賈小婷 彭 聰 賀智敏 鄭國沛

(廣州醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院，廣東 廣州 510095)

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核因子E2相關(guān)因子2表達(dá)與肺癌發(fā)生發(fā)展關(guān)系的Meta分析

賈小婷 彭 聰 賀智敏 鄭國沛

(廣州醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院，廣東 廣州 510095)

目的 應(yīng)用Meta分析方法評價核因子E2相關(guān)因子2(Nrf2)表達(dá)與肺癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。方法 檢索2014年7月以前收錄在Pubmed、Cochrane 圖書館、中國生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫、中國期刊全文數(shù)據(jù)庫、中文科技期刊數(shù)據(jù)庫、中國學(xué)術(shù)會議論文全文數(shù)據(jù)庫等數(shù)據(jù)庫中的英文和中文文獻(xiàn)，按納入和排除標(biāo)準(zhǔn)對文獻(xiàn)進(jìn)行篩選并提取資料，采用RevMan 5.0軟件進(jìn)行Meta分析。結(jié)果 納入符合要求的國內(nèi)外8篇文獻(xiàn)進(jìn)行后續(xù)研究分析。隨機(jī)效應(yīng)模型Meta分析結(jié)果顯示：Nrf2在肺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達(dá)量高于其在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達(dá)量〔OR=0.50，95%CI(0.26，0.95)，P=0.04〕；同時TNMⅠ+Ⅱ組患者的Nrf2表達(dá)量與Ⅲ+Ⅳ組患者的Nrf2表達(dá)量具有顯著差異〔OR=0.45，95%CI(0.25，0.80)，P=0.006〕；此外還發(fā)現(xiàn)Nrf2表達(dá)與肺癌患者性別、吸煙史、分化程度無關(guān)。結(jié)論 Nrf2與肺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床TNM分期相關(guān)，可作為判斷肺癌生物學(xué)行為的重要參考指標(biāo)。

核因子E2相關(guān)因子2；肺癌

核因子E2相關(guān)因子2(Nrf2)是一種可通過指導(dǎo)細(xì)胞轉(zhuǎn)錄程序從而整合應(yīng)激信號及反應(yīng)的轉(zhuǎn)錄因子〔1〕。研究發(fā)現(xiàn)Nrf2可抑制氧化應(yīng)激或者親電子應(yīng)激且能阻止腫瘤的發(fā)生〔2〕；敲除Nrf2后可增強(qiáng)患癌的風(fēng)險〔3〕；在Nrf2缺失的小鼠中，許多具有抗癌活性的化療藥物活性大大降低乃至完全被抑制〔4〕。因此，Nrf2曾一度被認(rèn)為是一種重要的抑癌基因。但是相反的研究也時有報道：在非小細(xì)胞肺癌中發(fā)現(xiàn)了Nrf2基因突變，該基因突變后依然具有轉(zhuǎn)錄活性，但是無法與KEAP-1蛋白結(jié)合，從而抑制了KEAP-1引發(fā)的泛素化，導(dǎo)致癌癥細(xì)胞增殖〔5〕。類似的研究提出Nrf2是一種原癌基因。由此推斷Nrf2在不同的癌癥類型中的功能不同。本研究擬采用Meta分析評價Nrf2表達(dá)與肺癌發(fā)生發(fā)展的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 文獻(xiàn)檢索 以“l(fā)ung cancer”和“nuclear factor erythroid 2-related factor 2 or Nrf2”為關(guān)鍵詞，檢索Pubmed、Cochrane 圖書館、Medline等數(shù)據(jù)庫發(fā)表的英文文獻(xiàn)；同時以“肺癌”和“核因子E2相關(guān)因子2或nuclear factor erythroid 2-related factor 2或Nrf2”為關(guān)鍵詞，檢索中國生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫、中國期刊全文數(shù)據(jù)庫、中文科技期刊數(shù)據(jù)庫、中國學(xué)術(shù)會議論文全文數(shù)據(jù)庫收錄的中文文獻(xiàn)。檢索時間為2014年7月以前收錄的文獻(xiàn)，為避免漏檢，對檢索到的文獻(xiàn)中的參考文獻(xiàn)進(jìn)行二次檢索。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①研究對象為人，不分種族、國籍、年齡及性別，選取病例資料較為完整者；②研究Nrf2的表達(dá)與腫瘤治療后存活率與復(fù)發(fā)率的關(guān)系；③免疫組化檢測Nrf2的表達(dá)，且有明確的判定標(biāo)準(zhǔn)(每個視野觀察100個細(xì)胞，以超過10%的細(xì)胞染色為陽性結(jié)果)。同時剔除數(shù)據(jù)不完整的研究，對于重復(fù)發(fā)表重復(fù)收錄或資料雷同的研究只保留其中質(zhì)量最好者。

