池林峰，楊 軍

( 1.浙 江中醫(yī)藥大學(xué)，浙江 杭州 310053；2.浙 江大學(xué)醫(yī)學(xué)院，浙江 杭州 310058；3.杭 州師范大學(xué)，浙江 杭州 310036 )

BRCA1在DNA損傷應(yīng)激反應(yīng)中的研究進(jìn)展

池林峰1，楊 軍2，3，*

( 1.浙 江中醫(yī)藥大學(xué)，浙江 杭州 310053；2.浙 江大學(xué)醫(yī)學(xué)院，浙江 杭州 310058；3.杭 州師范大學(xué)，浙江 杭州 310036 )

乳腺癌易感基因BRCA1與乳腺癌、卵巢癌等腫瘤的發(fā)生緊密相關(guān)。此外，BRCA1還參與了許多重要的細(xì)胞信號(hào)通路，包括DNA損傷所誘發(fā)的細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)，如DNA損傷導(dǎo)致的細(xì)胞周期檢驗(yàn)點(diǎn)的激活、DNA損傷修復(fù)、染色體重塑及細(xì)胞凋亡等。本文對BRCA1在DNA損傷應(yīng)激反應(yīng)中的研究進(jìn)展，尤其是它在DNA雙鏈斷裂修復(fù)的兩種模式(非同源末端連接和同源重組)中的作用作一綜述。

BRCA1；DNA損傷應(yīng)激反應(yīng)；同源重組；非同源末端連接

乳腺癌是女性癌癥中最普遍的一種，5%～10%的乳腺癌具有遺傳傾向，約2%與乳腺癌易感基因(breast cancer susceptibility protein 1，BRCA1)的突變相關(guān)[1]。BRCA1位于人類染色體17q21上[2]，由24個(gè)外顯子組成，編碼1 863個(gè)氨基酸，其中第11號(hào)外顯子是其最大的外顯子，編碼60%以上的氨基酸。BRCA1具有兩個(gè)功能結(jié)構(gòu)域：氨基端具有E3泛素連接酶活性的指環(huán)結(jié)構(gòu)域和羧基末端促進(jìn)蛋白結(jié)合的串聯(lián)的BRCT(BRCA1 C Terminus)結(jié)構(gòu)域。多種腫瘤相關(guān)BRCA1突變位點(diǎn)均發(fā)生在這兩個(gè)結(jié)構(gòu)域，暗示著這兩個(gè)結(jié)構(gòu)域?qū)σ种迫橄侔┑陌l(fā)生具有重要作用[3]。

除了在腫瘤發(fā)生中的作用，越來越多的研究也表明BRCA1可在另一類重要的細(xì)胞反應(yīng)，即DNA損傷應(yīng)激反應(yīng)(DNA damage response，DDR)中同樣具有重要作用。人類的遺傳物質(zhì)DNA不斷受到諸如化學(xué)物質(zhì)、電離輻射、紫外光和X射線等外源因素和細(xì)胞正常代謝所產(chǎn)生的活性氧(reactive oxygen species，ROS)等內(nèi)源性因素的損傷。這些損傷可以導(dǎo)致堿基修飾、單鏈斷裂(single strand break，SSB)、雙鏈斷裂(double strand break，DSB)、鏈內(nèi)交聯(lián)(intrastrand crosslinks)、鏈間交聯(lián)(interstrand crosslinks)等多種DNA損傷。為了應(yīng)對這些DNA損傷，在進(jìn)化過程中細(xì)胞形成了特異性的DDR以保證細(xì)胞正常的生長和有機(jī)體的存活[4]。未修復(fù)的斷裂DNA會(huì)隨著有絲分裂傳遞給子代細(xì)胞，造成遺傳物質(zhì)的不穩(wěn)定并最終導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生[5]。已有的研究結(jié)果表明，當(dāng)細(xì)胞正常表達(dá)BRCA1時(shí)，可以幫助細(xì)胞感知DNA損傷并修復(fù)DNA以保持遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定和抑制腫瘤的發(fā)生；而當(dāng)BRCA1發(fā)生突變時(shí)則會(huì)破壞細(xì)胞內(nèi)正常的DDR。因此BRCA1在DDR中的重要作用為其如何抑制癌癥的發(fā)生提供了部分理論依據(jù)。

