彭寧東, 湯文圣, 郭 棟, 趙 俊
(廣州市亞熱帶生物多樣性與環(huán)境生物監(jiān)測(cè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東省水產(chǎn)健康安全養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,華南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,廣州 510631)
?
MS-222對(duì)赤眼鱒幼魚麻醉效果的研究
彭寧東, 湯文圣, 郭 棟, 趙 俊*
(廣州市亞熱帶生物多樣性與環(huán)境生物監(jiān)測(cè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東省水產(chǎn)健康安全養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,華南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,廣州 510631)
在水溫(26±0.5) ℃條件下,測(cè)定了MS-222對(duì)赤眼鱒(Squaliobarbuscurriculus)幼魚的麻醉效果. 根據(jù)魚體在麻醉和復(fù)蘇過程中的行為特征,將其麻醉過程分為6期,復(fù)蘇過程分為4期. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,赤眼鱒幼魚的入麻時(shí)間隨MS-222質(zhì)量濃度的升高而減少,復(fù)蘇時(shí)間隨MS-222質(zhì)量濃度的升高而增加. 在本實(shí)驗(yàn)條件下,測(cè)得的MS-222有效質(zhì)量濃度為120~180 mg/L. 在此范圍內(nèi),實(shí)驗(yàn)魚能在3 min內(nèi)進(jìn)入4期麻醉狀態(tài),5 min內(nèi)復(fù)蘇,且在麻醉液中連續(xù)浸浴15 min的成活率為100%. 麻醉過程中,赤眼鱒幼魚的呼吸頻率在淺麻醉狀態(tài)時(shí)略微上升,深麻醉狀態(tài)時(shí)快速下降,直至麻醉過度而停止呼吸. 進(jìn)入深度麻醉的幼魚,當(dāng)空氣暴露時(shí)間在9 min內(nèi)時(shí),復(fù)蘇時(shí)間隨空氣暴露時(shí)間的增加而減少,且能全部復(fù)蘇. 當(dāng)暴露時(shí)間在9~15 min時(shí),復(fù)蘇時(shí)間隨暴露時(shí)間的增加而增加,復(fù)蘇率逐漸下降,暴露18 min時(shí)實(shí)驗(yàn)魚全部死亡. 結(jié)果表明,MS-222對(duì)赤眼鱒幼魚有著入麻及復(fù)蘇時(shí)間短、安全邊界寬等優(yōu)點(diǎn),是較理想的麻醉劑.
赤眼鱒; 麻醉; MS-222
赤眼鱒(Squaliobarbuscurriculus)隸屬鯉形目(Cypriniformes)、鯉科(Cyprinidae)、雅羅魚亞科(Leuciscinae)、赤眼鱒屬(Squaliobarbus),是我國(guó)自然水體中常見的優(yōu)質(zhì)經(jīng)濟(jì)魚類[1]. 它棲息于水體中上層,喜跳躍,易受驚而致鱗片脫落受傷.
在對(duì)魚類進(jìn)行人工繁殖、體外標(biāo)記和形態(tài)學(xué)測(cè)量等人工操作時(shí),魚體會(huì)產(chǎn)生強(qiáng)烈應(yīng)激反應(yīng),不僅阻礙人工操作的順利進(jìn)行,同時(shí)還會(huì)對(duì)魚體造成傷害. 在魚類運(yùn)輸過程中,魚體在高密度狀態(tài)下掙扎劇烈,易導(dǎo)致充血、掉鱗、受傷,從而引起死亡[2]. 科學(xué)合理地使用麻醉劑,能夠較大程度降低魚類的應(yīng)激反應(yīng),減少可能造成的傷害,同時(shí)方便人工操作. 目前使用的近30種魚類麻醉劑中,MS-222具有使用簡(jiǎn)便、入麻和復(fù)蘇快等優(yōu)點(diǎn),是目前國(guó)際上應(yīng)用最廣泛、最安全有效的水產(chǎn)麻醉劑[3]. 經(jīng)美國(guó)食品和藥物管理局 (FDA) 許可,MS-222可用于水產(chǎn)品的麻醉運(yùn)輸[4]. MS-222作為麻醉劑用于多種魚類的麻醉研究已見報(bào)道,如施氏鱘(Acipenserschrenckii)和中華鱘(Acipensersinensis)[5]、長(zhǎng)薄鰍(Leptobotiaelongate)[6]、半滑舌鰨(CynoglossussemilaevisGünther)[7]、真鯛(Pagrusmajor)[8]、小體鱘(Acipenserruthenus)[9]、斑馬魚(Daniorerio)和孔雀魚(Poeciliareticulata)[10]等. 研究表明,MS-222對(duì)于不同魚類的適宜質(zhì)量濃度存在較大差異. 因此,對(duì)任一種魚類而言,在利用MS-222作為麻醉劑之前,都需進(jìn)行適宜質(zhì)量濃度的研究.
