賀林華，周志強(qiáng)

（1.湖南司法警官職業(yè)學(xué)院執(zhí)行系，湖南 長沙 410131；2.湖南省腦科醫(yī)院病室戒毒科，湖南 長沙 410007）

美沙酮替代治療者乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒感染情況及其基因型的流行情況分析*

賀林華1，周志強(qiáng)2

（1.湖南司法警官職業(yè)學(xué)院執(zhí)行系，湖南 長沙 410131；2.湖南省腦科醫(yī)院病室戒毒科，湖南 長沙 410007）

目的了解美沙酮替代治療人群的乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）感染狀況及其基因型流行情況。方法選取2013年1月-2016年1月湖南省疾控中心具有靜脈吸毒史的美沙酮門診治療者血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行HBV表面抗原和抗HCV抗體的檢測，采用聚合酶鏈反應(yīng)熒光探針法檢測HBV DNA和HCV RNA載量。采用HBV和HCV基因分型檢測試劑盒鑒定HBV和HCV基因型。并對美沙酮門診治療者進(jìn)行問卷調(diào)查。結(jié)果美沙酮門診治療組及對照組中，男性血清HBV、HCV，以及HBV合并HCV的陽性檢出率與女性比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。美沙酮門診治療組及對照組中，多個性伴侶血清HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率高于單個性伴侶或無性伴侶，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。美沙酮門診治療組及對照組中，不同年齡組血清HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率不同（P＜0.05），＞45歲人群的陽性檢出率最高。美沙酮門診治療者在不同性別、年齡及性伴侶個數(shù)的中，HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率均較對照組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。美沙酮門診治療組中，靜脈注射吸毒者血清HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率均高于口吸毒品者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。582例研究對象中，HBV成功分型104例，檢測結(jié)果顯示，B型72例（69.23%），C型11例（10.58%），B/C混合型13例（12.50%），非B非C型8例（7.69%）。HCV成功分型389例，檢測結(jié)果顯示，1a型24例（6.17%），2a型21例（5.40%），6a型184例（48.58%），1b型32例（8.22%），3a型45例（11.57%）；3b型38例（9.77%），以及一定程度的混合感染。結(jié)論 美沙酮門診在治組較對照組具有高HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率；美沙酮門診治療人群中，HBV和HCV的易感因素為多個性伴侶、高齡及靜脈注射吸毒，而性別不是HBV和HCV的易感因素。該人群中HBV感染以B型為主，HCV感染以6a型為主。

美沙酮；基因型；HBV；HCV；感染

毒品問題是嚴(yán)重的社會問題，毒品的泛濫更導(dǎo)致各種血源性病毒感染。美沙酮社區(qū)維持治療是目前國內(nèi)外最常用的針對海洛因等阿片類毒品依賴者，采取的一種替代治療方法，是國際公認(rèn)的治療海洛因成癮最有效的方法[1]。在海洛因等阿片類毒品依賴人群中，有相當(dāng)一部分人存在各類血行傳播疾病，如乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）及丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）。為了解美沙酮門診治療人群的HBV和HCV感染率及其基因分型，本研究選取治療者進(jìn)行血清學(xué)標(biāo)志物檢測、問卷調(diào)查及基因分型研究，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1研究對象

選取2013年1月-2016年1月湖南省疾病控制中心具有靜脈吸毒史的美沙酮門診治療者，采用統(tǒng)一規(guī)定使用的社區(qū)藥物治療。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡≥18歲；②具有靜脈吸毒史；③參與美沙酮維持治療（methadone maintence treatment，MTT）≥6個月；④有完全民事行為能力；⑤本地戶籍或常駐≥6個月的外籍人員；⑥簽署知情同意；⑦自愿申請戒毒者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①非首次接受美沙酮治療；②年齡＜18歲；③拒不合作者。另選取580例在省疾控中心進(jìn)行體檢的健康志愿者作為對照組，男性380例，女性200例。本研究通過中國疾病預(yù)防控制中心性病艾滋病預(yù)防控制中心倫理委員會倫理審核。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1樣本收集采集外周靜脈血10 ml，離心分離血漿存于肝素抗凝管，置入-80℃冰箱冷凍保存，用于檢測HCV抗體、乙型肝炎表面抗原，以及病毒核酸。