當(dāng)遭受不同類型的DNA損傷時(shí)，細(xì)胞會(huì)啟動(dòng)相應(yīng)的DNA修復(fù)機(jī)制，比如非同源末端連接 (nonhomologous end joining，NHEJ)和同源重組(homologous recombination，HR)主要針對DSB進(jìn)行修復(fù)；核苷酸切除修復(fù)(nucleotide excision repair，NER)針對鏈間交聯(lián)、紫外線導(dǎo)致的嘧啶二聚體等；堿基切除修復(fù)(base excision repair，BER)針對點(diǎn)突變；錯(cuò)配修復(fù)(mismatch repair，MMR)針對復(fù)制過程中產(chǎn)生的堿基錯(cuò)配等[6]。NHEJ和HR是真核生物進(jìn)行DSB修復(fù)的主要形式[7]，目前研究結(jié)果已證明BRCA1在這兩條通路中都發(fā)揮重要作用。本文將簡述BRCA1在DDR中的研究進(jìn)展，尤其是在NHEJ和HR中的作用。

1 DNA損傷應(yīng)激反應(yīng)的過程

DDR是一個(gè)非常復(fù)雜的過程，并且針對不同的DNA損傷形式細(xì)胞會(huì)啟用不同的信號(hào)通路，參與的細(xì)胞成分也不盡相同[8]。DDR是一系列的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程，包括以下幾個(gè)關(guān)鍵步驟：當(dāng)細(xì)胞遭受DNA損傷時(shí)，首先由感受器(sensor)感受DNA損傷，然后由傳遞分子(transducer/mediator)將信號(hào)傳遞到下游，再由執(zhí)行者(effector)完成損傷修復(fù)等功能；最后，一般還有一個(gè)信號(hào)終止(signal attenuation/termination)的過程[8-9]。例如，在DSB的DDR中，MRN復(fù)合物(Mre11/Rad50/Nbs1 Complex)在感受DSB中起著關(guān)鍵作用[10]。被MRN復(fù)合物活化的磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K)家族的成員，包括共濟(jì)失調(diào)毛細(xì)血管擴(kuò)張突變基因(ataxia telangiectasismutated，ATM)、Rad3相關(guān)蛋白(ATM and Rad3-related，ATR)和DNA依賴性蛋白激酶(DNA-dependent protein kinase，DNA-PK)，它們通過直接或間接地磷酸化功能執(zhí)行分子如CHK1、CHK2[11]，最終導(dǎo)致細(xì)胞周期停滯以利于通過HR或NHEJ對DNA DSB進(jìn)行修復(fù)[12]。此外，多聚(ADP-核糖)聚合酶[poly(ADP-ribose) polymerase，

PARP]家族成員主要識(shí)別SSB[13]，而范可尼貧血(Fanconi anemia，F(xiàn)A)家族成員則參與鏈間交聯(lián)的識(shí)別[14]。

