周秋萍

醋柳黃酮含量測定方法研究

周秋萍

目的：建立合理的紫外分光光度法測定醋柳黃酮的含量。醋柳黃酮參考國家藥品標準WS-10001-（HD-1311）-2003進行含量測定，其紫外吸光度為0.04～0.06，中國藥典規(guī)定，含量分析時吸光度應滿足0.3～0.7。方法：調整供試液的濃度為0.04mg/m l，運用比色法在430nm的波長處測定吸光度。結果：線性回歸方程r＞0.99，吸收值為0.4751～0.5194，符合法規(guī)要求。結論：該方法科學合理、準確度高，適用于物料的質量控制。

醋柳黃酮；含量；紫外分光光度法

醋柳黃酮(flavoneshippophae，TFH)為黃色或棕黃色的粉末，其有效成分為槲皮素、異鼠李素[1]等黃酮類成分。醋柳黃酮為提取物，用于心臟病制劑的原料。因具有色原酮的剛性結構而難溶于水，在乙醇、甲醇、乙醚或醋酸乙脂中溶解，TFH易溶于堿性溶液，堿性條件下不穩(wěn)定[2]。目前，醋柳黃酮參考國家藥品標準WS-10001-（HD-1311）-2003進行含量測定。

1　材料與方法

1.1儀器與試劑梅特勒電子天平（廠家：梅特勒-托利多；型號：AB204-S，AB104-S），紫外可見分光光度儀（廠家：島津，型號：UV2401；廠家：安捷倫，型號：Ag?ilent8453）；AR級無水乙醇（廠家：國藥集團化學試劑有限公司，批號：20140301）；AR級三氯化鋁（廠家：國藥集團化學試劑有限公司，批號：20140301）。異鼠李素對照品（廠家：中國藥品生物制品檢定所，批號：111571-201101）。紫外分光檢測條件：λ=430nm。

1.2溶液的制備

1.2.1標準溶液的制備。精密稱取100℃干燥至恒重的異鼠李素適量，加無水乙醇制成每1m l含10μg的溶液。

1.2.2標準曲線的制備。精密量取對照品溶液2.0m l、3.0ml、4.0ml、5.0m l、6.0m l，分別置10ml量瓶中，各加5%三氯化鋁無水乙醇溶液1ml，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘，以相應的試劑為空白，在430nm的波長處測定吸光度，以吸光度為X，濃度為Y，列出回歸方程式。

1.2.3供試品溶液的制備。精密稱取本品醋柳黃酮約0.1g，置100ml量瓶中，加無水乙醇適量，振搖使溶解（必要時微熱），加無水乙醇至100ml，搖勻，精密量取5ml該溶液置25m l量瓶中，用無水乙醇稀釋至25ml，搖勻。

1.2.4測定。各取2.0ml配制好的供試品溶液分別于兩個10m l量瓶，加5%三氯化鋁無水乙醇溶液1ml，用無水乙醇稀釋至10ml，另取未加顯色劑的等量供試品溶液為空白。放置10分鐘，在430nm波長處測吸光度。計算含量，按干燥品計，含總黃酮苷元≥10.0%。線性回歸方程：Y=bX+a

（X：醋柳黃酮供試品溶液的含量）

2　結果

2.1線性關系配制標準曲線溶液，放置10分鐘，按照比色法（中國藥典2000年版二部附錄ⅣB），以相應的試劑為空白，在430nm的波長處測定吸光度，以吸光度為X，濃度為Y，列出回歸方程式[3]。采用3批樣品分別由兩位分析人員進行試驗。

A組線性回歸方程如下，見圖1。

（A-1）y=12.5347x-1.4422r=0.9992

（A-2）y=12.916x-0.731r=0.9984

（A-3）y=12.5347x-1.4422r=0.9992

B組線性回歸方程如下，見圖2。

（B-1）y=12.916x-0.731r=0.9984

（B-2）y=12.5347x-1.4422r=0.9992

（B-3）y=12.916x-0.731r=0.9984

圖1　A組線性回歸

圖2　B組線性回歸

2.2精密度取3個批號樣品，各批號分別精密稱取供試品溶液（3份）。計算含量及其相對平均偏差，要求不大于2.0。見表1。另一名分析員重新制備供試品溶液（相同3個批號樣品），在另一臺紫外分光光度儀上測定，計算此3份樣品含量數據的相對平均偏差，要求不得大于2.0。見表2。根據國家藥品標準WS-10001-（HD-1311）-2003可接受標準：按干燥品計算，總黃酮苷元不得少于10.0%，SD≤2.0，通過調整供試液的濃度為0.04mg/m l，檢測結果顯示樣品符合現行質量標準。

表1　A組樣品含量測定結果

3　討論

調整供試液的濃度為0.04mg/ml測定醋柳黃酮的含量，線性回歸方程r＞0.99，紫外分光光度吸收值為0.4751～0.5194，符合2010版中國藥典的要求。A、B組6份樣品的平均含量為13.0%，符合質量標準要求（含總黃酮苷元≥10.0%）。經過方法學研究，表明本方法具有良好的線性關系和精密度，為醋柳黃酮含量的質量控制提供了依據。此次方法的改進反映出紫外可見分光光度法在法規(guī)要求方面存在一定的差距，醋柳黃酮檢測方法的準確性如采用高效液相色譜法是今后方法研究和開發(fā)的方向。

表2　B組樣品含量測定結果

[1]蔡源源,王瑋,邱瑞寶,等.高效液相梯度洗脫法測定醋柳黃酮中的主要成分[J].河南大學學報(醫(yī)學版),2008,27(4):20-23.

[2]金鄰豫,凌春生,王瑋,等.醋柳黃酮在堿性條件下的穩(wěn)定性研究[J].河南大學學報(醫(yī)學版),2008,27(4):29-31.

[3]彭敏,湯艷群,梁惠明.HPLC法測定復方薄荷水楊酸酊中水楊酸的含量[J].甘肅醫(yī)藥,2015,34(1):9-11.

A

1004-2725（2016）12-0941-02

201108上海,上海市閔行區(qū)上海信誼天平藥業(yè)有限公司質量控制部

作者：周秋萍，E-mail：qpzhou08@163.com