■張金龍 張 寧 楊 雪 韓進誠 張進良 張憲磊 劉傳輝

（1.河南農(nóng)業(yè)大學牧醫(yī)工程學院，河南鄭州 450002；2.商丘師范學院生物與食品學院，河南商丘 476000；3.河南世紀天緣生態(tài)科技有限公司，河南登封 452470；4.商丘市畜產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測檢驗中心，河南商丘 476000）

桑葉含有多種天然活性物質(zhì)[1]，而且具有產(chǎn)量高、生產(chǎn)成本低、營養(yǎng)價值高、適口性好等優(yōu)點[2]，桑葉作為一種飼料添加劑已經(jīng)在畜禽養(yǎng)殖行業(yè)中取得一定的效果。研究表明，添加一定量的桑葉粉能夠提高畜禽生長性能[3]，改善畜禽產(chǎn)品的品質(zhì)[4-5]和風味[6]。

新鮮桑葉含水量高，不易保存，很容易發(fā)霉變質(zhì)，因此，生產(chǎn)中很少飼用新鮮桑葉粉。經(jīng)人工發(fā)酵，桑葉粉口感得以改善，可添加到動物飼料中。黃靜等[7]研究表明，發(fā)酵桑葉粉對肉雞生長性能的影響較普通桑葉粉有所改善。吳配全等[8]研究表明，在基礎日糧中添加少量的發(fā)酵桑葉粉可顯著降低飼料成本。李瑞雪等[9]及吳萍等[10]研究表明，桑葉作為一種植物蛋白飼料在家禽飼糧中的添加比例不宜超過4%。范京輝等[11]研究發(fā)現(xiàn)，添加5%以上的桑葉粉明顯降低AA肉雞的生長性能。但目前關于發(fā)酵桑葉粉對肉雞腸道發(fā)育的影響研究較少。因此本試驗，結(jié)合前人研究結(jié)果，以羅斯308肉雞母雛為試驗動物，研究飼糧中添加2%的發(fā)酵桑葉粉對其生長性能、內(nèi)臟器官及腸道發(fā)育的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗動物與設計

將1日齡健康的120只羅斯308肉雞母雛隨機分為2個處理，每處理6個重復，每個重復10只雞。試驗期為1～42日齡，試驗肉雞籠養(yǎng)，1～14日齡在雛雞籠飼養(yǎng)（70 cm×70 cm×30 cm），15～42日齡在育成籠飼養(yǎng)（200 cm×50 cm×35 cm）。飼喂粉狀配合飼料，自由采食，充足飲水，按常規(guī)免疫程序進行免疫接種。

1.2 試驗日糧

試驗采用的基礎飼糧營養(yǎng)水平參考NRC（1994）和《雞飼養(yǎng)標準》（NY/T 33—2004）中肉雞營養(yǎng)需要推薦值。對照組飼喂基礎飼糧，試驗組飼喂基礎飼糧加2%的發(fā)酵桑葉粉?；A飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。發(fā)酵桑葉粉由河南世紀天緣生態(tài)科技有限公司提供。

表1 基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平（風干基礎）

1.3 樣品收集與分析

1.3.1 生長性能測定

肉雞分別在1、21日齡及42日齡時空腹以重復為單位稱重，記錄每重復的總重，計算平均體重。死亡雞只稱重并扣除采食量。統(tǒng)計試驗期間采食量，計算體增重、采食量及料重比。

1.3.2 血清生化指標及屠宰性能測定

在21、42日齡時，每重復選取1只與該重復平均體重接近的肉雞進行屠宰，翅靜脈采血5 ml，4℃、3 000 r/min離心10 min制備血清，血清冷凍保存(-20℃)。用島津CL-8000全自動生化分析儀測定總膽固醇等血清生化指標。取肌肉(胸肌、腿肌)和內(nèi)臟(心臟、肝臟、腎臟、脾臟)組織稱重并記錄。肌肉及內(nèi)臟組織用相對重量，以其絕對重量與肉雞活體重百分比表示。

1.3.3 石蠟切片的制備

在21、42日齡時，每重復選取1只與該重復平均體重接近的肉雞進行屠宰，分別在三段小腸（十二指腸、空腸、回腸）的中間部位各取2 cm的樣品，將采集的樣品放入裝有中性甲醛的125 ml廣口瓶中記錄并保存。用石蠟將樣品進行固定，切片，HE染色，然后將染色并封存好的切片在尼康SMZ18體顯微鏡40×下觀察，進行圖像采集，每張組織切片中取10根伸展良好的絨毛，然后用NIS Elements Imaging software分別對十二指腸、空腸和回腸的絨毛高度、隱窩深度進行測量，并計算絨毛高度/隱窩深度的比例，其中絨毛高度是以腸絨毛基部到頂端的長度，腺窩深度是腸絨毛基部的上皮下陷至固有層內(nèi)形成的管狀結(jié)構(gòu)。

