韋高猛 賓曉蕓 黃勇平

(右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院泌尿外科，廣西 百色 533000)

CYP17基因多態(tài)性和環(huán)境暴露因素交互作用與前列腺癌易感性的關(guān)系

韋高猛 賓曉蕓 黃勇平

(右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院泌尿外科，廣西 百色 533000)

目的 探討CYP17基因多態(tài)性和環(huán)境因素暴露交互作用與前列腺易感性的關(guān)系。方法 采用病例對(duì)照設(shè)計(jì)，采集128例病例和128例對(duì)照的血樣，應(yīng)用聚合酶鏈-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RELP)技術(shù)檢測(cè)外周血細(xì)胞色素P450家族17(CYP17)基因型。采用Logistic回歸模型進(jìn)行多因素分析。結(jié)果 與對(duì)照組相比，飲酒30年以上、吸煙30年以上、飲食中豬肉攝入較多、遺精年齡早于16歲、首次性生活年齡早、35歲以前每周性生活次數(shù)多、腫瘤家族史是前列腺癌的危險(xiǎn)因素，而經(jīng)常吃水果、喝綠茶、卷心菜攝入較多是保護(hù)因素?；駽YP17的A2/A2多態(tài)突變型能夠增加前列腺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)(OR=2.63，95%CI值：1.37～3.58)，且有劑量效應(yīng)梯度。CYP17基因多態(tài)性與首次遺精年齡和家族史因素間存在交互作用。結(jié)論 CYP基因多態(tài)性、環(huán)境相關(guān)因素暴露及其交互作用與前列腺癌有相關(guān)性。

CYP17基因多態(tài)性；前列腺腫瘤；環(huán)境因素

細(xì)胞色素P450家族17(CYP17)基因與性激素合成密切相關(guān)，其5′啟動(dòng)子區(qū)的翻譯起始點(diǎn)上游的第34個(gè)堿基處存在著一個(gè)T-C的多態(tài)位點(diǎn)，當(dāng)?shù)任换駻2存在時(shí)可導(dǎo)致性激素水平改變，增加前列腺癌易感性〔1〕。目前國(guó)內(nèi)前列腺癌的病因?qū)W研究較少，特別是CYP17基因多態(tài)性與環(huán)境暴露因素的交互作用鮮有報(bào)道。本文旨在探討CYP17基因多態(tài)性和環(huán)境暴露因素與前列腺癌的關(guān)系。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 選擇2012年3月至2015年4月在我院就診的前列腺癌住院患者128例，均經(jīng)組織病理學(xué)檢查確診。采用以醫(yī)院為基礎(chǔ)的1∶1病例-對(duì)照設(shè)計(jì)，對(duì)照組選擇同期入院且與病理組無(wú)任何血緣關(guān)系的非腫瘤住院男性患者，排除泌尿系統(tǒng)疾病、內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病、嚴(yán)重心臟疾病。兩組平均年齡、文化程度、經(jīng)濟(jì)收入水平分布無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

1.2 資料收集 通過(guò)查閱文獻(xiàn)，咨詢流行病學(xué)專家和臨床專業(yè)人員，制定統(tǒng)一的個(gè)案調(diào)查表。根據(jù)預(yù)調(diào)查結(jié)果修正問(wèn)卷?xiàng)l目，培訓(xùn)統(tǒng)一的調(diào)查員，采用面對(duì)面直接詢問(wèn)的方式進(jìn)行調(diào)查，調(diào)查內(nèi)容包括患者的基本情況、家族史、生育史及飲食習(xí)慣等環(huán)境相關(guān)暴露因素。

1.3 試劑與儀器 基因組DNA提取試劑盒、dNTP、100 bp Marker為華美生物公司產(chǎn)品，Taq DNA聚合酶、限制性內(nèi)切酶MspA1為Promega公司產(chǎn)品，引物合成由北京賽百盛公司完成，梯度PCR儀購(gòu)自美國(guó)BIORAD公司。

1.4 外周血DNA提取 經(jīng)知情同意，抽取所有研究對(duì)象外周靜脈血3 ml，分離白細(xì)胞，采用基因組提取試劑盒獲得DNA樣本，-20℃凍存。

