姜海峰++耿龍武++佟廣香++武鵬飛++李晨宇++徐偉

doi：10.15889/j.issn.1002-1302.2016.10.090

摘要：采用靜水水生生物測試方法研究5種常用漁藥對蒙古鲌（Chanodichthys mongolicus）魚苗和幼魚的急性毒性。結(jié)果顯示，硫酸銅、聚維酮碘、三氯異氰尿酸、敵百蟲、食鹽對蒙古鲌魚苗的安全質(zhì)量濃度分別為0.036、13.830、0.116、0.183、1 863 mg/L，對幼魚的安全質(zhì)量濃度分別為0.384、94.000、0.827、1.350、3 038 mg/L。5種漁藥對蒙古鲌魚苗和幼魚的毒性大小依次為：硫酸銅>三氯異氰尿酸>敵百蟲>聚維酮碘>食鹽。與生產(chǎn)常用質(zhì)量濃度進行對比表明，硫酸銅不適用于魚苗階段的病害防治。

關(guān)鍵詞：漁藥；蒙古鲌；急性毒性；安全質(zhì)量濃度

中圖分類號： S941.91文獻標志碼： A文章編號：1002-1302（2016）10-0311-03

收稿日期：2015-08-26

基金項目：中國水產(chǎn)科學(xué)研究院科研基金（編號：2014A07XK04）。

作者簡介：姜海峰（1987—），男，吉林梅河口人，碩士，助理研究員，主要從事水生動物遺傳育種研究。E-mail：haifeng-2008@163.com。

通信作者：徐偉，研究員。E-mail：xwsc23@163.com。蒙古鲌（Chanodichthys mongolicus）別稱紅尾、紅梢子等，隸屬鯉科鲌亞科鲌屬，是一種常見的經(jīng)濟肉食性魚類，在我國各水系中均有分布，多棲息于有緩流的大型湖泊中[1]。蒙古鲌曾是黑龍江流域湖泊群落的優(yōu)勢種，在鏡泊湖湖區(qū)產(chǎn)量很高，在20世紀80年代達到150 t，占漁獲量的 45.9%～561%。近年來，由于環(huán)境破壞、過度捕撈等人為因素，野生資源量已嚴重下降，2000年左右年產(chǎn)量降低至 50 t，2001年至今平均年產(chǎn)量僅為25 t左右[2]。為保護和恢復(fù)這一名特優(yōu)魚類資源，近年來，中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所開展了鏡泊湖蒙古鲌的苗種規(guī)?；嘤腿斯ぴ鲋撤帕?，并取得了較好的效果[3]。然而，在蒙古鲌苗種的人工增養(yǎng)殖過程中，病害問題是限制其苗種培育的關(guān)鍵問題之一。已有學(xué)者對蒙古鲌的生物學(xué)特性[4]、營養(yǎng)需求[5]、人工繁殖[3，6]等進行了研究，而關(guān)于蒙古鲌病害防治的研究較少。本研究選用5種常用漁藥對蒙古鲌的魚苗和幼魚進行急性毒性試驗，以期為蒙古鲌苗種培育階段的病害防治和科學(xué)用藥提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗材料

供試魚由中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所呼蘭試驗站提供。蒙古鲌魚苗為當(dāng)年繁育的仔魚經(jīng)3個月的池塘培育，規(guī)格為2.8～3.5 cm，平均體質(zhì)量為（0.28±0.08） g；幼魚為1冬齡個體，規(guī)格為4.6～5.5 cm，平均體質(zhì)量為（3.6±0.7） g。挑選體質(zhì)健壯、外觀正常的健康個體作為試驗對象。試驗前將魚置于水族箱中暫養(yǎng)1周，暫養(yǎng)期間正常投喂換水，試驗前24 h停止投喂。試驗所用藥物的規(guī)格見表1。

表1試驗用藥物信息

藥物成分和含量生產(chǎn)廠家五水硫酸銅分析純南京甲乙信維化工有限公司聚維酮碘10%聚維酮碘溶液（水產(chǎn)用）廣州南方動物保健藥廠敵百蟲80%（粉劑）廣州金水動物保健品有限公司三氯異氰尿酸有效氯計30%（粉劑）廣州金水動物保健品有限公司食鹽分析純南京甲乙信維化工有限公司

1.2急性毒性試驗

試驗用水為曝氣24 h的自來水，水溫為22.3～24.5 ℃，pH值為7.5±0.1，溶解氧為（6.0±0.5） mg/L。試驗容器采用體積為7 L（29 cm×8 cm×20 cm）的PVC魚缸，每個魚缸加入5 L藥液。