1.2.2HBV和HCV感染指標(biāo)檢測及判定采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測抗HCV抗體、HBV表面抗原，由山東艾德康全自動酶聯(lián)免疫分析儀檢測，試劑由廈門英科新創(chuàng)科技有限公司提供。采用聚合酶鏈反應(yīng)熒光探針法檢測HBV DNA和HCV RNA載量，由7300基因擴(kuò)增儀（美國ABI公司）進(jìn)行擴(kuò)增，試劑由廈門英科新創(chuàng)科技有限公司提供。操作方法和結(jié)果判定均嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。HBV表面抗原和/或HBV DNA陽性判定為HBV感染；抗HCV抗體和/或HCV RNA陽性判定為HCV感染。

1.2.3問卷調(diào)查由經(jīng)過培訓(xùn)的美沙酮?？漆t(yī)生根據(jù)吸毒者的特征，對上述符合條件者進(jìn)行問卷調(diào)查并登記備案。問卷調(diào)查在單獨(dú)安靜的房間內(nèi)采用一對一的方式進(jìn)行。調(diào)查內(nèi)容包括年齡、性別、民族、吸毒方式、受教育程度、性行為及性伴侶情況、吸毒時間、毒品濫用及參加維持治療情況等。

1.2.4HBV和HCV基因分型采用HBV和HCV基因分型檢測試劑盒（上海之江生物科技有限公司），檢測方法嚴(yán)格按試劑盒操作說明進(jìn)行。測序結(jié)束之后，應(yīng)用美國國家生物技術(shù)信息中心病毒基因分型工具及MEGA 4.0軟件，對核苷酸序列進(jìn)行系統(tǒng)分析以鑒定HBV和HCV基因型。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用Epi Data 3.10軟件對調(diào)查表和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行錄入并建立數(shù)據(jù)庫，采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率表示，用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1一般情況

美沙酮門診治療組582例，對照組580例，兩組在年齡、性別方面比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。治療組平均受教育程度、固定收入、體重與對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其中治療組平均受教育程度較對照組偏低，有固定收入者較對照組所占比例少，體重較對照組輕。見表1。

表1　兩組一般情況比較

2.2兩組不同性別患者HBV、HCV檢出情況

美沙酮門診治療者男性與女性血清HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），對照組男性與女性血清HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），說明在美沙酮門診治療人群及對照組中，性別不是HBV、HCV的易感因素。美沙酮門診治療組血清HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率分別為22.51%、69.93%和16.15%，對照組血清HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率分別為15.34%、2.24%和1.38%，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），說明美沙酮門診治療者HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率均較對照組高。見表2。

2.3兩組不同性伴侶患者HBV、HCV檢出情況

美沙酮門診治療組均有性行為，其中多個性伴侶血清HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率分別為25.28%、76.31%和16.40%，單個性伴侶血清HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率分別為13.97%、50.35%和15.38%，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），美沙酮門診治療組多個性伴侶人群血清HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率高于單個性伴侶人群。對照組多個性伴侶血清HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率分別為27.10%、6.54%和3.74%，單個性伴侶血清HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率分別為13.11%、1.29%和1.03%，無性伴侶血清HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率分別為10.71%、1.19%和0.00%，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），對照組多個性伴侶血清HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率高于無性伴侶人群及單個性伴侶人群。美沙酮門診治療組與對照組不同性伴侶個數(shù)HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率比較，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），美沙酮門診治療組均較對照組高。見表3。

2.4兩組不同年齡患者HBV、HCV檢出情況

美沙酮門診治療組人群以25歲～45歲的中壯年為主，不同年齡組血清HBV、HCV、HBV合并HCV的陽性檢出率不同，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），美沙酮門診治療組＞45歲的人群血清HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率最高分別為62.96%、87.04%和46.30%。對照組人群年齡構(gòu)成與美沙酮門診治療組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），不同年齡組血清HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率不同，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），對照組＞45歲人群血清HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率最高分別為42.23%、5.80%和4.35%。美沙酮門診治療組與對照組不同年齡HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率比較，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），美沙酮門診治療組均較對照組高。見表4。

2.5美沙酮門診治療者不同吸毒方式HBV、HCV檢出情況

582例吸毒者中，靜脈注射吸毒者369例（63.40%），口吸毒品者213例（36.60%）。美沙酮門診治療組中，靜脈注射吸毒者血清HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率分別為31.17%、80.76%和19.78%；口吸毒品者血清HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率分別為16.43%、51.17%和9.86%，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），靜脈注射吸毒者陽性檢出率均高于口吸毒品者。見表5。

2.6美沙酮門診治療者HBV和HCV基因分型

582例研究對象中，HBV RNA陽性者131例，進(jìn)行HBV分型檢測結(jié)果顯示，成功分型104例，B型72例（69.23%），C型11例（10.58%），B/C混合型13例（12.50%），非B非C型8例（7.69%）。