2 DNA雙鏈斷裂修復(fù)的機(jī)制

DSB是細(xì)胞所遭受的最嚴(yán)重的損傷之一，可由內(nèi)源(細(xì)胞代謝物)或外源(電離輻射、化療藥物)的因素造成[15]。未修復(fù)或錯(cuò)誤修復(fù)的DSB會(huì)導(dǎo)致染色體變異、細(xì)胞死亡，或最終導(dǎo)致癌癥的發(fā)生。真核生物形成了一系列的DSB修復(fù)機(jī)制，其中NHEJ和HR是最主要的兩種形式[16]。NHEJ不需要同源模板的存在而直接將斷裂的DNA末端連接起來，主要發(fā)生在G1和早期的S期細(xì)胞中[17]，其核心成分是DNA-PK。在這一過程中，當(dāng)DNA雙鏈發(fā)生斷裂時(shí)，Ku70/Ku80以二聚體的形式結(jié)合到DNA雙鏈斷裂的末端，并召集DNA蛋白激酶催化亞基(DNA-PK catalytic subunit，DNA-PKcs)聚集到DNA末端。兩個(gè)DNA-PKcs/Ku/DNA形成DNA-PK聚合體結(jié)構(gòu)，從而將斷裂的DNA末端緊緊聯(lián)系在一起，接著X射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白4(X ray cross complementing protein 4，XRCC4)和DNA連接酶IV(DNA ligase IV)復(fù)合物在XRCC4類因子(XRCC4-like factor，XLF)的幫助下介導(dǎo)DSB末端的連接，從而完成NHEJ修復(fù)過程[18]。

與NHEJ不同，HR的發(fā)生需要同源姐妹染色單體的參與，因此一般只發(fā)生在S期細(xì)胞和G2期細(xì)胞[19]。DSB的5′端的末端剪切是HR發(fā)生的關(guān)鍵一步，由MRN復(fù)合體(Mre11/Rad50/ Nbs1 complex)、CtIP(CtBP interacting protein)[20]及BLM(bloom)參與調(diào)控[21]。此種修復(fù)模式下，DSB末端首先經(jīng)過末端剪切形成突出的3′端并馬上被復(fù)制蛋白A(replication protein A，RPA)所包被，然后多種蛋白介導(dǎo)下被Rad51所替代，并發(fā)起同源染色體配對、末端侵入和鏈交換，從而完成HR[22-23]。

3 BRCA1與NHEJ

NHEJ是真核細(xì)胞DNA修復(fù)的最主要形式。NHEJ可以不使用同源模板把幾乎任何類型的DSB末端直接連接到一起，因此它可以發(fā)生于任一細(xì)胞周期，在G1期占優(yōu)勢[24]。BRCA1在NHEJ中的作用還具有爭議性，不同的研究表明BRCA1能促進(jìn)NHEJ、抑制NHEJ或者對NHEJ無明顯影響[25-27]。比如，在G1期BRCA1與Ku80相互作用并使其更加緊密地結(jié)合在DSB的末端，表明在G1期BRCA1可能促進(jìn)NHEJ的發(fā)生[28]。而在BRCA1缺失的小鼠胚胎成纖維細(xì)胞和人體細(xì)胞HCC1937中，NHEJ修復(fù)通路缺失[26]。這些結(jié)果支持BRCA1對NHEJ的促進(jìn)作用。但也有研究結(jié)果表明NHEJ修復(fù)通路可能不需要BRCA1的參與，例如，利用脈沖場凝膠電泳檢測DSB的修復(fù)動(dòng)力學(xué)時(shí)發(fā)現(xiàn)在BRCA1缺失的細(xì)胞系HCC1937和野生型細(xì)胞中，DSB的修復(fù)動(dòng)力學(xué)曲線無顯著差異[29]。而BRCA1與NHEJ因子53BP1的競爭性假說則暗示著BRCA1在DSB修復(fù)通路的選擇中可能更傾向于HR。在BRCA1缺失的小鼠模型中，低表達(dá)53BP1可以增加HR的比例及基因組的穩(wěn)定性[30]。在G1期，53BP1可以抑制BRCA1聚集到DSB末端，從而促進(jìn)NHEJ的發(fā)生[31]。圍繞BRCA1在NHEJ中的作用，我們也展開了相關(guān)研究。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在S期BRCA1與DNAPKcs發(fā)生相互作用，抑制了DNA-PKcs S2056的自磷酸化，從而抑制了NHEJ的發(fā)生[32-33]。以上結(jié)果提示我們BRCA1與NHEJ的關(guān)系還需要更進(jìn)一步的研究來確定。

