(河南省人民醫(yī)院，河南 鄭州 450003)

塞來昔布膠囊是由Pfizer Pharmaceuticals LLC(輝瑞)開發(fā)，于2003年8月獲CFDA批準(zhǔn)在中國進(jìn)口注冊上市。主要用于緩解骨關(guān)節(jié)炎、成人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎的癥狀和體征及治療成人急性疼痛。

查閱相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和文獻(xiàn)資料[1-7]，塞來昔布在生理pH值范圍內(nèi)的水性介質(zhì)中幾乎不溶，溶出度檢查采用槳法、50 rpm，但選擇了非生理pH12.0的0.04 mol/L磷酸三鈉溶液為溶出介質(zhì)，并添加1%十二烷基硫酸鈉(SLS)。因此，本文在pH12.0的磷酸三鈉溶液的溶出介質(zhì)中，考察不同溶出條件對塞來昔布膠囊(200 mg)體外溶出曲線的影響，包括槳法(或加沉降籃)、籃法、表面活性劑SLS的濃度等。

1 材料與方法

1.1 材料

磷酸三鈉(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；氫氧化鈉(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；微孔濾膜(混合膜0.45μm，上海市新亞凈化器件廠)；一水乳糖(Foremost Farms，USA)；交聯(lián)羧甲基纖維素鈉(FMC公司)；聚維酮K30(BASF公司)；硬脂酸鎂(安徽山河藥用輔料股份有限公司)；十二烷基硫酸鈉(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；西樂葆(輝瑞制藥有限公司，M07166)；塞來昔布對照品(深圳健興醫(yī)藥科技有限公司，TLC，99.9%)；純化水。

溶出試驗(yàn)儀(RCZ-8M，天大天發(fā)科技有限公司)；紫外分光光度計(UV-2550，島津中國)。

1.2 測定方法

1.2.1 波長的選擇 分別配制輔料和膠囊殼空白溶液及對照品溶液，在200～400 nm波長范圍內(nèi)掃描各配制溶液，并記錄光譜圖。

輔料空白溶液：稱取乳糖50 mg、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉10 mg、聚維酮K30 10 mg、硬脂酸鎂10 mg和十二烷基硫酸鈉10 mg至1 000 mL量瓶中，加適量溶出介質(zhì)超聲10 min后稀釋至刻度，濾過，即得。

膠囊殼空白溶液：按照《中國藥典》2015版通則中“0931溶出度與釋放度測定法”，取6粒膠囊，除盡膠囊內(nèi)容物，置一個溶出杯中，溶出介質(zhì)1 000 mL，攪拌、溶解后，濾過，即得。

對照品溶液：取塞來昔布對照品約20 mg，精密稱定，至100 mL量瓶中，加溶出介質(zhì)溶解后稀釋至刻度，作為對照品儲備液。精密量取5 mL對照品儲備液至100 mL量瓶中，配制成約10μg/mL對照品溶液。

1.2.2 檢測方法的驗(yàn)證 采用配制的對照品溶液或儲備液，分別進(jìn)行濾膜吸附、精密度、溶液穩(wěn)定性和回收率等試驗(yàn)。

1.2.3 線性、范圍 分別精密量取對照品儲備液0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8 mL至10 mL量瓶中，加溶出介質(zhì)稀釋至刻度，配制一系列濃度的對照品溶液，在選定波長處測定吸光度值A(chǔ)，以吸光度A為縱坐標(biāo)、濃度C為橫坐標(biāo)，做線性回歸，并記錄線性方程和回歸系數(shù)。

1.2.4 溶出曲線的測定 參考FDA藥物溶出數(shù)據(jù)庫收載的溶出方法，按照《中國藥典》2015版通則0931溶出度與釋放度測定法和“普通口服固體制劑溶出曲線測定與比較指導(dǎo)原則”，采用RCZ-8M溶出儀，1 000 mL溶出介質(zhì)，在10、20、30、45、60、120 min時間點(diǎn)各取5 mL，濾過，測定吸光度，按外標(biāo)法計算各時間點(diǎn)溶出量；考察不同溶出介質(zhì)(介質(zhì)1：含0%SLS；介質(zhì)2：含1%SLS)、溶出方法(即：槳法、50 rpm、1%SLS；槳法、50 rpm、0%SLS；槳法、50 rpm、0%SLS、沉降籃；籃法、75 rpm、0%SLS)對塞來昔布膠囊溶出度的影響。

2 結(jié)果

2.1 檢測波長的確定(見圖1)