1.5 PCR反應(yīng) 所有DNA樣本混合編號(hào)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。CYP17上游引物：5′-CAT TCG CAC TCT GGA GTC-3′；下游引物：5′-AGG CTC TTG GGG TAC TTG-3′。CYP17的反應(yīng)條件為：94℃預(yù)變性10 min，94℃變性30 s；55 ℃退火30 s，72℃ 延伸；共38個(gè)循環(huán)；72℃延伸5 min。

1.6 酶切反應(yīng)及基因多態(tài)性 CYP17 PCR反應(yīng)產(chǎn)物純化后，采用MspA1內(nèi)切酶消化，2%的瓊脂糖凝膠電泳，鑒定酶切產(chǎn)物。酶切產(chǎn)物呈現(xiàn)3種狀態(tài)，即未切開(kāi)、部分切開(kāi)和完全切開(kāi)，提示存在3種基因型，即A1/A1、A1/A2和A2/A2。

1.7 測(cè)序 隨機(jī)選取3種基因類型PCR產(chǎn)物各2份，進(jìn)行序列測(cè)定，結(jié)果用Omiga2.0軟件與GenBank中CYP17基因序列比較。

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS19.0軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、Logistic回歸分析。

2 結(jié) 果

2.1 飲食行為習(xí)慣暴露與前列腺癌的關(guān)系 飲酒30年以上、吸煙30年以上者前列腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加，而經(jīng)常吃水果，喝綠茶能夠降低前列腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)；飲食中豬肉攝入較多的男性，前列腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加，而卷心菜攝入較多的男性則發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)降低。見(jiàn)表1。

表1 飲食行為習(xí)慣與前列腺癌的單因素分析(n=128)

2.2 生育史暴露與前列腺癌的關(guān)系 首次遺精年齡早于16歲、首次性生活年齡早、35歲以前每周性生活次數(shù)多、有腫瘤家族史是前列腺癌的危險(xiǎn)因素。見(jiàn)表2。

表2 生育史暴露與前列腺癌的單因素分析(n=128)

2.3 CYP17基因多態(tài)性與前列腺癌的關(guān)系 CYP17基因頻率分布符合Hardy-Weinberg平衡(P=0.18)。病例組CYP17的A1/A1 22例，A1/A2 66例，A2 /A2 66例，A2/A2 40例；對(duì)照組A1/A1 23例，A1/A2 70例，A2/A2 25例?；駽YP17的A2/A2多態(tài)突變型能夠增加前列腺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)(OR值=2.63，95%CI：1.37～3.58，P=0.014)，且有劑量效應(yīng)梯度。

2.4 CYP17基因型與環(huán)境暴露相關(guān)因素的交互作用分析 CYP17基因多態(tài)性與首次遺精年齡和家族史因素間存在交互作用，交互作用系數(shù)均>1，為放大作用。見(jiàn)表3。

表3 CYP17基因型與環(huán)境暴露相關(guān)因素的交互作用 分析對(duì)前列腺癌發(fā)病的影響

3 討 論

研究發(fā)現(xiàn)，飲食中脂肪(特別是飽和脂肪酸)的攝入量與前列腺癌發(fā)生的危險(xiǎn)性存在相關(guān)性，高脂肪、高蛋白飲食的男性，其體內(nèi)的睪酮水平明顯高于低脂肪、高纖維飲食者〔2〕，而睪酮水平的高低在前列腺的生長(zhǎng)發(fā)育中及前列腺增生及前列腺癌的發(fā)生中起著決定性的作用。研究發(fā)現(xiàn)〔3〕，脂肪的攝入量與前列腺癌的發(fā)病率呈明顯正相關(guān)，而與碳水化合物、蛋白及食物總熱量無(wú)關(guān)。國(guó)內(nèi)研究發(fā)現(xiàn)〔4〕，豬肉、蛋類、牛奶等富含脂肪類食物是中國(guó)男性居民發(fā)生前列腺癌的重要危險(xiǎn)因素。本研究中豬肉的高攝入量是前列腺癌的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。Jain等〔5〕研究發(fā)現(xiàn)，綠色食物是前列腺癌的保護(hù)因素，并且存在一定的劑量-反應(yīng)關(guān)系。本次調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)，水果和卷心菜是前列腺癌的重要保護(hù)因素，與仇成軒等〔4〕研究結(jié)果相似。