試驗前將藥品配成母液，按所需比例加入魚缸并混勻。綜合參照漁藥常用劑量及文獻報道進行預(yù)試驗，得到24 h 100%死亡的最低質(zhì)量濃度、96 h無死亡的最高質(zhì)量濃度。在此濃度范圍之間，按照等對數(shù)間距設(shè)置5個試驗濃度梯度組和1個空白對照，每個梯度設(shè)2個重復(fù)，每個重復(fù)放入10尾魚進行正式試驗。試驗開始后8 h內(nèi)觀察并記錄試驗魚的活動狀況、中毒癥狀、死亡時間，統(tǒng)計各組24、48、96 h的死亡數(shù)。試驗魚的鰓蓋不扇動并對觸碰尾柄無反應(yīng)即判定該魚已死亡，將死魚及時剔除以保證水質(zhì)。試驗采用靜水生物法[7]，每24 h更換50%的試驗液。三氯異氰尿酸具有揮發(fā)性，為保證其有效濃度，該組換水頻率為12 h/次。試驗期間不投喂，微充氣。

1.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計

采用寇氏法（Karder）[8]計算試驗魚對各漁藥的半數(shù)致死質(zhì)量濃度（LC50），公式為：

lgLC50=Xm-d（∑p-0.5）。

式中：Xm為死亡組最大劑量的對數(shù)，d為相鄰組濃度對數(shù)差，p為各組的死亡率，∑p為各組死亡率的總和。

安全質(zhì)量濃度（SC）按下列公式[7]計算：

SC=LC50，48 h×0.3/（LC50，24 h/LC50，48 h）2。

2結(jié)果與分析

2.1中毒癥狀

試驗開始后，各藥物低濃度組的試驗魚活動狀況均與對照組相似，大多靜臥于底部，游動較緩。高濃度組反應(yīng)較為劇烈，其中，硫酸銅組魚沿魚缸迅速游動，隨后游動逐漸緩慢，腹面朝上，對外界刺激不敏感，魚苗、幼魚分別于試驗開始2、7 h后開始死亡，死亡個體呈灰白色并漂于水面；聚維酮碘組魚急速竄游，隨時間的延長失去平衡能力，魚體側(cè)翻，無法保持在水的上表層，魚苗、幼魚分別于6、10 h后開始死亡，死亡魚體體色發(fā)白，沉于水底；三氯異氰尿酸組魚在試驗初期表現(xiàn)出游動劇烈、呼吸頻率加快的現(xiàn)象，隨著時間的延長運動能力和平衡能力減弱，腹面向上漂浮于水面，魚苗、幼魚分別于1、2 h開始死亡，死亡個體鰓發(fā)白，表明高濃度三氯異氰尿酸對蒙古鲌的呼吸功能造成了影響；敵百蟲對蒙古鲌的毒性作用顯現(xiàn)較快，試驗開始后便可見魚狂躁不安，浮于水面竄游，死亡前出現(xiàn)側(cè)翻、仰游等現(xiàn)象，魚苗、幼魚分別于2、6 h開始死亡，死亡后體表泛白、僵硬，口及鰓蓋張開；食鹽對蒙古鲌的毒性作用顯現(xiàn)較慢，可觀察到試驗魚隨時間的延長逐漸失去平衡能力，對外界刺激反應(yīng)遲鈍，最后沉于缸底，僅見微弱的呼吸，魚苗、幼魚分別于8、12 h開始死亡。

2.2蒙古鲌在5種漁藥急性毒性試驗中的死亡率

5種藥物對蒙古鲌魚苗和幼魚的累計死亡率見表2。隨著試驗濃度的增加以及時間的延長，5種漁藥對蒙古鲌的急性毒性效應(yīng)均明顯增強，死亡率呈明顯上升趨勢。除食鹽處理組于96 h開始死亡外，其余各藥物的最低濃度組在24、48、96 h的死亡率均為0%；除硫酸銅和三氯異氰尿酸在96、48 h的死亡率達到100%外，其余各藥物的最高濃度組在24 h的死亡率均為100%。從試驗濃度以及5種漁藥處理的死亡率來看，蒙古鲌魚苗對5種漁藥的敏感性遠高于幼魚，硫酸銅對魚苗、幼魚的毒性最大，氯化鈉的毒性最小。