4 BRCA1與HR

與NHEJ不同，HR被認(rèn)為只發(fā)生在姐妹染色單體存在的S和G2期。HR始于ATM和MRN復(fù)合物決定的末端剪切而形成單鏈DNA(single strand DNA，ssDNA)，ssDNA迅速被RPA包被，在多種蛋白的介導(dǎo)下被RAD51替換并發(fā)生同源染色體配對、末端侵入和鏈連接。1999年Moynahan等[34]首次發(fā)現(xiàn)BRCA1在HR中發(fā)揮作用。后續(xù)研究表明BRCA1主要通過與諸多蛋白的相互作用(圖1)而在HR中發(fā)揮作用以保持遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性[35]。

圖1 在DNA雙鏈斷裂的HR修復(fù)過程中與BRCA1發(fā)生相互作用的蛋白[35]

4.1 CtIP

CtIP與BRCA1羧基端的氨基酸殘基1 651～1 863發(fā)生相互作用，它們之間的相互作用是細(xì)胞周期依賴的，只發(fā)生在G2期。在DNA損傷發(fā)生后，ATM可以磷酸化CtIP的氨基酸殘基Ser327，磷酸化后的CtIP可以與BRCA1的BRCT結(jié)構(gòu)域發(fā)生相互作用[36]。BRCA1和CtIP的相互作用與細(xì)胞周期檢驗(yàn)點(diǎn)G2/M相關(guān)，它們的相互作用可以激活CHK1。此外它們之間的相互作用與S/G2檢驗(yàn)點(diǎn)也相關(guān)，CtIP與BRCA1、MRN的相互作用可以增強(qiáng)MRN的酶活力，促進(jìn)末端剪切的進(jìn)行從而促進(jìn)HR的發(fā)生并抑制NHEJ[37]。最近研究表明不僅BRCA1與CtIP的相互作用能促進(jìn)HR，CtIP的二聚體對HR的發(fā)生也具有重要作用。在人類細(xì)胞中CtIP可以形成二聚體，CtIP的突變株由于不能形成二聚體嚴(yán)重影響了HR的發(fā)生[38]。

4.2 Rad51

在S期細(xì)胞中，BRCA1和Rad51可以共同位于DNA損傷位點(diǎn)并形成焦點(diǎn)。這兩個(gè)蛋白均與HR相關(guān)，但是至今研究人員還不確定它們的相互作用是直接的還是間接的。Scully等[39]發(fā)現(xiàn)Rad51與BRCA1的758～1 064氨基酸殘基發(fā)生相互作用，而Garcia 等[40]發(fā)現(xiàn)Rad51與BRCA1的相互作用是通過MRN復(fù)合物發(fā)生的。在DNA損傷修復(fù)過程中，Rad51可以在DNA周圍形成絲狀的螺旋核酸蛋白，但具體的形成機(jī)制尚不明確。這些絲狀的螺旋核酸蛋白可以促進(jìn)Rad51依賴的同源識(shí)別和ATP依賴的鏈交換反應(yīng)[41]。研究表明BRCA1可以保持BACH1的酶活力以防止Rad51過早移位，從而保證HR的順利進(jìn)行[42]。

4.3 BARD1

BRCA1相關(guān)環(huán)狀蛋白(BRCA1-associated ring domain，BARD1)與BRCA1的指環(huán)結(jié)構(gòu)域發(fā)生相互作用。當(dāng)BARD1缺失

時(shí)，BRCA1不能穩(wěn)定存在而迅速降解；反之，BARD1也需要BRCA1的存在才能穩(wěn)定存在于細(xì)胞內(nèi)[43]。BRCA1和BARD1在結(jié)構(gòu)上非常相似，它們都有一個(gè)在氨基端的指環(huán)結(jié)構(gòu)域和在羧基端的串聯(lián)BRCT結(jié)構(gòu)域[44]。當(dāng)DNA損傷發(fā)生時(shí)，BRCA1-BARD1復(fù)合物可以泛素化E3激酶，從而引起其他參與DNA損傷修復(fù)蛋白的泛素化，包括CtIP和H2AX[45-46]。泛素化的CtIP可以結(jié)合到染色體并調(diào)節(jié)G2/M檢驗(yàn)點(diǎn)；泛素化的H2AX可以使染色體重組并啟動(dòng)DNA修復(fù)[45]。

