白全亮

摘 要：免疫組織化學(xué)技術(shù)是通過利用抗原抗體特異結(jié)合的原理，把相關(guān)的物質(zhì)標記在抗體上，來表示復(fù)合物的存在和狀態(tài)。隨著我國科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，免疫組織化學(xué)技術(shù)越來越成熟，已被廣泛應(yīng)用于獸醫(yī)的診斷過程中。免疫組織化學(xué)技術(shù)應(yīng)用的范圍非常廣泛，主要包括：對病原體檢測、定位、動態(tài)分布，以及新病原體的發(fā)現(xiàn)、固定組織的研究過程中，是現(xiàn)代獸醫(yī)診斷中主要的技術(shù)手段之一，該文通過查詢大量的中外文獻，以及向相關(guān)人士咨詢，就免疫組織化學(xué)技術(shù)在獸醫(yī)診斷中的應(yīng)用進行淺要分析，希望對相關(guān)部門有一定幫助。

關(guān)鍵詞：免疫組織化學(xué)技術(shù) 獸醫(yī)診斷 應(yīng)用分析

中圖分類號：S854.4 文獻標識碼：A 文章編號：1674-098X（2016）09（a）-0094-02

免疫組織化學(xué)技術(shù)在國際上簡稱為IHC，是依靠組織化學(xué)發(fā)展起來的一種新型獸醫(yī)診斷技術(shù)，其主要的原理是利用抗原和抗體特異性結(jié)合的原理，把抗體當作特異性染色的主要載體，并且把相關(guān)的物質(zhì)標記在抗體分子中，以便在顯微鏡下對抗原抗體進行全方位仔細的觀察，最終達到對細胞和組織內(nèi)的相應(yīng)抗原進行定性和定位檢測。免疫組織化學(xué)技術(shù)的發(fā)現(xiàn)和發(fā)展使得傳統(tǒng)獸醫(yī)診斷發(fā)生了很大變化，使得傳統(tǒng)病理學(xué)逐漸發(fā)展成為免疫信號和形態(tài)相結(jié)合的現(xiàn)代病理學(xué)。自從20世紀70年代末期開始，免疫組織化學(xué)技術(shù)就對獸醫(yī)診斷的發(fā)展有著不可替代的作用。這主要是由于IHC可以在石蠟切片、冰凍組織和細胞制品上檢測組織中種類廣泛的病原，以及對活體動物中病原的檢測，亦可用于對動物體內(nèi)病原的動態(tài)分布、半定量等研究。此外，IHC還可對固定組織進行回顧性研究。免疫細胞化學(xué)技術(shù)在細胞、亞細胞水平原位檢測抗原分子，是其他任何生物技術(shù)難以達到和代替的，它能在細胞基因和分子水平同時原位顯示基因及其表達產(chǎn)物，形成新的檢測系統(tǒng)。雖然聚合酶鏈反應(yīng)（polymerasechain reaction，PCR）方法已經(jīng)廣泛應(yīng)用于疾病的診斷，但由于不能在組織和細胞內(nèi)進行明確的定位而限制PCR在病理組織學(xué)上的應(yīng)用。該文就著重對免疫組織化學(xué)技術(shù)在獸醫(yī)診斷中的應(yīng)用進行簡要分析，希望對我國獸醫(yī)診斷部門有一定的借鑒。

1 免疫組織化學(xué)技術(shù)對病原體的檢測

近年來，隨著我國科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，免疫組織化學(xué)技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于獸醫(yī)診斷過程中，尤其是在獸類傳染病的診斷過程中發(fā)揮了不可替代的作用，免疫組織化學(xué)技術(shù)在獸類傳染病診斷過程中的作用有很多方面因素的影響，其中最主要的原因是因為免疫組織化學(xué)技術(shù)能夠快速準確地檢測到病原體，比如：病毒、細菌的種類，還能檢測出某些不能在體外分離培養(yǎng)的病原體和病毒。我國著名免疫組織化學(xué)技術(shù)研究專家周春宇通過多年的工作經(jīng)驗和大量的實驗建立了檢測鵝細小病毒的間接酶免疫組織化學(xué)方法。這種檢測方式的發(fā)明使得鵝細小病毒對獸類組織器官和細胞的抗原定位檢測更加清晰明了[1]。除此之外，免疫組織化學(xué)技術(shù)也可以應(yīng)用于同一檢樣品病原比的檢測和識別過程中，國外研究者曾經(jīng)利用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測了某養(yǎng)殖場公牛心肌炎的主要病原體，并取得了輝煌的成績，檢測了90頭死于心肌炎的公牛感染組織，每個標本都使用了4種抗病原體，即：嗜血桿菌病抗病原體、牛病毒性腹瀉病毒抗病原體、牛支抗病原體、溶血性曼氏桿菌抗病原體。大約有65頭牛在心臟受損中發(fā)現(xiàn)了嗜血桿菌，而牛病毒性腹瀉病毒只有4頭，從這幾組數(shù)據(jù)中可以清楚看到嗜血桿菌才是導(dǎo)致公牛心肌炎的主要病原體。也有人通過免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測到犬瘟熱病毒、衣原體等病毒很難在體外分離，并且培養(yǎng)起來非常費時、費力。也有人通過免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測獸類組織切片中活著的非可培養(yǎng)狀態(tài)的副溶血性弧菌，發(fā)現(xiàn)利用免疫組織化學(xué)技術(shù)能夠準確檢測出非可培養(yǎng)狀態(tài)的副溶血性弧菌的位置，大大節(jié)省了實驗人員的精力和時間，把獸醫(yī)診斷檢測人員從繁重的工作中解放出來，所以說免疫組織化學(xué)技術(shù)不但能夠減少獸醫(yī)診斷的工作量，還能提高獸醫(yī)診斷的準確性和效率[2]。