本實(shí)驗(yàn)采用MS-222作為麻醉劑,測(cè)定了MS-222對(duì)赤眼鱒幼魚麻醉的有效質(zhì)量濃度、在不同麻醉時(shí)間的呼吸頻率以及不同空氣暴露時(shí)間對(duì)魚體復(fù)蘇的影響,以期為MS-222在赤眼鱒上的應(yīng)用提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和科學(xué)參考.
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
實(shí)驗(yàn)用赤眼鱒幼魚體質(zhì)量(8.80±2.40) g,體長(zhǎng)(8.94±1.72) cm,購(gòu)自韶關(guān)市水產(chǎn)研究所. 實(shí)驗(yàn)前停食1 d. 實(shí)驗(yàn)用魚缸長(zhǎng)寬高分別為23、15、17 cm. MS-222由杭州動(dòng)物藥品廠生產(chǎn),質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98%. 使用前,用分析天平準(zhǔn)確稱量MS-222粉末,配制成所需質(zhì)量濃度的麻醉液,用NaHCO3將溶液pH值調(diào)至7.0~7.5之間. 實(shí)驗(yàn)用水為經(jīng)過24 h以上曝氣的自來(lái)水,水溫(26±0.5) ℃,溶解氧的質(zhì)量濃度≥5 mg/L,pH(7.5±0.5).
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 麻醉和復(fù)蘇階段行為特征觀察 隨機(jī)選取5尾實(shí)驗(yàn)魚置于90 mg/L的MS-222麻醉液中,觀察并記錄魚體在麻醉和復(fù)蘇中各時(shí)期的行為特征. 麻醉和復(fù)蘇的分期參考劉長(zhǎng)琳等[3,7]的標(biāo)準(zhǔn),并結(jié)合赤眼鱒幼魚自身行為特征. 麻醉和復(fù)蘇分期及其行為特征見表1和表2.
表1 赤眼鱒幼魚麻醉過程分期
表2 赤眼鱒幼魚復(fù)蘇過程分期
1.2.2 魚體最終麻醉程度實(shí)驗(yàn) 在麻醉劑質(zhì)量濃度較高時(shí),實(shí)驗(yàn)魚進(jìn)入麻醉狀態(tài)的時(shí)間較短,較難依靠魚體的行為特征來(lái)區(qū)分不同的麻醉程度;而當(dāng)麻醉劑質(zhì)量濃度較低時(shí),魚體能達(dá)到一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的、行為特征較明顯的最終麻醉狀態(tài). 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)10、20、40、60、90、120 mg/L等6個(gè)質(zhì)量濃度梯度,每個(gè)梯度用魚5尾,測(cè)定實(shí)驗(yàn)魚24 h內(nèi)在各質(zhì)量濃度下所達(dá)到的最終麻醉程度.
1.2.3 不同麻醉劑質(zhì)量濃度的麻醉效果 根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,設(shè)置30、60、90、120、150、180、210、240 mg/L等 8個(gè)MS-222質(zhì)量濃度梯度,每個(gè)梯度用魚5尾,重復(fù)3次. 其中,入麻時(shí)間是指魚放入麻醉液至進(jìn)入4期麻醉所需的時(shí)間;復(fù)蘇時(shí)間是指4期麻醉魚放入清水至行為特征完全恢復(fù)正常所需的時(shí)間. 參照文獻(xiàn)[11],本實(shí)驗(yàn)采用的有效質(zhì)量濃度標(biāo)準(zhǔn)為:3 min內(nèi)麻醉,5 min內(nèi)復(fù)蘇,且在麻醉液中連續(xù)浸浴15 min后成活率為100%.
1.2.4 不同空氣暴露時(shí)間對(duì)進(jìn)入深度麻醉期赤眼鱒幼魚復(fù)蘇的影響 將實(shí)驗(yàn)魚放入質(zhì)量濃度為150 mg/L的MS-222溶液中進(jìn)行深度麻醉(達(dá)到5期麻醉),然后從麻醉液中取出,用濕毛巾包裹實(shí)驗(yàn)魚的中后部,分別在空氣中暴露0、3、6、9、12、15、18 min后立即放入清水中,記錄復(fù)蘇時(shí)間,每組用魚5尾.
