孫 亮，薛利剛，孫考仲，許 堯，常 帥，于欽磊，穆國(guó)冬，阮書(shū)祥，付殿國(guó)，牛淑玲

（1. 吉林省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，吉林長(zhǎng)春 130062；2. 長(zhǎng)春科技學(xué)院，吉林雙陽(yáng) 130600；3. 永吉縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，吉林永吉 132100）

父母代種雞場(chǎng)禽白血病A/B亞群血清流行病學(xué)調(diào)查

孫 亮1，薛利剛2，孫考仲3，許 堯1，常 帥1，于欽磊1，穆國(guó)冬1，阮書(shū)祥1，付殿國(guó)1，牛淑玲2

（1. 吉林省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，吉林長(zhǎng)春 130062；2. 長(zhǎng)春科技學(xué)院，吉林雙陽(yáng) 130600；3. 永吉縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，吉林永吉 132100）

[目的]了解吉林省父母代種雞場(chǎng)禽白血病A/B亞群感染狀況，為種禽凈化提供依據(jù)。[方法]采取問(wèn)卷調(diào)查和血清學(xué)調(diào)查方法，對(duì)吉林省5個(gè)地區(qū)的父母代種雞場(chǎng)進(jìn)行禽白血病A/B亞群調(diào)查。[結(jié)果]問(wèn)卷調(diào)查顯示50%的雞場(chǎng)基礎(chǔ)設(shè)施不完善，20%的雞場(chǎng)曾監(jiān)測(cè)過(guò)禽白血病。血清學(xué)調(diào)查共檢測(cè)樣品900份，檢出陽(yáng)性樣品60份，個(gè)體真實(shí)流行率為6.72%（95%CI：5.08%～8.36%）。[結(jié)論]該5個(gè)地區(qū)均有禽白血病流行；科學(xué)的飼養(yǎng)管理方式和良好的環(huán)境衛(wèi)生，對(duì)疫病凈化起關(guān)鍵性作用。

父母代種雞場(chǎng)；禽白血??；血清學(xué)；調(diào)查

2012年，國(guó)務(wù)院發(fā)布了新中國(guó)成立以來(lái)動(dòng)物疫病防控領(lǐng)域第一個(gè)具有綱領(lǐng)性、指導(dǎo)性意義的文件，即《國(guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2012—2020年）》（以下簡(jiǎn)稱(chēng)《規(guī)劃》）?！兑?guī)劃》規(guī)定了我國(guó)現(xiàn)階段優(yōu)先控制的動(dòng)物疫病種類(lèi)，并提出了實(shí)施種畜禽疫病凈化計(jì)劃[1]，其中將禽白血病列為種禽場(chǎng)重點(diǎn)凈化的病種之一。

為了解吉林省父母代種雞場(chǎng)禽白血病的流行狀況、養(yǎng)殖場(chǎng)飼養(yǎng)管理方式、生物安全措施制定實(shí)施等情況，提出適合吉林省父母代種雞場(chǎng)禽白血病凈化的綜合措施，結(jié)合吉林省現(xiàn)代家禽產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項(xiàng)目，2016年5—6月，在吉林省的5個(gè)市（州）開(kāi)展了種雞禽白血病A/B亞群血清流行病學(xué)調(diào)查。

1 材料與方法

1.1 調(diào)查區(qū)域

根據(jù)吉林省家禽養(yǎng)殖分布特點(diǎn)，將吉林省中部養(yǎng)殖密集區(qū)的A地區(qū)、B地區(qū)和C地區(qū)，東部生態(tài)優(yōu)勢(shì)養(yǎng)殖區(qū)的D地區(qū)，西部半農(nóng)半牧區(qū)的E地區(qū)，共5個(gè)地區(qū)100個(gè)父母代種雞場(chǎng)作為目標(biāo)群（存欄量均超過(guò)10 000只）。按估計(jì)流行率的方法，以95%的置信水平（CL），90%的預(yù)期群流行率（p）和9%的可接受誤差（e），按計(jì)算公式計(jì)算抽取的調(diào)查場(chǎng)數(shù)量[2]。因群體數(shù)量較小，通過(guò)校正公式確定抽取的種雞場(chǎng)數(shù)量為30個(gè)。