1.3 資料提取 根據(jù)文獻(xiàn)納入及排除標(biāo)準(zhǔn)，設(shè)計資料提取表，并由兩位研究者提取資料：一位研究者提取和錄入資料，另一位研究者核對資料，如遇意見不一致，由第三研究者判斷。提取的資料內(nèi)容主要包括：題目、作者、發(fā)表年代和文獻(xiàn)來源、納入病例的一般情況、肺癌及其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、組織學(xué)分級及肌層浸潤程度等。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 使用RevMan5.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行Meta分析，χ2檢驗(yàn)。發(fā)表偏倚通過繪制漏斗圖進(jìn)行評價，漏斗圖不對稱或不完整則提示可能存在發(fā)表偏倚。

2 結(jié) 果

2.1 文獻(xiàn)檢索結(jié)果 根據(jù)上述的檢索方法初步檢索到文獻(xiàn)583篇，其中英文文獻(xiàn)167篇，中文文獻(xiàn)416篇。閱讀全文后，依據(jù)文獻(xiàn)刪除標(biāo)準(zhǔn)共剔除575篇文章，最終納入文獻(xiàn)8篇〔6～13〕，其中英文6篇，中文2篇。見表1。

2.2 Nrf2表達(dá)與患者性別的關(guān)系 共有6個研究〔6～9,11,13〕報告了Nrf2表達(dá)與患者性別的關(guān)系，其中男性患者222例，女性患者133例。隨機(jī)效應(yīng)模型Meta分析結(jié)果顯示：Nrf2在男性患者和女性患者中的陽性率無明顯差異〔OR=1.30，95%CI(0.49，3.47)，P=0.60〕。見圖1。

2.3 Nrf2表達(dá)與患者吸煙史的關(guān)系 共有4個研究〔6，7，9，13〕報告了Nrf2表達(dá)與患者吸煙史的關(guān)系，其中吸煙患者150例，無吸煙史患者96例。固定效應(yīng)模型Meta分析結(jié)果顯示：兩組間Nrf2的表達(dá)量無顯著性差異〔OR=1.18，95%CI(0.43，3.23)，P=0.73〕。見圖2。

2.4 Nrf2表達(dá)與肺癌臨床TNM分期的關(guān)系 共有5個研究〔6～10〕報告了Nrf2表達(dá)與肺癌患者臨床TNM分期的關(guān)系，其中TNMⅠ+Ⅱ共有患者236例，Ⅲ+Ⅳ期患者96例。固定效應(yīng)模型Meta分析結(jié)果顯示：TNMⅠ+Ⅱ組患者的Nrf2表達(dá)量與Ⅲ+Ⅳ組患者的Nrf2表達(dá)量具有顯著性差異〔OR=0.45，95%CI(0.25，0.80)，P=0.006〕。見圖3。

2.5 Nrf2表達(dá)與肺癌分化程度的關(guān)系 共有5個研究〔6～9，13〕報告了Nrf2在不同分化程度的肺癌患者中的表達(dá)量，其中G1+G2組共有患者180例，G3組患者154例。固定效應(yīng)模型Meta分析結(jié)果顯示：不同分化程度的患者體內(nèi)Nrf2表達(dá)量無顯著性差異〔OR=1.14，95%CI(0.71，1.81)，P=0.59〕。見圖4。

2.6 Nrf2表達(dá)與肺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否的關(guān)系 共有2個研究〔6，8〕報告了Nrf2在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否的肺癌患者中的表達(dá)量，其中淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組患者95例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組患者81例。固定效應(yīng)模型Meta分析結(jié)果顯示：Nrf2在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達(dá)量高于在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達(dá)量，且具有顯著性差異〔OR=0.50，95%CI(0.26，0.95)，P=0.04〕。見圖5。