1.2.5 麻醉對(duì)呼吸頻率的影響 在60、90、120、150 mg/L等4個(gè)質(zhì)量濃度下開展實(shí)驗(yàn),每組5尾魚,取5尾魚呼吸頻率的平均值作為各質(zhì)量濃度下的呼吸頻率,方法參考文獻(xiàn)[7],即:將鰓蓋一張一合作為一次呼吸,統(tǒng)計(jì)連續(xù)呼吸10 s時(shí)各組魚的呼吸次數(shù),換算為1 min的呼吸次數(shù),即為呼吸頻率. 首先將實(shí)驗(yàn)魚放入清水中,穩(wěn)定后計(jì)數(shù)呼吸頻率作為初始值,然后將魚移入各質(zhì)量濃度的麻醉液中,記錄麻醉0.5、1、3、5、8、12、16 min時(shí)的呼吸頻率. 1.2.6 數(shù)據(jù)處理 實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)用Excel和SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析.
2.1 赤眼鱒幼魚麻醉和復(fù)蘇階段的行為特征
在MS-222質(zhì)量濃度為90 mg/L時(shí)觀察到的實(shí)驗(yàn)魚進(jìn)入麻醉和復(fù)蘇過程中各分期的時(shí)間及行為表現(xiàn)見表3和表4.
表3 90 mg/L的MS-222下赤眼鱒幼魚進(jìn)入各麻醉分期的時(shí)間及行為表現(xiàn)
表4 90 mg/L的MS-222下赤眼鱒幼魚進(jìn)入各復(fù)蘇分期的時(shí)間及行為表現(xiàn)
2.2 赤眼鱒幼魚在MS-222溶液中24 h內(nèi)所能達(dá)到的最終麻醉程度
隨著MS-222質(zhì)量濃度的上升,實(shí)驗(yàn)魚所能達(dá)到的最終麻醉程度逐漸增大(圖1);當(dāng)MS-222質(zhì)量濃度為10 mg/L時(shí),實(shí)驗(yàn)魚的最終麻醉程度為0期,無(wú)法進(jìn)入麻醉狀態(tài);當(dāng)MS-222質(zhì)量濃度為20 mg/L時(shí),部分實(shí)驗(yàn)魚仍停留在0期,而大部分實(shí)驗(yàn)魚進(jìn)入1期,其原因可能是個(gè)體差異所致;當(dāng)MS-222質(zhì)量濃度為40 mg/L時(shí),實(shí)驗(yàn)魚最終麻醉程度為2期;當(dāng)MS-222質(zhì)量濃度為60 mg/L時(shí),部分實(shí)驗(yàn)魚為3期,部分實(shí)驗(yàn)魚為4期;當(dāng)MS-222質(zhì)量濃度為90 mg/L時(shí),部分實(shí)驗(yàn)魚為5期,部分實(shí)驗(yàn)魚為6期,即魚體死亡;當(dāng)MS-222質(zhì)量濃度為120 mg/L時(shí),全部實(shí)驗(yàn)魚進(jìn)入6期.
圖1 赤眼鱒幼魚在6種MS-222質(zhì)量濃度中的最終麻醉程度
Figure 1 Final stage of fish anaesthesia under six different MS-222 concentrations
2.3 MS-222麻醉赤眼鱒幼魚的有效質(zhì)量濃度
在水溫為(26±0.5) ℃時(shí),研究赤眼鱒幼魚在不同質(zhì)量濃度的MS-222的入麻時(shí)間、復(fù)蘇時(shí)間及連續(xù)浸浴15 min后的成活率(圖2). 結(jié)果表明:當(dāng)MS-222質(zhì)量濃度為30、60 mg/L時(shí),實(shí)驗(yàn)魚在麻醉液中浸浴15 min后仍未進(jìn)入4期麻醉,停留在鎮(zhèn)靜期;當(dāng)MS-222質(zhì)量濃度在90~240 mg/L時(shí),隨時(shí)間推移,均能進(jìn)入4期,且隨MS-222質(zhì)量濃度的增大,實(shí)驗(yàn)魚的入麻時(shí)間逐漸減少. 當(dāng)質(zhì)量濃度為90、120、150、240 mg/L時(shí),入麻時(shí)間存在顯著性差異(P<0.05),而當(dāng)質(zhì)量濃度為180 mg/L和210 mg/L時(shí),則無(wú)顯著差異(P>0.05). MS-222的質(zhì)量濃度為90 mg/L時(shí),實(shí)驗(yàn)魚約8.3 min進(jìn)入4期麻醉;質(zhì)量濃度≥120 mg/L時(shí),實(shí)驗(yàn)魚能在3 min內(nèi)進(jìn)入4期.