1.2 調(diào)查方式

1.2.1 問(wèn)卷調(diào)查。對(duì)5個(gè)地區(qū)30個(gè)被調(diào)查場(chǎng)進(jìn)行問(wèn)卷調(diào)查，了解其基礎(chǔ)設(shè)施建設(shè)情況、防疫管理水平、種禽來(lái)源、禽白血病監(jiān)測(cè)情況。

1.2.2 血清學(xué)調(diào)查。對(duì)5個(gè)地區(qū)30個(gè)被調(diào)查場(chǎng)進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查，采集全血制備血清樣品，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。按95%CL、2%可接受絕對(duì)誤差，設(shè)定個(gè)體流行率為5%，以估計(jì)流行率的樣本量計(jì)算方法[2]，確定需要隨機(jī)采集樣品總量為456份，每場(chǎng)隨機(jī)采集樣品量為15份（實(shí)際樣品采集數(shù)量為30份/場(chǎng)），進(jìn)行禽白血病A/B抗體檢測(cè)。現(xiàn)場(chǎng)抽樣時(shí)以120日齡左右雞群為抽樣對(duì)象。

1.2.2.1 主要儀器和試劑。全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀（品牌：Thermo，型號(hào)：MultiskanGo）；禽白血病抗體檢測(cè)試劑盒（品牌：IDEXX，批號(hào)：99-09257、99-09258）。

1.2.2.2 檢測(cè)方法。按照《禽白血病診斷技術(shù)》（GB/T 26436—2010）中規(guī)定的ELISA方法進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 個(gè)體流行率估計(jì)

個(gè)體表觀流行率（AP）為試驗(yàn)檢測(cè)陽(yáng)性樣品數(shù)量占抽樣檢測(cè)樣品總數(shù)的比例。個(gè)體真實(shí)流行率（TP）的計(jì)算公式為[2]：

其中Se為試驗(yàn)的敏感性，Sp為試驗(yàn)的特異性。個(gè)體流行率的95%置信區(qū)間（CI），按照孫向東等[3]編寫(xiě)的《獸醫(yī)流行病學(xué)調(diào)查與檢測(cè)：抽樣技術(shù)》中提供的公式計(jì)算：

其中，P為平均陽(yáng)性率，n為樣本量，Z為標(biāo)準(zhǔn)正太分布中概率為0.05所對(duì)應(yīng)的值。

2 結(jié)果

2.1 問(wèn)卷調(diào)查情況

調(diào)查顯示：1/2被調(diào)查場(chǎng)基礎(chǔ)設(shè)施需要更新或進(jìn)一步完善，2/3被調(diào)查場(chǎng)的種禽為自繁自養(yǎng)，其余場(chǎng)為“自繁+引進(jìn)”；所有實(shí)施過(guò)種禽引進(jìn)場(chǎng)的陽(yáng)性率均高于未引進(jìn)場(chǎng)的陽(yáng)性率；1/5被調(diào)查場(chǎng)實(shí)施過(guò)禽白血病監(jiān)測(cè)，實(shí)施檢測(cè)單位以中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)、吉林德大檢測(cè)中心和獸藥經(jīng)營(yíng)企業(yè)為主；所有被調(diào)查場(chǎng)的防疫管理水平基本達(dá)標(biāo)，均制定了科學(xué)的防疫管理措施并有效實(shí)施，能定期開(kāi)展消毒滅源；A1、A3、A5、B4、B5、C4、C5、D4、E2、E4等10個(gè)被調(diào)查場(chǎng)的基礎(chǔ)設(shè)施配備較其他被調(diào)查場(chǎng)差，種禽來(lái)源相對(duì)復(fù)雜，對(duì)禽白血病的了解認(rèn)知度較低。各場(chǎng)具體問(wèn)卷調(diào)查結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2 禽白血病A/B抗體檢測(cè)結(jié)果