2.35種漁藥的半致死濃度和安全質(zhì)量濃度

5種漁藥對蒙古鲌魚苗、幼魚的半致死濃度和安全質(zhì)量濃度見表3。由表3可知，5種漁藥對蒙古鲌魚苗和幼魚的LC50隨時間的延長而減小，表明5種漁藥的毒性均隨時間的延長而增加。根據(jù)安全質(zhì)量濃度可知，5種漁藥對蒙古鲌魚苗和幼魚的毒性大小依次為：硫酸銅>三氯異氰尿酸>敵百蟲>聚維酮碘>食鹽。

3結(jié)論與討論

根據(jù)農(nóng)藥對魚類急性毒性等級評價標準，可按LC50，48 h的大小將藥物劃分為劇毒（<0.1）、高毒（0.1～<1.0）、中毒（1.0～10.0）、低毒（>10.0）4個等級[9]。據(jù)此標準， 對于蒙表35種漁藥對蒙古鲌魚苗、幼魚的半致死濃度和安全質(zhì)量濃度mg/L

藥物魚苗LC5024 h48 h96 h魚苗安全

質(zhì)量濃度幼魚LC5024 h48 h96 h幼魚安全

質(zhì)量濃度硫酸銅0.2310.1860.1550.036.9331.6851.5520.384聚維酮碘62.4856.4654.2213.8358647641494三氯異氰尿酸0.5280.4760.4070.1164.4003.7653.0580.827敵百蟲0.4730.4240.3740.18314.149.668.861.35食鹽7 8467 2576 4511 86312 22811 48310 5323 038

古鲌魚苗，硫酸銅、三氯異氰尿酸、敵百蟲為高毒藥物，聚維酮碘、食鹽為低毒藥物；對于蒙古鲌幼魚，硫酸銅、三氯異氰尿酸、敵百蟲為中毒藥物，聚維酮碘、食鹽為低毒藥物。藥物的毒性效應(yīng)與試驗魚的種類、生長階段、健康狀態(tài)、水質(zhì)理化指標等因素密切相關(guān)，其中試驗魚的生長階段在很大程度上影響藥物的毒性[10]。本研究中，5種漁藥對蒙古鲌魚苗的毒性效應(yīng)遠高于幼魚，表明魚苗對5種藥物的敏感程度高于幼魚。這與魚苗階段打網(wǎng)、運輸?shù)炔僮魉劳雎屎芨叩默F(xiàn)象一致，可能是由于魚苗階段器官尚未發(fā)育成熟，抗應(yīng)激壓力能力及對藥物的代謝能力較弱。

硫酸銅是魚病防治中的常用藥物，游離的銅離子能夠破壞氧化還原酶系統(tǒng)的活性，阻礙代謝蛋白質(zhì)的合成，從而對指環(huán)蟲、纖毛蟲等原生動物以及一些低等藻具有較強的殺滅作用。本研究中，蒙古鲌魚苗和幼魚對硫酸銅最為敏感，其安全質(zhì)量濃度相差近10倍，分別為0.036、0.384 mg/L，低于海南紅鲌魚苗（0.09 mg/L）[11]、翹嘴紅鲌魚苗（0.11 mg/L）[12]、黑尾近紅鲌魚苗（0.230 mg/L）[13]、厚頜魴魚苗（0.445 mg/L）[14]。生產(chǎn)中硫酸銅的常用潑灑濃度為0.5～0.7 mg/L，一般當(dāng)質(zhì)量濃度低于0.2 mg/L時對寄生蟲無殺滅效果[12]。本試驗中，硫酸銅對蒙古鲌魚苗的安全質(zhì)量濃度為常用潑灑濃度的1/（13.9～19.4），質(zhì)量濃度在0.1 mg/L時即出現(xiàn)死亡現(xiàn)象，因此不宜在魚苗階段使用硫酸銅消毒，以免造成魚苗大批量死亡；對幼魚的安全質(zhì)量濃度為常用潑灑濃度的1/（1.3～1.8），但當(dāng)質(zhì)量濃度為1 mg/L時，至96 h仍未出現(xiàn)死亡，表明該藥物可用于幼魚階段的消毒，但仍需謹慎使用，另外考慮到重金屬殘留等問題，建議盡量選用其他替代藥物。