圖2 不同MS-222質(zhì)量濃度下赤眼鱒幼魚的入麻時(shí)間、復(fù)蘇時(shí)間及浸浴15 min后成活率
Figure 2 Induction time,recovery time and survival rate after soaking 15 minutes of juvenileSqualiobarbuscurriculusin different concentrations
進(jìn)入4期麻醉后的赤眼鱒幼魚的復(fù)蘇時(shí)間隨MS-222的質(zhì)量濃度的增大而增加(P<0.05). 當(dāng)質(zhì)量濃度≤210 mg/L時(shí),實(shí)驗(yàn)魚能在5 min內(nèi)復(fù)蘇;當(dāng)質(zhì)量濃度≥240 mg/L時(shí),復(fù)蘇時(shí)間大于5 min.
只有當(dāng)MS-222的質(zhì)量濃度≤180 mg/L時(shí),在麻醉液中連續(xù)浸泡15 min的成活率才達(dá)到100%. 參照文獻(xiàn)[11]的3 min內(nèi)麻醉且5 min內(nèi)復(fù)蘇的理想麻醉劑質(zhì)量濃度標(biāo)準(zhǔn),再加上連續(xù)浸浴15 min成活率為100%的條件,本實(shí)驗(yàn)得到的赤眼鱒幼魚有效MS-222質(zhì)量濃度為120~180 mg/L.
2.4 空氣中暴露時(shí)間對(duì)深度麻醉赤眼鱒幼魚復(fù)蘇的影響
將赤眼鱒幼魚置于150 mg/L MS-222溶液中,3.8 min后魚體均進(jìn)入5期深度麻醉. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果(圖3)表明,當(dāng)空氣暴露時(shí)間在9 min內(nèi)時(shí),復(fù)蘇時(shí)間隨空氣暴露時(shí)間的延長(zhǎng)而減少(P<0.05);暴露時(shí)間在9~15 min時(shí),復(fù)蘇時(shí)間隨其延長(zhǎng)而增加(P<0.05). 此外,當(dāng)深度麻醉的赤眼鱒幼魚暴露時(shí)間在9 min內(nèi)時(shí),轉(zhuǎn)入清水后均能全部復(fù)蘇;超過9 min后,復(fù)蘇率逐漸下降:暴露12 min的復(fù)蘇率為60%,15 min的復(fù)蘇率為40%,18 min時(shí)實(shí)驗(yàn)魚全部死亡.
圖3 空氣暴露時(shí)間對(duì)魚體復(fù)蘇時(shí)間及復(fù)蘇率的影響
Figure 3 Effect of exposure time to air on fish recovery time and recovery rate
2.5 麻醉對(duì)赤眼鱒幼魚呼吸頻率的影響
實(shí)驗(yàn)結(jié)果(圖4)表明,在低質(zhì)量濃度麻醉液中(60 mg/L),赤眼鱒幼魚的呼吸頻率先略微上升,然后降至對(duì)照組水平以下,之后停留在鎮(zhèn)靜期,呼吸頻率保持穩(wěn)定. 當(dāng)質(zhì)量濃度為90~150 mg/L時(shí),呼吸頻率先略微上升,后隨麻醉時(shí)間的延長(zhǎng)而顯著下降(P<0.05). 總體而言,赤眼鱒幼魚在MS-222麻醉液中呼吸頻率隨時(shí)間延長(zhǎng),呈下降趨勢(shì).
圖4 不同MS-222質(zhì)量濃度對(duì)赤眼鱒幼魚呼吸頻率的影響
Figure 4 Effect of different MS-222 concentrations on fish respiratory rate
由圖可見:(1)麻醉時(shí)間為0.5~3 min時(shí),各組魚的呼吸頻率無(wú)顯著差異(P>0.05),除150 mg/L組外,各組魚的呼吸頻率均高于對(duì)照組;150 mg/L組的魚在3 min時(shí),其呼吸頻率開始降至對(duì)照組水平以下,至8 min時(shí),該組魚的呼吸頻率下降為0,呼吸停止. (2)麻醉時(shí)間為5 min時(shí),90、120 mg/L組魚的呼吸頻率開始降至對(duì)照組水平以下,120 mg/L組魚的呼吸頻率在12 min時(shí)降至0,呼吸停止. (3)麻醉時(shí)間為8 min時(shí),60 mg/L組魚的呼吸頻率開始降至對(duì)照組水平以下;60、90 mg/L組魚的呼吸頻率在16 min時(shí)雖然低于對(duì)照組水平,但都未降至0.