1.4 統(tǒng)計分析

以每重復為試驗單元，用SAS 9.2數(shù)據(jù)統(tǒng)計軟件對試驗數(shù)據(jù)進行t檢驗分析，P＜0.05為差異顯著。結(jié)果均以“平均值±標準誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧發(fā)酵桑葉粉對肉雞生長性能及屠宰性能的影響（見表2）

表2 飼糧發(fā)酵桑葉粉對肉雞生長性能及屠宰性能的影響

由表2可知，基礎飼糧中添加2%的發(fā)酵桑葉粉能顯著提高1～21日齡及1～42日齡肉雞體增重、采食量（P＜0.05），但對料重比無顯著影響（P＞0.05）?；A飼糧中添加2%發(fā)酵桑葉粉能顯著提高42日齡肉雞腿肌率（P＜0.05），但對21日齡時肉雞腿肌率、胸肌率及42日齡時胸肌率無顯著影響（P＞0.05）。

2.2 飼糧發(fā)酵桑葉粉對肉雞內(nèi)臟器官指數(shù)及血清生化指標的影響（見表3～表4）

表3 飼糧發(fā)酵桑葉粉對肉雞內(nèi)臟器官的相對重量的影響(%)

表4 飼糧發(fā)酵桑葉粉對肉雞血清生化指標的影響

由表3可知，基礎飼糧中添加2%的發(fā)酵桑葉粉對21日齡肉雞心臟、肝臟、腎臟的相對重量及脾臟的相對重量無顯著影響（P＞0.05）；顯著降低42日齡肉雞心臟、肝臟的相對重量及腎臟的相對重量（P＜0.05），但對脾臟的相對重量無顯著影響（P＞0.05）。

由表4可知，基礎飼糧中添加2%發(fā)酵桑葉粉顯著降低21日齡肉雞總膽固醇含量（P＜0.05）；42日齡時，基礎飼糧中添加2%發(fā)酵桑葉粉組，肉雞血清中白蛋白含量顯著降低（P＜0.05），其余血清生化指標差異不顯著。

2.3 飼糧發(fā)酵桑葉粉對肉雞消化器官相對重量及腸道組織結(jié)構(gòu)的影響（見表5～表8）

由表5可知，基礎飼糧中添加2%的發(fā)酵桑葉粉對21和42日齡肉雞小腸、腺胃及胰腺相對重量無顯著影響（P＞0.05）。但基礎飼糧中添加2%的發(fā)酵桑葉粉顯著提升42日齡肉雞十二指腸長度（P＜0.05）。

表5 飼糧發(fā)酵桑葉粉對消化器官相對重量及小腸長度的影響

表6 飼糧發(fā)酵桑葉粉對十二指腸形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

表7 飼糧發(fā)酵桑葉粉對空腸形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

表8 飼糧發(fā)酵桑葉粉對回腸形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

由表6、表7、表8可知，基礎飼糧中添加2%的發(fā)酵桑葉粉能顯著提高21日齡肉雞空腸及42日齡空腸及回腸絨毛高度（P＜0.05）；顯著增加21日齡回腸及42日齡十二指腸、空腸、回腸的隱窩深度（P＜0.05）；顯著降低21日齡回腸絨毛高度與隱窩深度的比值（P＜0.05）。

3 討論

3.1 發(fā)酵桑葉粉對肉雞生長性能及屠宰性能的影響

吳萍等[3]研究結(jié)果顯示，與基礎飼糧組相比，添加2%的桑葉粉組黃羽肉雞2～6周齡日增重得到顯著提升（P＜0.05），并達到試驗組的最大值；其中腿肌率及胸肌率各組間均無顯著差異（P＞0.05）。蘭翠英等[12]研究表明，隨著飼糧中桑葉粉添加量的增加肉雞平均日采食量也逐漸增加，試驗組與對照組相比差異顯著（P＜0.05）；但各組間胸肌率無顯著差異（P＞0.05）。李瑞雪等[9]研究表明，在基礎飼糧中添加桑葉粉，對皖西白鵝的腿肌率及胸肌率均無顯著差異（P＞0.05）。鄺哲師等[13]發(fā)現(xiàn)，基礎飼糧中添加桑葉粉對胡須雞的胸肌率及腿肌率無顯著影響（P＞0.05）；但基礎飼糧中添加5%的發(fā)酵桑葉粉后，胡須雞腿肌率顯著降低（P＜0.05），其余各組胸肌率及腿肌率差異不顯著（P＞0.05）。本次試驗結(jié)果顯示：基礎飼糧中添加2%的發(fā)酵桑葉粉能顯著提高肉雞體增重及采食量（P＜0.05）；除42日齡肉雞腿肌率之外，對胸肌率及腿肌率無顯著影響（P＞0.05）。試驗結(jié)果與上述報道相近。