2.7 敏感性分析 采用固定效應(yīng)模型重新評估Nrf2表達(dá)與患者性別(P=0.24)的相關(guān)性，采用隨機(jī)效應(yīng)模型重新評估Nrf2表達(dá)與患者吸煙史(P=0.77)、臨床TNM分期(P=0.008)、組織學(xué)分化(P=0.65)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.07)的相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Nrf2表達(dá)與患者吸煙史、臨床TNM分期、組織學(xué)分化及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性在兩種模型評估下的結(jié)果一致，說明敏感性較低。在評價Nrf2表達(dá)與患者性別相關(guān)性時，應(yīng)用固定效應(yīng)模型發(fā)現(xiàn)兩者具有相關(guān)性(P=0.24)，而用隨機(jī)效應(yīng)模型發(fā)現(xiàn)兩者無相關(guān)性(P=0.6)，說明Nrf2表達(dá)與患者性別的相關(guān)性分析的敏感性較高。在隨機(jī)效應(yīng)模型去掉文獻(xiàn)〔9〕，得到Nrf2表達(dá)與患者性別之間具有相關(guān)性(P=0.16)，但是由于文獻(xiàn)〔9〕質(zhì)量較高，因此Meta分析的結(jié)果以隨機(jī)效應(yīng)模型結(jié)果為準(zhǔn)。

2.8 發(fā)表偏倚 對報道Nrf2在不同分化程度的肺癌患者中的表達(dá)量的5個研究〔6～9，13〕進(jìn)行漏斗圖分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)存在一定的發(fā)表偏倚。見圖6。

表1 納入研究的基本特征

圖1 肺癌男性患者和女性患者中Nrf2表達(dá)量比較的Meta分析

圖2 有無吸煙史的肺癌患者體內(nèi)Nrf2表達(dá)量的Meta分析

圖3 不同TNM分期的肺癌患者中Nrf2表達(dá)量比較的Meta分析

圖4 不同分化程度的肺癌患者組間Nrf2表達(dá)量比較的Meta分析

圖5 淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否的肺癌患者組間Nrf2表達(dá)量比較的Meta分析

圖6 不同分化程度的肺癌患者組間Nrf2表達(dá)量比較的漏斗圖

3 討 論

肺癌是我國發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤，了解肺癌的發(fā)病網(wǎng)絡(luò)機(jī)制，有利于肺癌治療療效和患者生活質(zhì)量的提高。有跡象表明Nrf2在肺癌的發(fā)生發(fā)展中具有一定的作用。Nrf2能夠結(jié)合到轉(zhuǎn)移抑制基因P66shc啟動子上，從而上調(diào)該基因的表達(dá)，且P66shc反過來抑制Nrf2的表達(dá)。在肺癌組織中發(fā)現(xiàn)Nrf2高表達(dá)而P66shc低表達(dá)，從而促進(jìn)細(xì)胞增殖和腫瘤進(jìn)展〔14〕。胡婷華等〔6〕發(fā)現(xiàn)Nrf2在非小細(xì)胞肺癌中的高表達(dá)與腫瘤的TNM分期(P=0.028)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.038)相關(guān)。Wang等〔15〕報道在96例肝癌患者中Nrf2的表達(dá)與肝癌組織分化程度有關(guān)(P=0.034)。而我們的Meta分析結(jié)果顯示：Nrf2在肺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達(dá)量高于其在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達(dá)量，TNMⅠ+Ⅱ組患者的Nrf2表達(dá)量與Ⅲ+Ⅳ組患者具有顯著差異；同時發(fā)現(xiàn)Nrf2表達(dá)與肺癌患者性別、吸煙史、分化程度無關(guān)。漏斗圖提示Meta分析存在發(fā)表偏倚，這可能是由于納入研究較少，且標(biāo)本量較少。在后期的研究中，應(yīng)盡量收集發(fā)表或未發(fā)表的數(shù)據(jù)，擴(kuò)大標(biāo)本量，降低Meta分析敏感性及發(fā)表偏倚，力求得到可靠的結(jié)論。

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〔2015-05-11修回〕

(編輯 苑云杰/曹夢園)

廣州醫(yī)科大學(xué)校級青年基金(No.2012A13)

鄭國沛(1983-)，男，博士，副研究員，主要從事腫瘤學(xué)研究。

賈小婷(1985-)，女，碩士，實(shí)驗(yàn)師，主要從事腫瘤學(xué)研究。

R734.2

A

1005-9202(2016)22-5637-04；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.22.066