4.4 CCDC98及RAP80

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白98(coiled-coil domain-containing protein 98，CCDC98)(也被稱作Abraxas)與BRCA1的BRCT結(jié)構(gòu)域發(fā)生相互作用[47]。由于CCDC98和BRCA1的結(jié)合位點(diǎn)與CtIP和BRCA1的結(jié)合位點(diǎn)相同，因此當(dāng)CCDC98和BRCA1相互作用后，BRCA1不能與CtIP結(jié)合從而抑制了DNA的末端剪切[48]。CCDC98可以招募RAP80與BRCA1形成復(fù)合體，從而影響B(tài)RCA1對DNA損傷位點(diǎn)的識(shí)別和對HR通路的調(diào)節(jié)[49]。研究者認(rèn)為BRCA1-RAP80復(fù)合體在調(diào)節(jié)DNA修復(fù)通路的選擇中發(fā)揮重要作用[50]。

4.5 PALB2

乳腺癌易感基因相關(guān)蛋白2(partner and localizerof BRCA2，PALB2)與BRCA1的BRCT結(jié)構(gòu)域發(fā)生相互作用[51-52]。在細(xì)胞周期S期，PALB2與BRCA1和BRCA2均發(fā)生結(jié)合，被認(rèn)為是這兩個(gè)蛋白之間的橋梁[51]。研究表明PALB2與BRCA1的相互作用參與HR的調(diào)節(jié)。在細(xì)胞中表達(dá)PALB2突變體，PALB2突變體不能與BRCA1發(fā)生相互作用，導(dǎo)致細(xì)胞對絲裂霉素C的敏感性增加[52]。

4.6 BACH1

BACH1氨基端與BRCA1的羧基端(aa1529～1863)發(fā)生相互作用[45，53]。與CtIP和BRCA1的作用方式相似，BACH1與BRCA1的相互作用也是磷酸化依賴的[45]。BACH1的氨基酸殘基S990的磷酸化對其與BRCA1的結(jié)合具有調(diào)節(jié)作用[54]。在細(xì)胞周期S和G2期，BACH1可以與BRCA共同聚集到DSB位點(diǎn)形成焦點(diǎn)。當(dāng)DNA損傷發(fā)生時(shí)，BRCA1與BACH1的相互作用可以促使BACH1結(jié)合到DNA，從而阻止Rad51與DNA的結(jié)合使細(xì)胞傾向于使用NHEJ修復(fù)通路[42，55]。

4.7 UHRF1

泛素樣蛋白含有脯氨酸羥化酶與環(huán)指結(jié)構(gòu)域1(ubiquitinlike，with PHD and RING finger domains 1，UHRF1)與BRCA1的BRCT結(jié)構(gòu)域在S期發(fā)生相互作用[56]。在S期，UHRF1的Ser674被BRCA1磷酸化，從而調(diào)節(jié)RIF1的泛素化，導(dǎo)致RIF1從53BP1解聚，促進(jìn)HR的進(jìn)行[56]。

5 總結(jié)與展望

BRCA1是DNA損傷修復(fù)通路中的關(guān)鍵蛋白，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)其在調(diào)節(jié)DNA修復(fù)通路中具有重要作用，但仍有很多問題懸而未決。比如BRCA1是否參與調(diào)控NHEJ相關(guān)因子，影響它們在DSB的聚集和動(dòng)力學(xué)特征；BRCA1在DSB修復(fù)通路選擇中的作用機(jī)制；BRCA1在范可尼修復(fù)通路中的作用機(jī)制等。通過研究BRCA1的不同突變特性以及BRCA1的相互作用蛋白和相關(guān)通路，闡明其在DNA損傷修復(fù)中的作用，有利于發(fā)現(xiàn)其在乳腺癌等腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制，為腫瘤的防治提供理論基礎(chǔ)。

[1] Brewster A，Helzlsouer K.Breast cancer epidemiology，prevention，and early detection[J].Curropinoncol，2001，13(6)：420-425.