3.1 關(guān)于MS-222溶液的配制
由于MS-222為酸性物質(zhì),溶于水后會(huì)使pH值降低[12],所以在使用MS-222麻醉淡水魚時(shí)應(yīng)用NaOH或 NaHCO3等堿性物質(zhì)調(diào)節(jié)麻醉液的pH[13]. 本實(shí)驗(yàn)中MS-222質(zhì)量濃度范圍為10~240 mg/L,在配制麻醉液時(shí),加入了適量的NaHCO3,將溶液pH調(diào)至7.0~7.5,減少對(duì)魚體的刺激.
3.2 關(guān)于MS-222麻醉的有效質(zhì)量濃度
理想的麻醉劑應(yīng)具備無(wú)毒、快速麻醉和復(fù)蘇、低殘留、使用簡(jiǎn)便、價(jià)格低廉等優(yōu)點(diǎn)[14-16]. MS-222具有入麻和復(fù)蘇快、使用簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn),但也具有以下缺點(diǎn):(1)藥物殘留時(shí)間長(zhǎng). 美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)規(guī)定使用MS-222麻醉運(yùn)輸?shù)聂~需經(jīng)過21 d后才可上市出售[17]. (2)使用MS-222麻醉后的魚,其血漿中皮質(zhì)醇質(zhì)量濃度一直在增加,影響采血操作的進(jìn)行[2]. (3)MS-222商品價(jià)格和使用劑量較高. 因此,在選用MS-222作為麻醉劑時(shí)應(yīng)充分考慮其優(yōu)缺點(diǎn).
影響麻醉劑麻醉效果的因素主要為魚體自身因素(魚種、規(guī)格等)和水環(huán)境因素(水溫、pH值、溶氧等)兩大類. 麻醉劑的有效質(zhì)量濃度應(yīng)滿足對(duì)實(shí)驗(yàn)魚的傷害最小、符合實(shí)驗(yàn)操作要求等條件. MARKING和MEYER[11]認(rèn)為,在產(chǎn)卵、切鰭等人工操作時(shí),要求魚體能較快進(jìn)入麻醉狀態(tài),且完成工作后的復(fù)蘇也較快,因此理想的麻醉劑質(zhì)量濃度應(yīng)讓實(shí)驗(yàn)魚在3 min內(nèi)麻醉,5 min內(nèi)復(fù)蘇,移出麻醉液1 h后,組織內(nèi)的藥物殘留較低. 國(guó)內(nèi)外學(xué)者大多參考這一觀點(diǎn)來(lái)定義有效質(zhì)量濃度[4-10]. 本實(shí)驗(yàn)定義的有效麻醉質(zhì)量濃度標(biāo)準(zhǔn)為:3 min內(nèi)麻醉,5 min內(nèi)復(fù)蘇,且浸浴15 min后成活率為100%. 只有麻醉15 min后實(shí)驗(yàn)魚仍存活,該質(zhì)量濃度才能被考慮為適宜質(zhì)量濃度. 因?yàn)閷?shí)際操作時(shí)經(jīng)常涉及大量的魚同時(shí)麻醉,麻醉時(shí)間通常要超過個(gè)別魚的入麻時(shí)間,所以持續(xù)麻醉時(shí)間應(yīng)該有一個(gè)足夠的安全邊界[10]. 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在水溫(26±0.5) ℃時(shí),MS-222對(duì)體質(zhì)量為(8.80±2.40) g的赤眼鱒幼魚的有效質(zhì)量濃度為120~180 mg/L,在此范圍內(nèi),能夠有效地使魚進(jìn)入麻醉狀態(tài),進(jìn)行標(biāo)記、手術(shù)和測(cè)量等人工操作,且不傷害魚體. 關(guān)于MS-222麻醉研究結(jié)果[13]表明:MS-222在不同魚種、不同規(guī)格和不同溫度條件下的有效質(zhì)量濃度不盡相同(表5). 本實(shí)驗(yàn)條件下得到的MS-222的有效質(zhì)量濃度與布氏鯛幼魚的有效質(zhì)量濃度相近,低于鱖魚成魚、半滑舌鰨成魚的有效質(zhì)量濃度,高于中華鱘、史氏鱘、斑點(diǎn)叉尾鮰、長(zhǎng)鰭吻鮈的有效質(zhì)量濃度. MS-222對(duì)赤眼鱒幼魚的有效質(zhì)量濃度表現(xiàn)出較寬的安全邊界,且入麻時(shí)間和復(fù)蘇時(shí)間都較短,因此,MS-222能較好地應(yīng)用于赤眼鱒幼魚的麻醉操作.