582例研究對象中，HCV RNA陽性者407例，進(jìn)行HCV分型檢測結(jié)果顯示，成功分型389例，1a型24例（6.17%），2a型21例（5.40%），6a型184例（48.58%），1b型32例（8.22%），3a型45例（11.57%），3b型38例（9.77%），以及一定程度的混合感染。1b/ 3a混合型11例（2.83%），1b/3b混合型10例（2.57%），2a/3a混合型3例（0.77），2b/3a混合型5例（1.29%），1a/1b混合型2例（0.51%），6a/2a混合型6例（1.54%），3a/1a混合型3例（0.77%），6a/3b混合型5例（1.28%）。

表2　兩組不同性別患者HBV、HCV檢出情況

表3　兩組不同性伴侶患者HBV、HCV檢出情況

表4　兩組不同年齡患者HBV、HCV檢出情況

表5　美沙酮門診治療者不同吸毒方式HBV、HCV檢出情況

3 討論

在我國，海洛因等阿片類毒品的濫用已成為嚴(yán)重威脅人民群眾健康的社會問題。吸毒人群是傳染病感染的極危險的社會傳染源群體。本研究調(diào)查顯示，美沙酮門診治療組平均受教育程度偏低，有固定收入者較對照組所占比例少，體重較對照組輕，與國內(nèi)其他報道相符[2]。美沙酮門診治療者和對照組中，男性與女性血清HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），說明在美沙酮門診治療人群中，性別不是HBV和HCV的易感因素，與牟懷德等[3]研究結(jié)果一致。隨著性伴侶個數(shù)增加，HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率呈上升趨勢，與李淇坪等[4]研究結(jié)果一致，提示性行為可增加美沙酮門診治療人群HBV和HCV感染率。血清HBV、HCV、HBV合并HCV的陽性檢出率在＞45歲的人群的陽性檢出率最高，說明高齡組有較大的HBV和HCV感染風(fēng)險。美沙酮門診治療者在不同性別、年齡及性伴侶個數(shù)的研究中，HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率均較對照組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。美沙酮門診治療組中靜脈注射吸毒者血清HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率均高于口吸毒品者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），與文獻(xiàn)報道相符。SANDERSBUELL[5]、ZHANG等[6]研究顯示，注射吸毒人群中，HCV的總體感染率為61.4%，互相感染的主要原因是共用針管。

HBV基因型可分為A～H8型。有報道指出，在我國2a型在北方多見，1b型在南方多見[7-8]，D型一般可見于新疆、西藏等少數(shù)民族地區(qū)，而E、F、G、H等基因型在我國范圍內(nèi)尚未發(fā)現(xiàn)[9]。HBV的不同基因型具有不同的生物學(xué)特性，包括致病力及對抗病毒藥物的治療反應(yīng)等[10]，其中以B型死亡人數(shù)和死亡率均最高。本研究發(fā)現(xiàn)，582例研究對象中，HBV RNA陽性者131例。進(jìn)行HBV分型檢測結(jié)果顯示，成功分型104例，B型72例（69.23%），C型11例（10.58%），B/C混合型13例（12.50%），非B非C型8例（7.69%）。說明本省美沙酮門診治療者以B型居多，臨床上亦可對這一結(jié)果進(jìn)行針對性治療及研發(fā)相關(guān)藥物。HCV基因型可分為1a、1b、2a、2b、3a、3b、4a和6a。JU等[11]研究表明，6a型和3型多見于靜脈吸毒人群。YAN等[12]報道，中國西南部吸毒人群HCV感染以3b和6a為主要基因型。本研究發(fā)現(xiàn)，582例研究對象中，HCV RNA陽性者407例。進(jìn)行HCV分型檢測結(jié)果顯示，成功分型389例，1a型24例（6.17%），2a型21例（5.40%），6a型184例（48.58%），1b型32例（8.22%），3a型45例（11.57%）；3b型38例（9.77%）并存在一定程度的混合感染。表明本省美沙酮治療人群中HCV感染基因型以6a型為主。本研究中出現(xiàn)的少量混合型感染，如1b/3a混合型、1b/3b混合型、2a/3a混合型等，可能與人口流動和吸毒習(xí)慣相關(guān)。

