兩組血清中IL-12、IL-18和IL-35的表達(dá)差異顯著，觀察組中IL-12、IL-18和IL-35的表達(dá)與病變的不同階段相關(guān)，觀察組中IL-12和IL-18具有正相關(guān)性，而其他指標(biāo)間未見明顯相關(guān)性。結(jié)論 老年慢性支氣管哮喘患者血清中IL-12、IL-18高表達(dá)、IL-35低表達(dá)與病變的形成和發(fā)展階段有關(guān)。

慢性支氣管哮喘；白細(xì)胞介素-12；白細(xì)胞介素-18；白細(xì)胞介素-35

支氣管哮喘是以嗜酸性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞反應(yīng)為主形成的氣道慢性炎癥〔1，2〕。白細(xì)胞介素(ILs)家族是細(xì)胞產(chǎn)生的一類細(xì)胞因子，種類較多，其中IL-12、-18被認(rèn)為是由激活的炎性細(xì)胞產(chǎn)生，具有調(diào)節(jié)細(xì)胞增生、分化的作用〔3，4〕。IL-35是IL-12家族的成員，是由IL-12α鏈P35和IL-27β鏈EBI 3通過共價(jià)結(jié)合的異源二聚體，近年研究顯示IL-35具有一定的抑制炎癥發(fā)展的作用〔5，6〕。本文觀察慢性支氣管哮喘患者血清中IL-12、IL-18和IL-35的表達(dá)水平，探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2013年1月至2015年12月我院支氣管哮喘老年患者62例作為觀察組。其中男32例，女30例；年齡60～83歲，平均69.9歲；病程5～28年，平均16.3年。診斷符合2008年中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)會(huì)哮喘學(xué)組支氣管哮喘防治指南的診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①治療依從性差；②4 w內(nèi)使用過類固醇類藥物、白三烯調(diào)節(jié)劑等拮抗劑的患者，③近1個(gè)月有上呼吸道感染；④伴有惡性腫瘤的患者。未控制患者26例，部分控制26例，已控制10例。21例健康成人血清標(biāo)本21例作為對(duì)照組，其中男11例，女10例；年齡35～65歲，平均46.9歲。

1.2 IL-12、IL-18和IL-35的檢測(cè) 兩組均常規(guī)抽取清晨空腹靜脈血3 ml，2 000 r/min離心后，分離血清于-20℃冰箱中凍存。IL-12、IL-18和IL-35的檢測(cè)應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法，樣本均于1個(gè)月內(nèi)集中檢測(cè)，均由主管技師完成，做好質(zhì)控工作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)或方差分析，線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1 兩組血清中IL-12、IL-18和IL-35表達(dá)的比較 兩組血清中IL-12、IL-18和IL-35表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見表1。

表1 兩組血清中IL-12、IL-18和IL-35表達(dá)的比較

組別nIL-12IL-18IL-35觀察組6236.60±12.79414.54±78.91234.61±78.59對(duì)照組2112.64±3.91269.55±93.01301.61±60.46t/P值8.27/0.00710.08/<0.0018.75/0.002

2.2 觀察組不同病變階段患者血清中IL-12、IL-18和IL-35表達(dá)的比較 觀察組不同病變階段患者血清中IL-12、IL-18和IL-35的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

2.3 觀察組IL-12、IL-18和IL-35表達(dá)水平的相關(guān)性 IL-12和IL-18呈正相關(guān)(r=0.48，P=0.047)，而其他指標(biāo)間未見明顯相關(guān)性(P>0.05)。

