□ 周 萌 北京市海淀區(qū)疾病預(yù)防控制中心

高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法在葡萄中的吡效隆和赤霉素測(cè)定中的應(yīng)用

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分析在對(duì)葡萄進(jìn)行 效隆、赤霉素的測(cè)定中，將高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法應(yīng)用所取得的效果，希望能為食品安全的鑒定提供幫助。將樣品體積為4︰1的乙 和濃度為0．5%的甲酸水溶液進(jìn)行混合，混合后對(duì)混合溶劑進(jìn)行提取，通過(guò)SPE小柱進(jìn)行凈化，之后通過(guò)AGILENT SB-C18色譜柱分離，其流速為每分鐘0．3 mL，最后應(yīng)用高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法展開(kāi)檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果顯示：在良好的檢測(cè)條件之下，兩種化合物的檢測(cè)范圍為2．0～100 μg/L，其內(nèi)線性關(guān)系好，（相關(guān)系數(shù)＞0．999）。其中， 效隆檢出限為0．5 μg/L，定量限為2．0 μg/L，回收率為91．9%～95．4%；相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差為4．0%～7．2%；而赤霉素檢出限為0．3 μg/L，定量限為1．0 μg/L，回收率為90．5%～94．3%；相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差為3．1%～7．0%，達(dá)到了檢測(cè)所需的要求。在對(duì)葡萄進(jìn)行 效隆、赤霉素的測(cè)定之中，高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法能夠取得較佳的臨床檢驗(yàn)效果，可應(yīng)用于食品的檢測(cè)中。

葡萄； 效??；高效液相色譜；赤霉素

吡效隆、赤霉素是一種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，最常見(jiàn)于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)之中，使用之后能夠使得果品變得膨大[1]?，F(xiàn)今很多的研究，更加側(cè)重于研究赤霉素、吡效隆的機(jī)理以及使用，但是卻少見(jiàn)吡效隆和赤霉素在果蔬殘留中的相關(guān)檢測(cè)[2]。本文分析在對(duì)葡萄進(jìn)行吡效隆、赤霉素的測(cè)定之中，將高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法應(yīng)用所取得的效果，作出的研究如下。

1 檢驗(yàn)

1.1 儀器設(shè)備以及實(shí)驗(yàn)試劑

本次實(shí)驗(yàn)選用了高分離度快速液相色譜系統(tǒng)（型號(hào)為：AGLIENT RLC1200）、METTLER TOLEDO 公司生產(chǎn)的電子天平、IKA公司生產(chǎn)的渦旋混合器、安捷倫科技公司生產(chǎn)的三重串聯(lián)四極桿質(zhì)譜儀（型號(hào)為：6410B）、內(nèi)切式均漿機(jī)、離心機(jī)、超聲波儀器以及OA公司生產(chǎn)的氮吹儀等設(shè)備。而實(shí)驗(yàn)試劑中，選用了德國(guó)公司生產(chǎn)的濃度超過(guò)98%的吡效隆和赤霉素，乙腈、甲酸、甲酸銨以及甲醇均為美國(guó)天地試劑公司生產(chǎn)的色譜純，費(fèi)羅門(mén)公司生產(chǎn)的SPE小柱，葡萄樣品購(gòu)于農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)。

1.2 配置溶液

取10 mg的吡效隆和赤霉素，吡效隆通過(guò)乙腈進(jìn)行溶解，其定容為100 mL。赤霉素通過(guò)體積為1︰1、濃度為0.1%的甲酸水溶液—乙腈進(jìn)行溶解，其定容為100 mL，標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液為100 mg/L。通過(guò)體積為4︰1、濃度為0.1%的甲酸水溶液—乙腈 進(jìn)行逐級(jí)稀釋，配合成100.0、20.0、10.0、50.0、5.0 μg/L以及2.0 μg/L的混合溶液。