圖1 各樣品溶液在200～400 nm之間的光譜圖(A:對照品；B:輔料空白；C：膠囊殼空白)

由光譜圖1可知，塞來昔布在252 nm處有吸收峰，而輔料和膠囊殼空白溶液在該波長處幾乎無吸收。結(jié)果表明，輔料和膠囊殼不干擾塞來昔布的溶出度測定。

2.2 濾膜吸附

對照品溶液濾過前和濾過不同體積續(xù)濾液的吸光度值的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.53%，表明濾膜幾乎對塞來昔布不吸附，對塞來昔布測定的影響不顯著。

2.3 精密度

對照品溶液，連續(xù)測定6次的吸光度值的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.66%，表明紫外可見分光光度儀的精密度良好。

2.4 穩(wěn)定性

對照品溶液在0、1、2、4、6、24 h吸光度測定值的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.42%，表明塞來昔布在pH12.0介質(zhì)中24 h內(nèi)是穩(wěn)定的。

2.5 回收率

采用槳法、50 rpm、1 000 mL的溶出介質(zhì)，投入塞來昔布膠囊1粒，攪拌2 h后停止，即得塞來昔布膠囊溶液。精密量取該溶液4 mL至10 mL量瓶，9份，分別加入精密量取的對照品儲備液3、3.5、4.5 mL，充分搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液0.5 mL至10 mL量瓶中，配制成低、中、高3個濃度的樣品溶液。依法測定，計算回收率(見表1)。由表1中結(jié)果可知本方法準(zhǔn)確度良好。

表1 溶出度回收率試驗(yàn)測定結(jié)果

2.6 線性范圍(見圖2、3)

圖2 塞來昔布在pH12.0、0%SLS介質(zhì)中對照品溶液線性關(guān)系圖

圖3 塞來昔布在pH12.0、1%SLS介質(zhì)中對照品溶液線性關(guān)系圖

由圖2、3可知，溶出介質(zhì)中添加0%或1%的十二烷基硫酸鈉(SLS)，塞來昔布在4～16μg/mL濃度范圍內(nèi)與吸光度的線性關(guān)系良好。

2.7 溶出曲線結(jié)果(見圖4)

圖4 不同溶出條件下塞來昔布膠囊體外溶出曲線圖

由圖4可知，塞來昔布膠囊采用槳法時，表面活性劑(SLS)對溶出行為影響不大，加用沉降籃后溶出反而稍有降低；采用籃法時，溶出變快。所考察溶出方法的溶出快慢順序依次是籃法>槳法、1%SLS ≈槳法、0%SLS>沉降籃。

3討論

研究發(fā)現(xiàn)，在pH12.0的溶出介質(zhì)中，由于膠囊殼自身的因素，如囊殼的漂浮等，籃法更易于塞來昔布膠囊的溶出，分析原因主要是膠囊殼在溶解過程中不會致使顆粒粘附并堆積于溶出杯底部，造成溶出變慢或溶出時間延長的現(xiàn)象。在使用沉降籃時，并不能改善顆粒在溶出杯底部的堆積，反而溶出度最慢。

本研究使用紫外分光光度法測定塞來昔布膠囊體外溶出度，結(jié)果表明，輔料和膠囊殼不干擾溶出度測定；在4～16μg/mL范圍內(nèi)塞來昔布濃度與吸光度呈良好線性關(guān)系；樣品平均回收率為99.64%，RSD值<1%，方法準(zhǔn)確度良好，可方便、快速、準(zhǔn)確的測定塞來昔布膠囊的體外溶出曲線。FDA溶出數(shù)據(jù)庫及文獻(xiàn)中使用到的溶出介質(zhì)是pH12.0的磷酸三鈉溶液，文獻(xiàn)報道，塞來昔布在pH12.0溶出介質(zhì)中溶解度為322.5 mg/mL[2,8]，而其為非生理pH值，并且添加了表面活性劑SLS(1%、m/v)以達(dá)到藥物溶出漏槽條件；由于塞來昔布在生理相關(guān)介質(zhì)中的溶解度非常低，無法建立臨床上有意義的體內(nèi)外相關(guān)性[2,9]。因此，F(xiàn)DA溶出數(shù)據(jù)庫和文獻(xiàn)中使用到的pH12.0磷酸三鈉溶液(1%SLS、m/v)為溶出介質(zhì)，應(yīng)是西樂葆生產(chǎn)質(zhì)量控制的溶出方法，且可以降低SLS的濃度。

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