●李哲 鞠吉東 鄭文秀 季冬青 張國青

中藥鑒定技術(shù)的現(xiàn)代研究進(jìn)展

●李哲 鞠吉東 鄭文秀 季冬青 張國青

隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展，中藥鑒定由傳統(tǒng)的眼觀、口嘗、鼻聞、手摸、水試、火試等傳統(tǒng)鑒別逐步發(fā)展到了分子鑒別或是基因水平的DNA標(biāo)記鑒別。這些新技術(shù)的發(fā)展為中藥鑒定提供了更多科學(xué)有效的手段，與傳統(tǒng)技術(shù)相結(jié)合可以形成一套完善的鑒別體系。本文結(jié)合有關(guān)文獻(xiàn)就近年來中藥鑒定新技術(shù)的發(fā)展做一綜述。

中藥鑒定；新技術(shù)；綜述

中藥具有悠久的治療歷史，是醫(yī)藥發(fā)展中不可或缺的一部分。對中藥真?zhèn)蔚蔫b別是中藥發(fā)展及臨床應(yīng)用的前提和保障。中藥種類繁多，品系復(fù)雜，為了確保其安全性，一套完整鑒別體系的建立尤為重要。傳統(tǒng)鑒別技術(shù)往往由經(jīng)驗所得，在鑒別粉末藥材，破碎藥材及中成藥上有一定局限性?，F(xiàn)代新興鑒別技術(shù)能夠克服環(huán)境因素，材料來源等的影響，因此，合理地結(jié)合運用傳統(tǒng)鑒別技術(shù)與新技術(shù)，能夠推動中藥鑒定技術(shù)的快速科學(xué)的發(fā)展。下文將對現(xiàn)代鑒別新技術(shù)進(jìn)行簡要概述，以期為中藥鑒別提供科學(xué)依據(jù)，進(jìn)一步促進(jìn)其發(fā)展。

1 顯微鑒別技術(shù)

很多中藥在外形上具有相似性，但其內(nèi)部細(xì)胞性狀和組織結(jié)構(gòu)卻大不相同，單純觀察中藥的外部形態(tài)不能進(jìn)行準(zhǔn)確的鑒別。顯微鑒別技術(shù)能夠通過觀察中藥的細(xì)胞形態(tài)，組織碎片結(jié)構(gòu)以及內(nèi)含物等特征來鑒別中藥的真?zhèn)蝺?yōu)劣。顯微鑒別具有準(zhǔn)確，快捷，簡便等優(yōu)點，特別適合中藥粉末制劑的鑒別。楊穎[1]研究表明：牛黃的正品及偽品在顯微鑒別上存在顯著差異，天然牛黃的粉末中可見不規(guī)則的團(tuán)塊，內(nèi)部有紅棕色或黃棕色細(xì)小類方形晶體，遇水合氯醛后呈明顯的金黃色，久置后會變綠，而牛黃的偽品均無天然牛黃的顯微特征。王世清等[2]研究對婦科再造丸中的成分進(jìn)行鑒定，其結(jié)果表明三七、當(dāng)歸等中藥的分泌細(xì)胞作為顯微鑒定的特征起到重要的鑒別意義。

2 DNA分子鑒定技術(shù)

隨著分子生物技術(shù)的發(fā)展，基因水平上的DNA分子標(biāo)記技術(shù)成為現(xiàn)代用于中藥鑒定的有效手段之一。DNA分子標(biāo)記技術(shù)是利用DNA分子的多態(tài)性對其缺失，重排，易位等特性進(jìn)行診斷和標(biāo)記，研究方法相對復(fù)雜。DNA為生物體內(nèi)的遺傳載體，穩(wěn)定性很高，不易受生長環(huán)境，生理狀態(tài)等的影響，因此將其用于鑒別中藥材具有一定的優(yōu)越性，并且其準(zhǔn)確性與可靠度也很高。有研究通過該技術(shù)對真假人參進(jìn)行了PCR擴(kuò)增，結(jié)果發(fā)現(xiàn)真假人參的DNA指紋圖譜存在顯著差異。孫岳等[3]研究采用9個特異性引物對南、北五味子的基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,結(jié)果發(fā)現(xiàn)3個特異性引物擴(kuò)增得到多態(tài)性好的條帶,通過觀察其瓊脂糖凝膠電泳所顯示的DNA帶型的不同可以對南、北五味子進(jìn)行迅速區(qū)分。

3 聚類分析鑒別技術(shù)

聚類分析技術(shù)基于現(xiàn)代統(tǒng)計學(xué)方法對研究對象的定性或定量特征進(jìn)行分組歸類。通過選取不同的長短距離或模糊相似的系數(shù)對一批中藥材樣品進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，可以得到不同的動態(tài)聚類圖，以此可以對中藥進(jìn)行分類，鑒定及質(zhì)量評價。