2.2.1 禽白血病A/B亞群抗體檢測(cè)和流行率估計(jì)。5個(gè)市（州）的父母代種雞場(chǎng)禽白血病A/B亞群抗體檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。E4場(chǎng)檢測(cè)出陽(yáng)性樣品相對(duì)較多，陽(yáng)性率高達(dá)13.33%。D2場(chǎng)未檢出陽(yáng)性樣品。30個(gè)被調(diào)查場(chǎng)中有29個(gè)流行或曾感染過(guò)禽白血病病原。采集制備的900份雞血清樣品中，共檢出陽(yáng)性樣品60份，個(gè)體表觀流行率為6.67%。A、B、C、D、E等5個(gè)地區(qū)禽白血病陽(yáng)性率分別為8.67%、6.67%、7.33%、4.67%和8.00%，具體結(jié)果見(jiàn)表2。根據(jù)禽白血病ELISA抗體檢測(cè)試劑盒（A/ B抗體）的敏感性和特異性（敏感性99.2%、特異性100%，數(shù)據(jù)由愛(ài)德士公司中國(guó)代理商提供），計(jì)算得出5個(gè)市（州）個(gè)體真實(shí)流行率為6.72%（95%CI：5.08%～8.36%）。2.2.2 不同日齡雞群檢測(cè)情況。60～120日齡的個(gè)體陽(yáng)性率為6.62%；120～180日齡的個(gè)體陽(yáng)性率為7.22%；180日齡以上雞群個(gè)體陽(yáng)性率為4.93%。具體結(jié)果見(jiàn)表3。

表1 吉林省5個(gè)市（州）的父母代種雞場(chǎng)禽白血病問(wèn)卷調(diào)查和A/B亞群抗體陽(yáng)性率調(diào)查結(jié)果

表2 吉林省5個(gè)市（州）禽白血病A/B亞群個(gè)體抗體陽(yáng)性率調(diào)查結(jié)果

表3 不同日齡雞群禽白血病A/B亞群抗體檢測(cè)結(jié)果

3 討論

本次調(diào)查主要針對(duì)吉林省5個(gè)市（州）的30個(gè)父母代種雞場(chǎng)。從5個(gè)地區(qū)禽白血病陽(yáng)性樣品數(shù)量比較發(fā)現(xiàn)D地區(qū)陽(yáng)性樣品數(shù)量最多。綜合分析樣品采集總量，A地區(qū)陽(yáng)性樣品數(shù)量最多，且A地區(qū)流行率也最高，這可能與該地區(qū)的養(yǎng)殖密度大、飼養(yǎng)環(huán)境及相關(guān)配套基礎(chǔ)設(shè)施相對(duì)較差有一定的關(guān)系。D地區(qū)流行率最低，各場(chǎng)流行率也相對(duì)較低，這可能與D地區(qū)獨(dú)特的生態(tài)養(yǎng)殖方式有關(guān)。D2場(chǎng)未檢出陽(yáng)性樣品，可能存在兩方面原因：一是該場(chǎng)實(shí)施過(guò)禽白血病監(jiān)測(cè)，經(jīng)凈化該場(chǎng)禽白血陽(yáng)性率非常低，但需要進(jìn)一步對(duì)該場(chǎng)進(jìn)行加大抽樣檢測(cè)來(lái)確定；二是在實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定過(guò)程中存在人為判定失誤，但綜合分析實(shí)驗(yàn)人員的業(yè)務(wù)能力和素質(zhì)，此種可能性較小。從不同日齡雞群禽白血病A/B亞群抗體檢測(cè)情況分析，120～180日齡雞群感染率最高，180日齡以上雞群感染率逐漸下降，這與介紹的禽白血病主要感染雞群日齡相一致。