[2]hall JM，LeemK，Newman B，etal.Linkage of early-onset familial breast cancer to chromosome 17q21[J].Science，1990，250(4988)：1684-1689.

[3]monteiro AN，Augusta，Hanafusah.Evidence for a transcriptional activation functionof BRCA1 C-terminal region[J].Proc Natl Acad Sci USA，1996，93(24)：13595-13599.

[4] Al-Ejeh F，Kumar R，Wiegmans A，etal.Harnessing the complexity of DNA-damage response pathways to improve cancer treatmentoutcomes[J].Oncogene，2010，29(46)：6085-6098.

[5]hoeijmakers JH.DNA damage，aging，and cancer[J].N Engl Jmed，2009，361(15)：1475-1485.

[6] Bernstein C，Bernsteinh，Payne CM，etal.DNA repair/proapoptotic dual-role proteinsin fivemajor DNA repair pathways：failsafe protection against carcinogenesis[J].Mutat Res，2002，511(2)：145-178.

[7] Shrivastavm，Deharo LP，Nickoloff JA.Regulationof DNA doublestrand b reak r epair p athway choice[J].C ell R es，2008，18(1)：134-147.

[8] Yang J，Yu Y，HamrickhE，etal.ATM，ATR and DNAPK：initiators of the cellular genotoxic stress responses[J].Carcinogenesis，2003，24(10)：1571-1580.

[9] Jackson SP，Bartek J.The DNA-damage response inhuman biology and disease[J].Nature，2009，461(7267)：1071-1078.

[10] Stracker TH，Petrini JH.ThemRE11 complex：starting from the ends [J].Nat Revmol Cell Biol，2011，12(2)：90-103.

[11]marechal A，Zou L.DNA damage sensing by the ATM and ATR kinases [J].Cold Springharb Perspect Biol，2013，5(9)：a012716.

[12] Ljungmanm.The DNA damage response—repairor despair?[J].Environmolmutagen，2010，51(8/9)：879-889.

[13] Schreiber V，Dantzer F，Ame JC，etal.Poly(ADP-ribose)：novel functions for anoldmolecule[J].Nat Revmol Cell Biol，2006，7(7)：517-528.

[14]moldovan GL，D'Andrea AD.How the fanconi anemia pathway guards the genome[J].Annu Rev Genet，2009，43：223-249.

[15] Khanna KK，Jackson SP.DNA double-strand breaks：signaling， repair and the c ancer c onnection[J].N at genet，2001，27(3)：247-254.

[16] Burma S，Chen BP，Chen DJ.Role of non-homologous end joining (NHEJ) inmaintaining genomicintegrity[J].DNA Repair (Amst)，2006，5(9/10)：1042-1048.

[17] Goodarzi AA，Jeggo PA.The repair and signaling responses to DNA double-strand breaks[J].Adv Genet，2013，82：1-45.

[18] Davis AJ，Chen DJ.DNA double strand break repair via nonhomologous end-joining[J].Transl Cancer Res，2013，2(3)：130-143.

[19] Shibata A，Conrad S，Birraux J，etal.Factors determining DNA double-strand break repair pathway choice in G2 phase[J].EMBO J，2011，30(6)：1079-1092.

[20] Sartori AA，Lukas C，Coates J，etal.Human CtIP promotes DNA end

resection[J].Nature，2007，450(7169)：509-514.