聚維酮碘是聚乙烯吡咯烷酮與碘的絡(luò)合物，對大部分細菌、真菌、霉菌孢子及部分病毒均有一定的殺滅作用。聚維酮碘對蒙古鲌魚苗、幼魚的安全質(zhì)量濃度相差約6.8倍，分別為13.83、94.00 mg/L，高于黑尾近紅鲌幼魚（37.7 mg/L）[15]、唇幼魚（17.29 mg/L）[16]、斜帶石斑魚幼魚（14.27 mg/L）[17]。其安全質(zhì)量濃度遠高于生產(chǎn)中的常用質(zhì)量濃度4.5～7.5 μg/L（以聚維酮碘計）[17]，且聚維酮碘具有無毒、無殘留的優(yōu)點，因此可安全應(yīng)用于蒙古鲌苗種培育階段的病害防治。

三氯異氰尿酸是一種極強的氧化劑和氯化劑，對于細菌、病毒、真菌、細菌芽孢均有較強的殺滅作用。試驗結(jié)果表明，三氯異氰尿酸對蒙古鲌魚苗、幼魚的安全質(zhì)量濃度相差約 7.1 倍，分別為0.116、0.827 mg/L，接近于黑尾近紅鲌魚苗（0.165 mg/L）[15]、翹嘴紅鲌魚苗（0.136 mg/L）[18]、厚頜魴魚苗（0.190 mg/L）[14]，高于斜帶石斑魚幼魚（0.479 mg/L）[17]。三氯異氰尿酸的生產(chǎn)常用劑量為0.090～0.135 mg/L（以有效氯計）[18]，表明三氯異氰尿酸能夠應(yīng)用于防治魚苗階段的細菌性疾病，但使用時要控制用量，而在幼魚階段可安全使用。然而，三氯異氰尿酸在水體中的分解產(chǎn)物為氰尿酸，對人體具有致癌作用，且降解速度非常緩慢，應(yīng)降低使用頻率。

敵百蟲是一種低毒高效的有機磷酸酯類殺蟲劑，通過抑制膽堿酯酶活性從而殺滅病魚體表的甲殼動物、吸蟲以及腸內(nèi)寄生的蠕蟲等寄生蟲。試驗結(jié)果表明，敵百蟲對蒙古鲌魚苗的安全質(zhì)量濃度遠低于幼魚，分別為0.183、1.350 mg/L，兩者相差約7.4倍，與黑尾近紅鲌魚苗（0.251 mg/L）[19]、厚頜魴魚苗（0.268 mg/L）[14]、海南紅鲌幼魚（1.56 mg/L）[11]相近，但與翹嘴紅鲌魚苗（6.32 mg/L）[12]相差較大。生產(chǎn)中敵百蟲的常用潑灑濃度為0.2～0.5 mg/L[12]，由于蒙古鲌在魚苗階段對敵百蟲的敏感性較高，應(yīng)適當(dāng)控制敵百蟲的用量，而在幼魚階段可安全使用。

氯化鈉主要通過改變滲透壓實現(xiàn)在魚病防治中的應(yīng)用，高濃度（3%）可殺滅寄生蟲和微生物，低濃度（0.1%～0.3%）可降低打網(wǎng)、運輸?shù)让{迫的應(yīng)激反應(yīng)，并具有促進傷口愈合的作用[15]。試驗結(jié)果表明，氯化鈉對蒙古鲌魚苗、幼魚的安全質(zhì)量濃度相差較小，分別為1 863、3 380 mg/L，高于黑尾近紅鲌幼魚（1 006 mg/L）[12]、翹嘴紅鲌魚苗（895.4 mg/L）[18]，低于海南紅鲌魚苗（3 000 mg/L）[11]，遠高于常用劑量。試驗表明，蒙古鲌具有較高的耐鹽性，可安全應(yīng)用于皮膚及鰓寄生蟲疾病、爛鰓病、水霉病等疾病的防治。

在蒙古鲌苗種培育階段的病害防治中，應(yīng)針對不同生長階段合理使用藥物。對于蒙古鲌魚苗，食鹽、聚維酮碘可安全使用，三氯異氰尿酸、敵百蟲應(yīng)慎用，而硫酸銅不宜使用；對于蒙古鲌幼魚，食鹽、聚維酮碘、敵百蟲、三氯異氰尿酸均可安全使用，而硫酸銅應(yīng)慎用。此外，實際養(yǎng)殖生產(chǎn)中還應(yīng)考慮水溫、pH值、水中懸浮物等因素的影響，先進行預(yù)試驗觀察，以達到預(yù)防中毒、有效治療的目的。

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