3.2 發(fā)酵桑葉粉對肉雞內(nèi)臟器官指數(shù)及血液生化指標的影響

心臟、肝臟、腎臟作為動物機體重要的內(nèi)臟器官，主要參與機體營養(yǎng)物質(zhì)代謝，其絕對重量及相對重量能夠反映動物機體的健康狀況。脾臟是禽類主要的免疫器官之一，相對重量是衡量動物機體免疫狀況的重要指標。本試驗結(jié)果表明，在基礎飼糧中添加2%的發(fā)酵桑葉粉，42日齡時肉雞心臟、肝臟的相對重量及腎臟的相對重量顯著下降（P＜0.05），但對脾臟的相對重量無顯著影響（P＞0.05）。關于桑葉粉對家禽內(nèi)臟器官發(fā)育的影響報道較少。王永昌[14]研究表明，隨著桑葉粉添加量的遞增，鵝的心臟、肝臟的絕對重量有降低趨勢，但其相對重量有增加趨勢。李瑞雪等[9]也報道，基礎飼糧中添加桑葉粉能使皖西白鵝肝臟的相對重量顯著增加（P＜0.05）。與本試驗結(jié)果有一定差異，這可能與本試驗添加2%的發(fā)酵桑葉粉使肉雞體增重顯著增加有關。李國華等[15]也研究表明，動物臟器相對重量與動物體重呈負相關。

血清生化指標是衡量動物機體健康狀況、氧化代謝、生理機能等的重要指標?？偟鞍缀桶椎鞍缀靠梢苑从吵鰟游餀C體蛋白質(zhì)的吸收和代謝情況[7]。本試驗研究結(jié)果顯示，添加2%的發(fā)酵桑葉粉顯著降低42日齡肉雞血清白蛋白含量（P＜0.05）和肝臟的相對重量（P＜0.05），說明發(fā)酵桑葉粉影響肝臟功能?？偰懝檀己透视腿ナ茄褐镜闹匾M成成分，其含量的高低反映脂類的吸收和代謝以及利用情況，其值越低，表明對脂肪的利用率越高[16]。據(jù)報道，桑葉中含有的天然活性物質(zhì)具有降低血糖和膽固醇的作用[17]。本試驗結(jié)果顯示，2%的發(fā)酵桑葉粉顯著降低21日齡肉雞總膽固醇含量（P＜0.05），表明發(fā)酵桑葉粉具有調(diào)節(jié)動物機體脂類代謝的作用。

3.3 發(fā)酵桑葉粉對肉雞消化器官及腸道組織結(jié)構(gòu)的影響

胃腸道是動物獲取營養(yǎng)物質(zhì)主要場所，同時也是營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的重要器官[18]。動物小腸黏膜絨毛高度和隱窩深度都與小腸成熟細胞數(shù)量有密切的關系，絨毛高度越高，表明小腸絨毛上的成熟細胞增多。隱窩深度越淺，成熟細胞的個數(shù)越多，小腸絨毛高度與隱窩深度的比值最能表現(xiàn)腸道消化能力[19]。桑葉粉對肉雞腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)影響的研究報道較少，主要集中在非常規(guī)飼料對家禽消化器官的影響。徐珊珊[20]研究表明，肉雞飼糧中添加適宜的苜蓿草粉對腸道組織發(fā)育有一定程度的影響。本試驗結(jié)果表明，添加2%的發(fā)酵桑葉粉對肉雞小腸、胰腺與腺胃的相對重量無顯著影響（P＞0.05）；但顯著提高了42日齡肉雞十二指腸的長度（P＜0.05）。腸道形態(tài)方面，添加2%的發(fā)酵桑葉粉提升肉雞42日齡空腸及回腸絨毛高度（P＜0.05）；顯著增加肉雞42日齡十二指腸、空腸與回腸的隱窩深度（P＜0.05）；降低21日齡及42日齡肉雞回腸絨毛高度與隱窩深度的比值（P＜0.05）。這與王永昌[14]研究結(jié)果相似，添加桑葉粉的試驗組鵝空腸及回腸絨毛高度與隱窩深度數(shù)值都高于對照組，其中大部分試驗組絨毛高度與隱窩深度略低于對照組。本次試驗結(jié)果表明，添加發(fā)酵桑葉粉促進了肉雞腸道的發(fā)育，改善了腸道的形態(tài)結(jié)構(gòu)。

4 結(jié)論

①基礎飼糧中添加2%的發(fā)酵桑葉粉能夠顯著提高肉雞采食量及體增重，但對料重比無顯著影響。

②基礎飼糧中添加2%的發(fā)酵桑葉粉能夠顯著提升42日齡肉雞十二指腸長度及空腸、回腸絨毛高度，改善腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)，促進營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。