常璇等[4]利用該方法對寧夏平羅縣和中寧縣兩地枸杞中的鋅、銅、錳、鋅、硒、鍺、砷 6種微量元素的含量進(jìn)行綜合評價,以此來比較不同枸杞存在的差異。結(jié)果顯示,根據(jù)比較6種微量元素的含量可以區(qū)分不同產(chǎn)地的枸杞且鑒別準(zhǔn)確率為100%。該研究表明聚類分析技術(shù)可以為制定標(biāo)準(zhǔn)的枸杞道地性質(zhì)提高科學(xué)的理論依據(jù)。在中藥鑒定技術(shù)的發(fā)展中，聚類分析技術(shù)的前景十分廣闊。

4 光譜鑒別技術(shù)

光譜鑒別技術(shù)是通過研究中藥的紫外線、紅外線以及熒光等的穿透性對其理化性質(zhì)進(jìn)行分析，紫外-可見光譜法、紅外光譜法、質(zhì)譜法、X射線衍射圖譜法等為常見的光譜分析技術(shù)。

紫外-可見光譜鑒別是將中藥的提取液進(jìn)行紫外測定，根據(jù)結(jié)果對中藥進(jìn)行評價，張桂芝[5]使用紫外一階導(dǎo)數(shù)光譜法配合紫外光譜法，對我國2個地區(qū)的5種不同樣品進(jìn)行品種和質(zhì)量鑒定。

紅外光譜法是將中藥在用溶劑處理或壓片前置于紅外光譜區(qū)進(jìn)行測定，根據(jù)圖譜的差異進(jìn)行鑒別，具有準(zhǔn)確度高，取樣量小，特征性強(qiáng)等優(yōu)點，是中藥鑒定的常用方法，石蕓等[6]對10批不同產(chǎn)地的黃蜀葵花樣品采用傅里葉紅外光譜法進(jìn)行測定，采用聚類分析方法，共有峰率、變異峰率雙指標(biāo)序列進(jìn)行分析，結(jié)果將10批樣品分為三類。

質(zhì)譜法是將樣品分子在真空系統(tǒng)中離解成帶電離子，通過對帶電離子的質(zhì)量和強(qiáng)度進(jìn)行測定來分析藥材的成分和結(jié)構(gòu)。采用薄層色譜可以鑒別天山雪蓮、綿頭雪蓮、水母雪蓮和鼠曲雪蓮，但結(jié)果精密度較低。采用超高壓液相色譜-飛行時間質(zhì)譜儀（UPLC-TOF-MS）可以用來精確快速地鑒別天山雪蓮與其混淆品，并能找出其指標(biāo)成分[7]。

通過X射線照射的物質(zhì)可以產(chǎn)生不同程度的衍射特征圖，因此可以用來進(jìn)行中藥鑒定，利用該法對明礬、石膏、信石、滑石等的鑒定表明礦物藥具有較好的結(jié)晶度，其衍射能力很強(qiáng)，特別適用于存在晶型差異的藥材的鑒別[8]。

5 其他鑒別技術(shù)

除了以上幾種鑒別技術(shù)外，研究表明，熱分析法、電泳法、化學(xué)模式識別法等也可用于中藥的鑒定。

（作者單位：山東中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院)

[1]楊穎.牛黃及其偽品的鑒別[J].中國健康文摘．臨床醫(yī)師,2008,5(7):319.

[2]王梅,范亞剛.RP-HPLC 梯度法測定血塞通滴丸中三七皂苷R1、人參皂苷Rb1及人參皂苷Rg1的含量[J].中成藥,2002,24(9):6811.

[3]孫岳,李景鵬,金元昌,等.南、北五味子ISSR鑒別研究[J].中醫(yī)藥學(xué)報,2003,31(1):29.

[4]常璇,胡奇林.用聚類分析方法對寧夏中寧縣和平羅縣枸杞中6種元素綜合指標(biāo)的比較研究[J].寧夏大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2006,27(3):248.

[5]張桂芝.肉桂的紫外光譜鑒定研究[J].時珍國醫(yī)國藥，2005,16(10):951-953.

[6]石蕓,談獻(xiàn)和,池玉梅等.黃蜀葵花紅外指紋圖譜研究田[J].中國野生植物資源,2012,31(2):29-32.

[7]董瑋瑋.名貴中藥材鑒定研究[D].上海交通大學(xué),2009．

[8]古今,劉萍．中藥鑒定技術(shù)的新進(jìn)展[J].解放軍藥學(xué)學(xué)報，2002,18(4):223-225．

李哲（1995～）2014級本科中藥學(xué)專業(yè)。

張國青（1993～）2015級中藥學(xué)碩士研究生，研究方向為中藥質(zhì)量控制。

國家科技重大專項“中藥與天然藥物活性物質(zhì)高效分離純化單元技術(shù)平臺”（2010ZX09401-302-5-12）。