表5 不同實(shí)驗(yàn)魚種的MS-222有效質(zhì)量濃度
3.3 關(guān)于空氣暴露時(shí)間對(duì)麻醉魚復(fù)蘇的影響
本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,當(dāng)進(jìn)入5期麻醉的赤眼鱒幼魚在空氣中的暴露時(shí)間≤9 min時(shí),復(fù)蘇時(shí)間隨空氣暴露時(shí)間的增加而減少;暴露時(shí)間在9~15 min時(shí),復(fù)蘇時(shí)間隨暴露時(shí)間的增加而增加. 在MS-222麻醉布氏鯛(TilapiaButtikoferi)幼魚的研究[18]以及MS-222麻醉長(zhǎng)鰭吻鮈(RhinogobioVentralis)幼魚的研究[21]中也得出了類似的結(jié)果,而使用MS-222深度麻醉美洲鰣(AlosaSapidissima)的結(jié)果[22]卻顯示復(fù)蘇時(shí)間隨暴露時(shí)間的增加而延長(zhǎng). 造成本實(shí)驗(yàn)結(jié)果的原因可能是:實(shí)驗(yàn)魚暴露在空氣中后,體內(nèi)不再繼續(xù)富集麻醉劑,且神經(jīng)系統(tǒng)中的麻醉劑隨血液循環(huán)向身體其他部位擴(kuò)散,經(jīng)皮膚排出,由此形成神經(jīng)系統(tǒng)-肌肉-外部濕潤(rùn)環(huán)境之間的麻醉劑排出通道,降低了神經(jīng)系統(tǒng)的麻醉程度,魚體呼吸部分恢復(fù),因而在暴露前期,復(fù)蘇時(shí)間逐漸減少;當(dāng)實(shí)驗(yàn)魚的麻醉程度降低后,因其耗氧量增加、暴露時(shí)間過長(zhǎng)而導(dǎo)致窒息或者昏迷,因而后期復(fù)蘇時(shí)間逐漸增加[18].
此外,本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,空氣暴露時(shí)間≤9 min時(shí),復(fù)蘇率為100%;而暴露時(shí)間超過9 min時(shí),復(fù)蘇率隨暴露時(shí)間的延長(zhǎng)而下降,在18 min時(shí)下降為0,魚體全部死亡. 因此,在對(duì)麻醉后赤眼鱒幼魚的測(cè)量、標(biāo)記等人工操作時(shí)間不宜超過9 min,以避免因暴露時(shí)間過長(zhǎng)而導(dǎo)致魚體死亡.
3.4 關(guān)于MS-222對(duì)赤眼鱒幼魚呼吸頻率的影響
魚體浸泡在麻醉液時(shí)呼吸頻率的快慢可以反映麻醉的深淺. 一般情況下,呼吸頻率快表示所處的麻醉狀態(tài)淺,反之則表示所處的麻醉狀態(tài)深. 大多研究結(jié)果表明,魚體的呼吸頻率在整個(gè)麻醉期間呈下降趨勢(shì),如利用MS-222麻醉的美洲鰣[22]、金魚[23];利用丁香酚麻醉的黑鱸[24]、黃臘鲹[25]等. 本實(shí)驗(yàn)中,赤眼鱒幼魚在麻醉液中的呼吸頻率表現(xiàn)為:在淺麻醉階段時(shí)呼吸頻率上升,在深麻醉階段時(shí)則快速下降,這一結(jié)果與MS-222麻醉的鱖魚[19]、圓斑星鰈[26]、半滑舌鰨[7]的研究結(jié)果相似. 在魚體呼吸頻率下降階段,不同質(zhì)量濃度組的表現(xiàn)有所差異,MS-222的質(zhì)量濃度越高,實(shí)驗(yàn)魚的呼吸頻率下降得越快,其原因可能是:MS-222的質(zhì)量濃度高時(shí),魚體通過鰓絲吸入大量麻醉液所用的時(shí)間比低質(zhì)量濃度時(shí)所用的時(shí)間短,抑制了魚體神經(jīng)中樞的活動(dòng),降低鰓蓋張合的速率,從而導(dǎo)致呼吸頻率的快速下降. 因此,麻醉對(duì)呼吸頻率的影響不僅與魚的種類有關(guān),還與麻醉劑的種類及質(zhì)量濃度相關(guān).
[1] 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院珠江水產(chǎn)研究所,華南師范大學(xué),暨南大學(xué),等. 廣東淡水魚類志[M]. 廣州:廣東科技出版社,1991:84-85.
[2] COYLE S D,DURBOROW R M,TIDWELL J H. Anesthetics in aquaculture[R]. Mississippi:SRAC Publication,2004.