表2 不同病變階段患者血清中IL-12、IL-18和 IL-35表達(dá)的比較

3 討 論

哮喘是一種氣道非特異性炎癥性疾病，流行病學(xué)顯示哮喘病人有家族史者甚多，現(xiàn)已篩查出多個(gè)與哮喘有關(guān)的候選基因，確定了其染色體定位區(qū)域〔7〕。還有觀點(diǎn)認(rèn)為哮喘的病因?qū)W研究多集中在過敏、感染和基因易感性三方面哮喘的發(fā)病機(jī)制中〔8〕。哮喘患者病變形成中會(huì)出現(xiàn)Th1、Th2淋巴細(xì)胞免疫的失衡，患者體內(nèi)Th1型細(xì)胞應(yīng)答水平較正常人顯著降低，Th2型細(xì)胞免疫應(yīng)答反應(yīng)顯著增高〔9〕。IL-12是重要的前炎性介質(zhì)，經(jīng)抗原刺激后的單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞可以分泌IL-12，對(duì)自然殺傷細(xì)胞有顯著的刺激作用〔10〕，并能促使Th0細(xì)胞向Th1細(xì)胞分化，進(jìn)而調(diào)節(jié)免疫功能和炎性反應(yīng)〔11，12〕。IL-18是一種炎性相關(guān)因子，其生物學(xué)功能有多樣性，如對(duì)機(jī)體的細(xì)胞免疫、炎癥反應(yīng)、造血的調(diào)控等，IL-18還與T細(xì)胞、B細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和骨髓基質(zhì)細(xì)胞等的功能有關(guān)〔13，14〕。IL-35主要由Treg分泌，在正常機(jī)體中的表達(dá)穩(wěn)定，主要發(fā)揮抑制炎性反應(yīng)及免疫因子活性的負(fù)向調(diào)節(jié)作用〔15〕。有研究認(rèn)為，IL-35可以抑制炎癥反應(yīng)，并防止過度的自身免疫反應(yīng)的發(fā)生〔16〕。

本研究提示IL-12、IL-18和IL-35三者異常表達(dá)可以參與病變的發(fā)展過程，由于病變的程度與治療有關(guān)，因此IL-12、IL-18和IL-35異常表達(dá)有可能對(duì)判斷病變程度和病變的發(fā)展階段提供客觀指標(biāo)。IL-12和IL-18二者在哮喘患者中的作用和表達(dá)特征均具有一定的協(xié)同作用。IL-12和IL-18的協(xié)同作用還表現(xiàn)為誘導(dǎo)干擾素的產(chǎn)生，此種作用在誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)的同時(shí)，可以降低氣道的高反應(yīng)性，即二者在促進(jìn)炎性級(jí)聯(lián)反應(yīng)時(shí)同時(shí)具有促進(jìn)氣道的變應(yīng)性炎癥的改變，即具有雙向性的調(diào)節(jié)功能〔17〕。IL-35是抗炎因子，對(duì)于免疫系統(tǒng)和免疫反應(yīng)有負(fù)向調(diào)控作用，也可以防止過度的自身免疫反應(yīng)發(fā)生。也有研究顯示經(jīng)抗原遞呈的細(xì)胞(如樹突細(xì)胞)受到明顯的刺激后，Treg細(xì)胞可以分泌大量的IL-35，同時(shí)能有效抑制外周血中CD4+和CD8+的T細(xì)胞，而Treg細(xì)胞主要是通過IL-35來發(fā)揮抑制Th17細(xì)胞的分化和IL-17等細(xì)胞因子的釋放，進(jìn)而發(fā)揮免疫抑制的功能〔18〕。Th17細(xì)胞作為促炎細(xì)胞可以誘導(dǎo)哮喘、自身免疫病的發(fā)生，對(duì)維持免疫內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定有重要作用。當(dāng)IL-35的表達(dá)下調(diào)后，對(duì)Th17細(xì)胞的抑制作用減弱，使哮喘的發(fā)病呈高風(fēng)險(xiǎn)狀態(tài)。

1 Freund V，F(xiàn)rossard N.Nerve growth factor (NGF) in inflammation and asthma〔J〕.Revue Des Maladies Respir，2004；21(2)：161-80.

2 王 燕，韓偉忠，范春輝，等.糖皮質(zhì)激素對(duì)哮喘大鼠氣道NGF和IGF-Ⅰ表達(dá)影響〔J〕.青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2014；50(5)：404-7.