1.3 對(duì)樣品進(jìn)行處理

將100 g葡萄樣品通過(guò)果汁機(jī)進(jìn)行破碎，破碎后取5 g的樣品，將5 g樣品加入5 mL的（體積為4︰1，濃度為0.1%）甲酸水溶液—乙腈之中，進(jìn)行1 min的勻漿，通過(guò)超聲進(jìn)行8 min的提取，之后在10 000 r/min的條件下進(jìn)行5 min的離心，取5 mL的上清液。通過(guò)5 mL的乙腈將SPE小柱進(jìn)行活化，然后在取5 mL濃度為0.1%的甲酸水溶液進(jìn)行平衡。將5 mL的上清液過(guò)SPE小柱，通過(guò)5 mL濃度為0.1%的甲酸水溶液進(jìn)行淋洗之后將其抽干。之后通過(guò)5 mL的乙腈進(jìn)行洗脫，于40 ℃以下的環(huán)境中，通過(guò)N2將洗脫液吹干，將1 mL的初始流動(dòng)相進(jìn)行0.5 min的超聲溶解，最后經(jīng)過(guò)過(guò)濾后等待檢測(cè)。

1.4 條件分析

色譜條件分析：AGILENT SB-C18色譜柱流動(dòng)相A和流動(dòng)相B分別為：濃度為0.5%的甲酸水溶液和甲醇。臺(tái)階體度的進(jìn)行洗脫，0～2 min，20%B；3～6 min，90%B。每分鐘0.3 mL的流速，40 ℃的柱溫以及5 μL的進(jìn)樣量。

質(zhì)譜條件分析：在MRM模式之下通過(guò)ESI源，4 000 V的毛細(xì)管電壓，350 ℃的干燥氣溫度，10 L/min的干燥氣流量，275.9 KPa的霧化壓力。

2 結(jié)果

檢測(cè)結(jié)果顯示：在良好的檢測(cè)條件之下，兩種化合物的檢測(cè)范圍為2.0～100 μg/L，其內(nèi)線性關(guān)系好，（相關(guān)系數(shù)>0.999）。其中，吡效隆檢出限為0.5 μg/L，定量限為2.0 μg/L，回收率為91.9%～95.4%；相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差為4.0%～7.2%；而赤霉素檢出限為0.3 μg/L，定量限為1.0 μg/L，回收率為90.5%～94.3%；相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差為3.1%～7.0%，達(dá)到了檢測(cè)所需的要求。

3 結(jié)論

高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法能夠在赤霉素以及吡效隆的檢測(cè)之中，能夠取得較佳的臨床檢驗(yàn)效果。不僅能夠檢測(cè)出其殘留量并進(jìn)行色譜條件和質(zhì)譜條件的優(yōu)化，還具有檢出限低、具有快速、定性等特征，能夠滿足實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的需求[3]。在本次檢測(cè)結(jié)果中，吡效隆檢出限為0.5 μg/L，定量限為2.0 μg/L，回收率為91.9%～95.4%；相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差為4.0%～7.2%；而赤霉素檢出限為0.3 μg/L，定量限為1.0 μg/L，回收率為90.5%～94.3%；相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差為3.1%～7.0%，達(dá)到了檢測(cè)所需的要求。言之，在對(duì)葡萄進(jìn)行吡效隆、赤霉素的測(cè)定中，高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法能夠取得較佳的臨床檢驗(yàn)效果。

[1]梁志剛．QuEChERS-高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法快速測(cè)定蘋(píng)果中赤霉素的殘留量[J]．現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2016，10(8)：265-266．

[2]胡秀卿，朱亞紅，張昌朋，等．超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分析 氧菌在葡萄果實(shí)和園地土壤中的消解動(dòng)態(tài)[J]．果樹(shù)學(xué)報(bào)，2016，13(05)：624-628．

[3]蔣黎艷，趙其陽(yáng)，龔蕾，等．超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法快速檢測(cè)柑中的5種鏈格 霉毒素[J]．分析化學(xué)，2015，27(12)：1851-1858．