[3] 劉長(zhǎng)琳,何力,陳四清,等. 魚類麻醉研究綜述[J]. 漁業(yè)現(xiàn)代化,2007(5):21-25.
[4] MATTSON N S,RIPLE T H. Metomidate,a better anesthetic for cod (Gadusmorhua) in comparison with benzocaine,MS-222,chlorobutanol,and phenoxyethanol[J]. Aquaculture,1989,83(1/2):89-94.
[5] 田家元,王京樹,萬(wàn)建義,等. MS-222不同處理方式對(duì)史氏鱘和中華鱘麻醉效果的影響[J]. 水生態(tài)學(xué)雜志,2011(5):87-90.
TIAN J Y,WANG J S,WAN J Y,et al. Effects of different MS-222 treatments of anesthesia onAcipenserschrenckiiandAcipensersinensis[J]. Journal of Hydroecology,2011(5):87-90.
[6] 張建明,郭柏福,袁濤,等. MS-222對(duì)長(zhǎng)薄鰍的麻醉效果[J]. 水產(chǎn)學(xué)雜志,2014(5):47-51.
ZHANG J M,GUO B F,YUAN T,et al. Anesthetic effects of MS-222 on elongate loachLeptobotiaelongata[J]. Chinese Journal of Fisheries,2014(5):87-90.
[7] 劉長(zhǎng)琳,陳四清,何力,等. MS-222對(duì)半滑舌鰨成魚的麻醉效果研究[J]. 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué),2008(1):92-99.
LIU C L,CHEN S Q,HE L,et al. Effects of MS-222 as an anaesthetic on adultCynoglossussemilaevisGünther[J]. Journal of Fishery Sciences of China,2008(1):92-99.
[8] OIKAWA S,TAKEDA T,ITAZAWA Y. Scale effects of MS-222 on a marine teleost,porgyPagrusmajor[J]. Aquaculture,1994,121(4):369-379.
[9] BISHKOUL G R,HALIMI M,NOROUSTA R,et al. The anesthetic effects of MS-222 (tricaine methanesulfonate) on some hematological parameters of sterlet,Acipenserruthenus[J]. Comparative Clinical Pathology,2015,1(24):89-92.
[10]CHAMBEL J,PINHO R,PEDROSA R,et al. The efficacy of MS-222 as anaesthetic agent in four freshwater aquarium fish species[J]. Aquaculture Research,2013,46(7):1-8.
[11]MARKING L L,MEYER F P. Are batter anesthetics needed in fisheries? [J]. Fisheries,1985,10(6):2-5.
[12]OHR E A. Tricaine methanesulfonate-I. pH and its effects on anesthetic potency[J]. Comparative Biochemistry and Physiology,1976,54(1):13-l7.
[13]COYLE S D,DURBOROW R M,JINN R H,et al. Comparison of efficacy of five anesthetics in Goldlined sea bream,Sparussarba[J]. Acta Zoologica Taiwanica,1998,9(1):35-41.
[14]TREVES-BROWN K M. Applied fish pharmacology[M]. Dordrecht:Kluwer Academic Publishers,2000:328.
[16]PRAMOD P K,RAMACHANDRAN A,SAJEEVAN T P,et al. Comparative efficacy of MS-222 and benzocaine as anaesthetics under simulated transport conditions of a tropical ornamental fishPuntiusfilamentosus(Valenciennes)[J]. Aquaculture Research,2010,41(2):309-314.
[17]WOODY C A,NELSON J,RAMSTAD K. Clove oil as an anaesthetic for adult sockeye salmon:field trials[J]. Journal of Fish Biology,2002,60(2):340-347.
[18] 何小燕,袁顯春,潘志,等. MS-222對(duì)布氏鯛幼魚的麻醉效果研究[J]. 四川動(dòng)物,2013(5):729-733.
HE X Y,YUAN X C,PAN Z,et al. The anaesthesia effects of MS-222 on JuvenileTilapiabuttikoferi[J]. Sichuan Journal of Zoology,2013(5):729-733.
[19] 郭豐紅,汪之和. MS-222對(duì)鱖魚成魚麻醉效果的研究[J]. 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué),2009(7):150-153.
GUO F H,WANG Z H. Anesthetic effect of MS-222 on adultSinipercachuatsi[J]. Hunan Agricultural Sciences,2009(7):150-153.
[20]張民強(qiáng),汪開毓,王均,等. MS-222對(duì)斑點(diǎn)叉尾鮰麻醉效果的研究[J]. 水產(chǎn)科技情報(bào),2014(1):21-25;31.