[21] Nimonkar AV，Genschel J，Kinoshita E，etal.BLM-DNA2-RPAMRN and EXO1-BLM-RPA-MRN constitute two DNA end resectionmachineries forhuman DNA break repair[J].Genes Dev，2011，25(4)：350-362.

[22]huertas P.DNA resection in eukaryotes：decidinghow tofix the break[J].Nat Structmol Biol，2010，17(1)：11-16.

[23]moynahanmE，Jasinm.Mitotichomologous recombinationmaintains genomic stability and suppresses tumorigenesis[J].Nat Revmol Cell Biol，2010，11(3)：196-207.

[24] Chapman JR，TaylormR，Boulton SJ.Playing the end game：DNA double-strand break repair pathway choice[J].Mol Cell，2012，47(4)：497-510.

[25] Durant ST，Nickoloff JA.Good timing in the cell cycle for precise DNA repair by BRCA1[J].Cell Cycle，2005，4(9)：1216-1222.

[26] Bau DT，Mau YC，Shen CY.The role of BRCA1 in non-homologous end-joining[J].Cancer Lett，2006，240(1)：1-8.

[27] YangeS，Xia F.BRCA1 16 years later：DNA damage-induced BRCA1 shuttling[J].FEBS J，2010，277(15)：3079-3085.

[28] Jiang G，Plo I，Wang T，etal.BRCA1-Ku80 protein interaction enhances end-joining fidelity of chromosomal double-strand breaksin the G1 phase of the c ell c ycle[J].J B iol Chem，2013，288(13)：8966-8976.

[29] Wangh，Zeng ZC，Bui TA，etal.Nonhomologous end-joining of ionizing radiation-induced DNA double-stranded breaksinhuman tumor cells deficient in BRCA1 or BRCA2[J].Cancer Res，2001，61(1)：270-277.

[30] Bunting SF，Callen E，Wong N，etal.53BP1 inhibitshomologous recombination in Brca1-deficient cells by blocking resectionof DNA breaks[J].Cell，2010，141(2)：243-254.

[31] Escribano-Diaz C，Orthwein A，F(xiàn)radet-Turcotte A，etal.A cell cycle-dependent regulatory circuit composed of 53BP1-RIF1 and BRCA1-CtIP controls DNA repair pathway choice[J].Mol Cell，2013，49(5)：872-883.

[32] Davis AJ，Chi L，So S，etal.BRCA1modulates the autophosphorylation status of DNA-PKcsin S phase of the cell cycle[J].Nucleic Acids Res，2014，42(18)：11487-11501.

[33] Saha J，Davis AJ.Unsolvedmystery：the role of BRCA1 in DNA endjoining[J].J Radiat Res，2016，57 Suppl 1：i18-i24

[34]moynahanmE，Chiu JW，Koller BH，etal.BRCA1 controlshomologydirected DNA repair[J].Mol Cell，1999，4(4)：511-518.

[35]huenmS，Sy SM，Chen J.BRCA1 and its toolbox for themaintenance of genome integrity[J].Nat Revmol Cell Biol，2010，11(2)：138-148.[36] Yu X，Chen J.DNA damage-induced cell cycle checkpoint control requires CtIP，a phosphorylation-dependent binding partnerof BRCA1 C-terminal domains[J].Mol Cell Biol，2004，24(21)：9478-9486.

[37] Chen L，Nievera CJ，Lee AY，etal.Cell cycle-dependent complex formationof BRCA1.CtIP.MRN isimportant for DNA double-strand break repair[J].J Biol Chem，2008，283(12)：7713-7720.

[38] Wangh，Shao Z，Shi LZ，etal.CtIP protein dimerization is critical for its recruitment to chromosomal DNA double-stranded breaks[J].J Biol Chem，2012，287(25)：21471-21480.

[39] Scully R，Chen J，Plug A，etal.Associationof BRCA1 with Rad51 inmitotic andmeiotic cells[J].Cell，1997，88(2)：265-275.