2 免疫組織化學(xué)技術(shù)對病原機體的定位

免疫組織化學(xué)技術(shù)具有很多優(yōu)點，但是我國免疫組織化學(xué)技術(shù)的起步比較晚，相關(guān)技術(shù)還不夠成熟，還不能精確地測量出病原體的含量，但是免疫組織化學(xué)技術(shù)卻能使得病原檢測變得更加直觀清晰，還可對病原體進行準確定位。比如：利用免疫組織化學(xué)技術(shù)能夠快速準確地對犬類傳染性肝炎病毒定位在細胞核內(nèi)，能夠把狂犬病病毒定位到細胞質(zhì)當中，這是傳統(tǒng)的獸醫(yī)診斷所達不到的技術(shù)高度，使得原來被稱為不治之癥的狂犬病有了治愈的希望。我國著名免疫組織化學(xué)專家陳海軍曾建立了檢測石蠟組織切片中I型鴨肝炎病毒的間接免疫酶染色方法，利用免疫組織化學(xué)技術(shù)對I型鴨肝炎病毒導(dǎo)致鴨死亡的組織器官進行深入研究和分析，檢測結(jié)果顯示，I型鴨肝炎病毒在死亡鴨的肝、心、盲腸、直腸中的免疫組織化學(xué)檢測都是陽性，這個實驗可以清楚看出I型鴨肝炎病毒主要分布在感染細胞的細胞質(zhì)當中[3]。

3 病原在機體的動態(tài)分布研究

病原在機體的動態(tài)分布研究是獸醫(yī)診斷動物傳染病的基礎(chǔ)，能夠為動物發(fā)病的機理研究提供理論依據(jù)，對養(yǎng)殖業(yè)控制動物病情有非常重要的意義。我國對病原在機體的動態(tài)分布研究起步比較晚，到目前為止，主要利用生物學(xué)技術(shù)、免疫酶組化法進行研究。通過利用免疫組織化學(xué)技術(shù)能夠清晰明了地觀察到病原在組織細胞中的生長動態(tài)，也就能觀察到病毒從一個部位到另一個部位的擴散過程，有助于獸醫(yī)研究疫病發(fā)病的原因和過程。同時，免疫組織化學(xué)技術(shù)還能檢測出肉眼病變不明顯的組織內(nèi)的病因發(fā)病過程和狀態(tài)[4]。

4 結(jié)語

免疫組織化學(xué)技術(shù)應(yīng)用的范圍非常廣泛，除了應(yīng)用在醫(yī)院診斷過程中，還應(yīng)用在獸醫(yī)疫病疾病的研究過程中。隨著我國科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，生物分子技術(shù)和遺傳技術(shù)得到了廣泛發(fā)展，使得免疫組織化學(xué)技術(shù)越來越完善，免疫組織化學(xué)技術(shù)在獸醫(yī)診斷過程中發(fā)揮的作用和價值越來越大，該文通過查閱大量的中外文獻，分析免疫組織化學(xué)技術(shù)對病原體的檢測，免疫組織化學(xué)技術(shù)對病原機體的定位，病原在機體的動態(tài)分布研究，希望對獸醫(yī)診斷發(fā)展有一定幫助。

參考文獻

[1] 萬美梅，孫彥偉，林乃鋒.免疫組織化學(xué)技術(shù)在獸醫(yī)診斷中的應(yīng)用[J].動物醫(yī)學(xué)進展，2013（6）：94-97.

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[4] 溫濤，趙建增，羅勝軍，等.化學(xué)發(fā)光免疫分析在獸醫(yī)診斷中的應(yīng)用[J].中國畜牧獸醫(yī)，2013（10）：73-75.