現(xiàn)階段，我國(guó)養(yǎng)雞業(yè)正逐步由“小規(guī)模飼養(yǎng)”向“規(guī)模化養(yǎng)殖”轉(zhuǎn)變，其風(fēng)險(xiǎn)主要是疫病和市場(chǎng)，而疫病幾乎成為主導(dǎo)風(fēng)險(xiǎn)。實(shí)施種雞禽白血病凈化，既能改善種雞場(chǎng)的養(yǎng)殖環(huán)境，提高疫病防控條件和管理水平，又能提高種雞群質(zhì)量，從源頭上切斷病原傳播，同時(shí)，也是現(xiàn)階段種雞場(chǎng)實(shí)施疫病防控的需求。從源頭上根除疾病，就必須建立凈化的防疫理念，用監(jiān)測(cè)、隔離、淘汰的凈化方式逐漸取代傳統(tǒng)防疫模式，積極探索“健康養(yǎng)殖”的新防疫模式[4]。

4 結(jié)論

本調(diào)查為首次對(duì)吉林省部分地區(qū)父母代種雞場(chǎng)進(jìn)行的禽白血病血清學(xué)調(diào)查。問(wèn)卷調(diào)查結(jié)果表明 ：科學(xué)化、規(guī)范化、程序化的飼養(yǎng)管理方式，獨(dú)特的地理環(huán)境，優(yōu)越的養(yǎng)殖環(huán)境，以及高標(biāo)準(zhǔn)的設(shè)施設(shè)備配備，對(duì)疫病凈化和控制起關(guān)鍵性作用。經(jīng)調(diào)查發(fā)現(xiàn)30個(gè)父母代種雞場(chǎng)（除D2場(chǎng)）均流行或感染過(guò)禽白血病病原，表明禽白血病在被調(diào)查的種雞場(chǎng)中流行范圍較廣，防控形勢(shì)較為嚴(yán)峻。

[1]國(guó)務(wù)院辦公廳. 關(guān)于印發(fā)國(guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2012—2020年）的通知：國(guó)辦發(fā)〔2012〕31號(hào)[A]. 北京：國(guó)務(wù)院辦公廳，2012-05-20.

[2]沈朝建，王幼明. 獸醫(yī)流行病學(xué)調(diào)查與監(jiān)測(cè)抽樣技術(shù)手冊(cè)[M]. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2013.

[3]孫向東，劉擁軍，王幼明. 獸醫(yī)流行病學(xué)調(diào)查與監(jiān)測(cè)：抽樣技術(shù)[M]. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2011.

[4]林漢亮，張?zhí)焓? 對(duì)種畜禽場(chǎng)動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)與凈化的思考[J]. 新疆畜牧業(yè)，2014，（10）：42-43.

（責(zé)任編輯：朱迪國(guó)）

Sero-epidemiological Survey on A/B Sub-group Avian Leukemia in Breeding Chicken Farms of Parent Generation

Sun Liang1，Xue Ligang2，Sun Kaozhong3，Xu Yao1，Chang Shuai1，Yu Qinlei1，Mu Guodong1， Ruan Shuxiang1，F(xiàn)u Dianguo1，Niu Shuling2
（1. Jilin Animal Disease Prevention and Control Center，Changchun，Jilin 130062；2. Changchun Sci-Tech University，Shuangyang，Jilin 130600；3. Yongji Animal Disease Prevention and Control Center，Yongji，Jilin 132100）

[Objective]In order to recognize the infection status of the A/B sub-group avian leukemia （A/B-AL）in breeding chicken farms of parent generation in Jilin province，so as to provide references for the purification of breeding poultry.[Methods]By the methods of questionnaire and serological survey，an investigation on A/B-AL was conducted in breeding chicken farms of parent generation in 5 regions of Jilin.[Results]The results showed that the infrastructures in half of the farms were imperfect. Among all the investigated farms，1/5 of them had conducted surveillance for avian leukemia. A total of 900 samples were conducted detection and 60 positive samples were found，with a true individual prevalence rate of 6.72%（95%CI：5.08%～8.36%）. [Conclusion]The avian leukemia was prevalent in all of the 5 regions in Jilin. Scientifc feeding management and proper sanitation play a critical role in the purifcation of the disease.

breeding chicken farms of parent generation；avian leukemia；serology；survey

book=32,ebook=38

S851.3

A

1005-944X（2017）01-0032-04

10.3969/j.issn.1005～944X.2017.01.009

吉林省現(xiàn)代家禽產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項(xiàng)目（201639）

牛淑玲、付殿國(guó)