流行病學(xué)調(diào)查顯示前列腺癌具有遺傳易感性。梁彩花等〔6〕對(duì)廣東地區(qū)前列腺癌與家族史和婚育史的病因?qū)W關(guān)聯(lián)研究顯示，有一個(gè)一級(jí)親屬患惡性腫瘤患前列腺癌的危險(xiǎn)是無(wú)惡性腫瘤家族的2.25倍。本研究結(jié)果也顯示，有惡性腫瘤家族史的患者前列腺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)增加2.34倍。首次遺精是男性進(jìn)入青春期的標(biāo)志，本研究結(jié)果顯示首次遺精年齡和首次性生活年齡較早均為前列腺癌的危險(xiǎn)因素。

CYP17基因編碼17a-羥化酶，存在三種基因型：A1/A1、A1/A2、A2/A2。由于在CYP17基因5′啟動(dòng)子去堿基序列中存在一個(gè)重要的多肽位點(diǎn)，當(dāng)該點(diǎn)堿基出現(xiàn)T→C改變時(shí)，即出現(xiàn)A2等位基因時(shí)，則可以增加基因的轉(zhuǎn)錄、翻譯功能，提高酶的活性，增加性激素的合成，特別是雄性激素水平的升高較為明顯。Lunn等〔7〕研究報(bào)道，攜帶A2等位基因的白人中，發(fā)生前列腺癌的危險(xiǎn)性增加，以平均年齡64歲為界的分組研究的結(jié)果也表明，A1/A2和A2/A2基因型均顯著增加了前列腺癌的發(fā)生。本研究結(jié)果顯示，CYP17的A2等位基因突變?cè)黾忧傲邢侔┑陌l(fā)病危險(xiǎn)，并存在一定的量效關(guān)系。同時(shí)結(jié)果表明與雄性相關(guān)的遺傳特征暴露在前列腺癌的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。

綜上所述，CYP17基因多態(tài)性與男性前列腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)，性生活史、飲食行為習(xí)慣和遺傳因素與前列腺癌存在關(guān)聯(lián)，CYP17基因與腫瘤家族史和首次遺精年齡交互作用增大前列腺癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。

1 羅松濤，王應(yīng)洪，李緒鯤，等.細(xì)胞色素P450酶17基因T-34C多態(tài)性與前列腺癌易感性關(guān)系的Meta分析〔J〕.中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2012；15(35)：4097-100.

2 梁彩花，柳 青，周芳堅(jiān)，等.前列腺癌與生活行為方式病例對(duì)照研究〔J〕.中國(guó)公共衛(wèi)生，2007；23(8)：929-31.

3 Whittemore AS，Kolonel LN，Wu AH，etal.Prostate cancer in relation to diet，physical activity，and body size in blacks，whites，and Asians in the United States and Canada〔J〕.J Natl Cancer Inst，1995；87(9)：652-61.

4 仇成軒，施侶元，張惠娟，等.飲食與前列腺癌危險(xiǎn)性關(guān)系的病例對(duì)照研究〔J〕.中國(guó)慢性病預(yù)防與控制，2001；9(2)：75-7.

5 Jain MG，Hislop GT，Howe GR，etal.Plant foods，antioxidants，and prostate cancer risk：findings from case-control studies in Canada〔J〕.Nutr Cancer，1999；34(2)：173-84.

6 梁彩花，柳 青，周芳堅(jiān)，等.廣東地區(qū)前列腺癌發(fā)病與家族史和婚育史關(guān)系的病例對(duì)照研究〔J〕.癌癥，2007；26(5)：484-8.

7 Lunn RM，Bell DA，Mohler JL，etal.Prostate cancer risk an polymorphism in 17 hydroxylase(CYP17) and steroid reductase (SRD5A2)〔J〕.Carcinogenesis，1999；20(9)：1727-31.

〔2016-10-21修回〕

(編輯 袁左鳴)

2014年廣西自然科學(xué)基金項(xiàng)目(2014GXNSFBA118154)

黃勇平(1968-)，男，主任醫(yī)師，主要從事泌尿外科學(xué)研究。

韋高猛(1980-)，男，主治醫(yī)師，主要從事泌尿外科學(xué)研究。

R73

A

1005-9202(2017)05-1156-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.05.053