[40] Garcia-Higuera I，Taniguchi T，Ganesan S，etal.Interactionof the Fanconi anemia proteins and BRCA1 in a common pathway[J].Mol Cell，2001，7(2)：249-262.

[41] Bhattacharyya A，Ear US，Koller BH，etal.The breast cancer susceptibility gene BRCA1 is required for subnuclear assembly of Rad51 and survival following treatment with the DNA cross-linking agent cisplatin[J].J Biol Chem，2000，275(31)：23899-23903.

[42] Cantor SB，Andreassen PR.Assessing the link between BACH1 and BRCA1 in the FA pathway[J].Cell Cycle，2006，5(2)：164-167.

[43] Joukov V，Chen J，F(xiàn)ox EA，etal.Functional communication between endogenous BRCA1 and its partner，BARD1，during Xenopus laevis development[J].P roc N atl A cad S ci U SA，2001，98(21)：12078-12083.

[44] Ayi TC，Tsan JT，Hwang LY，etal.Conservationof function and primary structure in the BRCA1-associated RING domain (BARD1) protein[J].Oncogene，1998，17(16)：2143-2148.

[45] Yu X，Chini CC，Hem，etal.The BRCT domain is a phosphoprotein binding domain[J].Science，2003，302(5645)：639-642.

[46]morris JR，Solomon E.BRCA1 ：BARD1 induces the formationof conjugated ubiquitin structures，dependenton K6 of ubiquitin，in cells during DNA replication and repair[J].Hummol Genet，2004，13(8)：807-817.

[47] Kimh，Huang J，Chen J.CCDC98 is a BRCA1-BRCT domainbinding protein involved in the DNA damage response[J].Nat Structmol Biol，2007，14(8)：710-715.

[48] Wang B，Matsuoka S，Ballif BA，etal.Abraxas and RAP80 form a BRCA1 protein complex required for the DNA damage response[J].Science，2007，316(5828)：1194-1198.

[49] Kimh，Chen J，Yu X.Ubiquitin-binding protein RAP80mediates BRCA1-dependent DNA damage response[J].Science，2007，316 (5828)：1202-1205.

[50] Coleman KA，Greenberg RA.The BRCA1-RAP80 complex regulates DNA repairmechanism utilization by restrictingend resection[J].J Biol Chem，2011，286(15)：13669-13680.

[51] Xia B，Sheng Q，Nakanishi K，etal.Control of BRCA2 cellular and clinical functions by a nuclear partner，PALB2[J].Mol Cell，2006，22(6)：719-729.

[52] Sy SM，HuenmS，Chen J.PALB2 is an integral componentof the BRCA complex required forhomologous recombination repair[J].Proc Natl Acad Sci USA，2009，106(17)：7155-7160.

[53] Cantor SB，Bell DW，Ganesan S，etal.BACH1，a novelhelicaselike protein，interacts directly with BRCA1 and contributes to its DNA repair function[J].Cell，2001，105(1)：149-160.

[54] Shiozaki EN，Gu L，Yan N，etal.Structure of the BRCT repeats of BRCA1 bound to a BACH1 phosphopeptide：implications for signaling[J].Mol Cell，2004，14(3)：405-412.

[55] Baumann P，Benson FE，West SC.Human Rad51 protein promotes ATP-dependenthomologous pairing and strand transfer reactionsin vitro[J].Cell，1996，87(4)：757-766.

[56] Zhangh，Liuh，Chen Y，etal.A cell cycle-dependent BRCA1-UHRF1 cascade regulates DNA double-strand break repair pathway choice[J].Nat Commun，2016，7：10201.

R344+.1

A

1004-616X(2016)06-0494-04

1 0.3969/j.issn.1004-616x.2016.06.018

2016-06-17；

2016-10-11

國家自然科學(xué)基金(81172692，81373036，81502752)；浙江省自然科學(xué)基金( LQ16H220001)

作者信息： 池林峰，E-mail：linfengchi2014@163.com。*通信作者，楊 軍， E-mail：gastate@zju.edu.cn