3 劉文東，魯繼榮.哮喘患兒血清IL-12 TGFβ1與IgE水平變化的研究〔J〕.中國(guó)當(dāng)代兒科雜志，2008；10(2)：146-8.

4 Zhang C，Liu DY，Xue YW，etal.The changes of IL-8,IL-10,IL-12 and IgE in serum of patients with asthma〔J〕.J Isotopes，2002；15(4)：238-8.

5 Ma Y，Liu X，Wei Z，etal.The expression of a novel anti-inflammatory cytokine IL-35 and its possible significance in childhood asthma〔J〕.Immunol Lett，2014；162(1)：11-7.

6 Yan L，Pan X，Xiao P，etal.Adenovirus-mediated interleukin-35 gene transfer suppresses allergic airway inflammation in a murine model of asthma〔J〕.Agents Actions，2015；64(10)：767-74.

7 范春輝，程兆忠，韓偉忠，等.NGF對(duì)支氣管哮喘大鼠氣道重塑影響及其機(jī)制〔J〕.齊魯醫(yī)學(xué)雜志，2015；30(2)：173-5.

8 Frossard N，F(xiàn)reund V，Advenier C.Nerve growth factor and its receptors in asthma and inflammation〔J〕.Eur J Pharmacol，2004；500(1-3)：453-65.

9 Wang W，Li P，Chen YF，etal.A potential immunopathogenic role for reduced IL-35 expression in allergic asthma〔J〕.J Asthma，2015；52(8)：1-9.

10 Zhang YL，Luan B，Wang XF，etal.Peripheral blood MDSCs，IL-10 and IL-12 in children with asthma and their importance in asthma development〔J〕.PloS One，2013；8(5)：e63775.

11 Zedan MM，El-Chennawi FA，F(xiàn)ouda AE.Interleukin-12 and peripheral blood invariant natural killer T cells as an axis in childhood asthma pathogenesis〔J〕.Iranian J Allergy Asthma Immunol，2010；9(1)：43-8.

12 Wong CK，Ho CY，Ko FWS，etal.Proinflammatory cytokines (IL-17，IL-6，IL-18 and IL-12) and Th cytokines (IFN-γ，IL-4，IL-10 and IL-13) in patients with allergic asthma〔J〕.Clin Exper Immunol，2001；125(2)：177-83.

13 Xue YN，Zou XD.Correlation of serum IL-16，IL-18 levels and immunoglobulins in children with asthma〔J〕.Chin J Contemp Pediat，2006；8(8)：6-8.

14 Hossny EM，Elsayed SS，Elhadidi ES，etal.Serum interleukin-18 expression in children with bronchial asthma〔J〕.World Allergy Organiz J，2009；2(5)：63-8.

15 Wong CK，Leung TF，Chu IMT，etal.Aberrant expression of regulatory cytokine IL-35 and pattern recognition receptor NOD2 in patients with allergic asthma〔J〕.Inflammation，2015；38(1)：348-60.

16 陳 杰，彭 健，張卓然，等.支氣管哮喘患者血清IL-33、IL-35水平及相關(guān)性分析〔J〕.國(guó)際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào)，2015；21(12)：1644-7.

17 張惠蘭，張珍祥，徐永健.白介素-18與支氣管哮喘〔J〕.國(guó)外醫(yī)學(xué)·呼吸系統(tǒng)分冊(cè)，2000；20(3)：113-5.

18 周月朋，李俊杰，李曉東，等.支氣管哮喘患兒外周血IL-27、IL-35及EBI3的表達(dá)變化及意義〔J〕.解放軍醫(yī)藥雜志，2014；26(7)：71-3.

〔2015-12-11修回〕

(編輯 苑云杰)

馮喜英(1962-)，女，主任醫(yī)師，主要從事呼吸病學(xué)研究。

安文靜(1981-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事呼吸病學(xué)研究。

R562.2

A

1005-9202(2017)05-1184-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.05.068

1 青海省人民醫(yī)院呼吸科