綜上所述，本研究對本省美沙酮門診治療者HBV和HCV感染情況，以及HBV、HCV在吸毒人群中主要的優(yōu)勢基因型分布進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)美沙酮門診治療組較對照組具有高HBV、HCV及HBV合并HCV的陽性檢出率。其中多個性伴侶、高齡及靜脈注射吸毒是HBV和HCV的易感因素，而性別不是HBV和HCV的易感因素。美沙酮門診治療人群中，HBV感染以B型為主，HCV感染以6a型為主。本研究結(jié)果可為相關(guān)人群疾病的預(yù)防及控制提供數(shù)據(jù)支持，亦可對研究乙型肝炎及丙型肝炎的流行、HBV和HCV感染的分子生物學(xué)機(jī)制，以及對疾病的防控提供參考。本研究發(fā)現(xiàn)，吸毒人群HBV、HCV及HBV合并HCV感染率明顯高于普通人群，大部分吸毒人員免疫力處于低下狀態(tài)，并且對HBV、HCV的傳播途徑缺乏了解，不能有效抵御HBV及HCV的侵襲。若出現(xiàn)HCV合并HBV感染更易導(dǎo)致肝硬化發(fā)生，需要引起足夠重視[13]。在進(jìn)行美沙酮藥物治療的同時，需要逐步由單一的提供美沙酮進(jìn)行藥物治療調(diào)整為同時提供宣傳教育、心理咨詢，以及就業(yè)培訓(xùn)等的綜合治療[14]。例如重慶市在38家美沙酮門診中，設(shè)立專門的心理干預(yù)室，對吸毒者家庭和社會功能的恢復(fù)起積極作用[15]。專業(yè)人員對美沙酮藥物維持治療點(diǎn)的患者進(jìn)行連續(xù)性健康教育，實(shí)行有效干預(yù)措施，能最大程度上減少社會危害[16]。

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（童穎丹 編輯）

Prevalence of hepatitis B virus and hepatitis C virus infections and genotypes in Methadone replacement therapy*

Lin-hua He1,Zhi-qiang Zhou2
(1.Department of Implementation,Hunan Judicial Police Vocational College,Changsha, Hunan 410131,China;2.Department of Detoxification,Hunan Brain Hospital, Changsha,Hunan 410007,China)

Objective To investigate the infection status and genotype epidemic condition of HBV and HCV among drug users using Methadone replacement therapy.Methods Serum samples were collected from the patients with intravenous drug use from January 2013 to January 2016,who were treated in Methadone clinics in the Centers for Disease Control and Prevention in our province.ELISA was applied to detect HBV surface antigen and anti-HCV antibody.PCR-fluorescence probe method was applied to detect HBV DNA andHCV RNA load.HCV and HBV genotyping detection kits were applied to identify genotypes of HBV and HCV.A questionnaire survey was conducted in the drug users receiving Methadone replacement therapy. Results There was no statistical difference in the positive rate of HBV,HCV or HBV combined with HCV between male and female(P＞0.05).The positive rates of HBV,HCV and HBV combined with HCV in the drug users with multiple sexual partners were significantly higher than those in the drug users with single sexual partner or without sexual partner in both Methadone-treatment and control groups(P＜0.05).In the Methadone-treatment group and the control group,the positive rates of HBV,HCV and HBV combined with HCV were significantly different in the different-age groups,the positive rate was highest in the group older than 45 years.In the study of different sex,age and numeral sexual partners,the positive rates of HBV, HCV and HBV combined with HCV in the Methadone group were significantly higher than those in the control group(P＜0.05).In the Methadone group,the positive rates of HBV,HCV and HBV combined with HCV in the intravenous drug users were significantly higher than those in the oral drug users(P＜0.05).HBV gene typing showed that among the 582 samples,there were 72 samples of genotype B(69.23%),11 samples of genotype C(10.58%),13 samples of mixed genotype B/C(12.50%)and 8 samples of neither genotype B or C(7.69%).HCV gene typing showed that there were 24 samples of genotype 1a(6.17%),21 samples of genotype 2a(5.40%),184 samples of genotype 6a(48.58%),32 samples of genotype 1b(8.22%),45 samples of genotype 3a(11.57%),38 samples of genotype 3b(9.77%)and a certain degree of mixed infection. Conclusions The positive rates of HBV,HCV and HBV combined with HCV in the drug users receiving Methadone treatment are higher than those in the control group.The multiple sexual partners,elder age and intravenous drug injection are the risk factors of HBV and HCV infections among the drug users taking Methadone.Sex is not a predisposing factor of HBV or HCV infection.The main genotype of HBV infection is B and the main genotype of HCV infection is 6a among the drug users using Methadone replacement therapy.

Methadone;genotype;hepatitis B virus;hepatitis C virus;infection

R512.6

B

10.3969/j.issn.1005-8982.2016.21.013

1005-8982（2016）21-0062-06

2016-08-09

2015年湖南省教育廳科學(xué)研究項(xiàng)目（No：15C0897）