[21]管敏,胡美洪,劉勇,等. MS-222對(duì)長(zhǎng)鰭吻魚句幼魚麻醉效果的研究[J]. 水產(chǎn)科技情報(bào),2015(2):72-77.
[22] 杜浩. 美洲鰣(Alosasapidissima)人工孵化、養(yǎng)殖及轉(zhuǎn)運(yùn)關(guān)鍵技術(shù)的研究[D]. 武漢:華中農(nóng)業(yè)大學(xué),2005.
DU H. Studies on key techniques in incubation,culture and transportation of American SHADAlosasapidissima[J]. Wuhan:Huazhong Agricultured University,2005.
[23] 李春梅,黃永堅(jiān). MS-222麻醉金魚的研究[J]. 黃岡職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào),2002(4):67-70;63.
LI C M,HUANG Y J. Studies on anaesthetic Gold Fish by MS-222[J]. Journal of Huanggang Polytechnic,2002 (4):67-70;63.
[24]COOK S J,SUSKI C D,OSTRAND K G. Behavioral and physiological assessment of low concentration of clove oil anaesthetic for handing and transporting largemouth bass (Micropterussalmoides)[J]. Aquaculture,2004,239:509-529.[25] 張朝暉,叢嬌日,王波,等. 麻醉劑丁香酚對(duì)黃臘鯵耗氧的影響[J]. 海洋科學(xué),2003(6):11-14;34.
ZHANG Z H,CONG J R,WANG B,et al. The effect of anesthetic eugenol on the oxygen consumption rates ofTrachinotusblochii[J]. Marine Sciences,2003(6):11-14;34.
[26] 趙明,柳學(xué)周,徐永江,等. MS-222麻醉圓斑星鰈成魚效果研究[J]. 海洋科學(xué)進(jìn)展,2010(4):531-537.
ZHAO M,LIU X Z,XU Y J,et al. Study on anaesthetic effects of MS-222 on adultVeraspervariegates[J]. Advances in Marine Science,2010(4):531-537.
【中文責(zé)編:莊曉瓊 英文責(zé)編:李海航】
The Anaesthesia Effects of MS-222 on Juvenile Squaliobarbus curriculus
PENG Ningdong, TANG Wensheng, GUO Dong, ZHAO Jun*
(Guangzhou Key Laboratory of Subtropical Biodiversity and Biomonitoring; Guangdong Provincial Key Laboratory for Healthy and Safe Aquaculture;School of Life Science, South China Normal University, Guangzhou 510631, China)
Anaesthetic has been used in aquaculture to minimize the stress and damage of fish during harvesting,grading,transportation, spawning induction and handling. This study investigated the anaesthetic effect of MS-222 on juvenileSqualiobarbuscurriculusat water temperature (26±0.5) ℃. According the juvenile behavioral characteristics, the anesthesia process is divided into six stages, while the recovery process is divided into four stages. Experimental results show that the anesthesia time reduced with the increase of mass concentration of MS-222 and the recovery time increased with the increase of mass concentration of MS-222. The most effective anesthetic concentration range from 120 mg/L to 180 mg/L. At these conditions, the juvenile could reach stage 4 anesthesia within 3 minutes and recover in less than 5 minutes, and had a survival rate of 100% after immersed in the MS-222 solution for 15minutes. In the course of anesthesia, juvenileS.curriculusbreathing frequency increased in light anesthesia state, decreased rapidly during deep anesthesia, until the breath cessation. After the juvenile reached stage 5 anesthesia, the fish were taken out for air exposure of 0-18 minutes. When air exposure time within 9 minutes, the recovery time slightly reduced with the extension of air exposure time and all the fish can recover. When air exposure time in 9-15 minutes, the recovery time increased and the recovery rate decreased with the extension of air exposure time. When exposed to 18 minutes, all of the experiment fish died. The results indicate that MS-222 as an anaesthetic to juvenileS.curriculusis feasible in terms of the effects that fish can be induced anesthesia rapidly and recovery rapidly with a wide safety concentration ranges without any increasing tolerance by repeated anaesthetization.
Squaliobarbuscurriculus; anaesthesia; MS-222
2016-04-28 《華南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)》網(wǎng)址:http://journal.scnu.edu.cn/n
農(nóng)業(yè)部公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(201303048);國(guó)家科技基礎(chǔ)條件平臺(tái)工作重點(diǎn)項(xiàng)目(2005DKA21402);華南師范大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)項(xiàng)目(20160516)
S965.1
A
1000-5463(2016)06-0037-07
*通訊作者:趙俊,教授,Email:zhaojun@scnu.edu.cn.