王慶武，蘭玉菲，崔曉，安秀榮

（山東省泰安市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，山東泰安271000）

側(cè)耳屬3個種菌絲培養(yǎng)特性比較*

王慶武，蘭玉菲，崔曉，安秀榮

（山東省泰安市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，山東泰安271000）

通過研究不同營養(yǎng)和環(huán)境條件對側(cè)耳屬3個主要栽培種菌株菌絲生長速度和生長勢培養(yǎng)特性的影響，明確了側(cè)耳屬3個種菌株菌絲生長的最適溫度，平菇為25℃、杏鮑菇為30℃、秀珍菇為25℃；最適pH值，平菇為6～7、杏鮑菇和秀珍菇均為6；最適碳源，平菇為果糖、杏鮑菇為淀粉、秀珍菇為葡萄糖；最適氮源，平菇和秀珍菇為酵母膏、杏鮑菇為牛肉膏。

側(cè)耳屬；培養(yǎng)特性；溫度；pH值；碳氮源

側(cè)耳屬（Pleurotus spp.）隸屬于真菌門（Eumycophyta）擔(dān)子菌綱（Basidiomycetes）傘菌目（Agaricales）側(cè)耳科（Pleurotaceae）[1]，目前已知有31個種[2]。其中平菇（Pleurotus osreatus）、杏鮑菇(Pleurotus eryngii)、秀珍菇(Pleurotus pulmonarius)的栽培最為廣泛，是目前我國食用菌栽培量最大、發(fā)展最快、產(chǎn)量最高、分布最廣的一個菌類[3]，市場反應(yīng)較好[4]，栽培面積逐年增加[5]。但關(guān)于側(cè)耳屬3個主要種的培養(yǎng)特性比較研究甚少。為了掌握側(cè)耳屬3個主要栽培種的培養(yǎng)特性，了解目的菌株的生長發(fā)育特點[2]，我們對其菌絲培養(yǎng)的適宜營養(yǎng)源、溫度和pH值條件進行了相關(guān)研究，旨在為側(cè)耳屬3個種主要菌株遺傳育種及規(guī)?；?、標準化栽培研究提供科學(xué)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1試驗材料

1.1.1供試菌株

泰安市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院自主保存菌株。

1.1.2基礎(chǔ)培養(yǎng)基

溫度、pH值篩選采用PDA培養(yǎng)基。碳源基礎(chǔ)培養(yǎng)基：蛋白胨0.2%、KH2PO40.1%、MgSO40.05%、瓊脂2%。

氮源基礎(chǔ)培養(yǎng)基：葡萄糖2%、KH2PO40.1%、MgSO40.05%、瓊脂2%。

1.1.3碳源

碳源分別為葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖、果糖、淀粉。

1.1.4氮源

氮源分別為蛋白胨、牛肉膏、(NH4)2SO4、酵母膏、NH4NO3、麥麩。

1.2試驗方法

1.2.1適宜溫度試驗

制作直徑9 cm的PDA平板培養(yǎng)基，每平板培養(yǎng)基定量20 mL，接入活化好的9 mm2母種菌塊，溫度設(shè)15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、40℃共6個處理，每處理重復(fù)5次，置于恒溫培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng)。

1.2.2適宜pH值試驗

制作直徑9 cm的PDA平板培養(yǎng)基，每平板培養(yǎng)基定量20 mL，接入活化好的9 mm2母種菌塊，pH值設(shè)4、5、6、7、8、9、10共7個處理，每處理重復(fù)5次，置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng)。

1.2.3適宜碳源試驗

在碳源基礎(chǔ)培養(yǎng)基（CK）中添加2%的不同碳源，組成供試培養(yǎng)基，制作直徑9 cm平板，每平板培養(yǎng)基定量20 mL，接入活化好的9 mm2母種菌塊，置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng)，每處理重復(fù)5次。

1.2.4適宜氮源試驗

在氮源基礎(chǔ)培養(yǎng)基（CK）中添加0.2%的不同氮源，組成供試培養(yǎng)基，方法同1.2.3。

1.2.5菌落測量方法

各處理待生長最快的菌絲將要長滿平板時停止培養(yǎng)，采用“十”字交叉法精確測量菌落直徑，計算各處理菌絲日生長速度。

1.2.6統(tǒng)計分析

以菌絲生長速度和長勢為衡量指標[6]，分析各處理對菌絲生長的影響。

2　結(jié)果與分析

2.1側(cè)耳屬3個種菌株的適宜溫度

不同溫度對側(cè)耳屬3個種菌株菌絲生長速度及生長勢的影響見圖1、表1。

圖1　不同溫度對側(cè)耳屬菌株菌絲生長速度的影響Fig.1Influence of different temperature on mycelial growth rate of Pleurotus

表1　不同溫度對側(cè)耳屬3個種菌株菌絲生長勢的影響Tab.1Influence of different temperature on mycelial growth vigor of Pleurotus

試驗結(jié)果表明，側(cè)耳屬3個種菌株的菌絲在15℃～40℃條件下均可存活，25℃～30℃菌絲生長較快，20℃以下、35℃以上菌絲生長較慢；40℃菌絲生長極慢，但不致死，菌絲長勢差。平菇、秀珍菇菌絲在25℃生長最快，長勢最好；杏鮑菇菌絲在30℃生長最快，長勢最好。

2.2側(cè)耳屬3個種菌株的適宜pH值

不同pH值對側(cè)耳屬3個種菌株菌絲生長速度及生長勢的影響見圖2、表2。

圖2　不同pH值對側(cè)耳屬菌株菌絲生長的影響Fig.2Influence of different pH on mycelial growth rate of Pleurotus

表2　不同pH值對側(cè)耳屬3個種菌株菌絲生長勢的影響Tab.2Influence of different pH on mycelial growth vigor of Pleurotus

試驗結(jié)果表明，側(cè)耳屬3個種菌株菌絲在不同pH值條件下均能生長，但生長速度和長勢均不同。平菇菌株菌絲適宜pH為6～7，菌絲生長速度快，且菌絲長勢好；杏鮑菇菌株菌絲最適宜pH為6，菌絲生長快，長勢好；秀珍菇菌株菌絲適宜pH為6，菌絲生長快，長勢好。

2.3側(cè)耳屬3個種菌株的適宜碳源

不同碳源對側(cè)耳屬3個種菌株菌絲生長速度及生長勢的影響見圖3、表3。

圖3　不同碳源對側(cè)耳屬菌株菌絲生長的影響Fig.3Influence of different carbon source on mycelial growth rate of Pleurotus

表3　不同碳源對側(cè)耳屬3個種菌株菌絲生長勢的影響Tab.3Influence of different carbon source on mycelial growth vigor of Pleurotus

試驗結(jié)果表明，側(cè)耳屬3個種菌株菌絲在不同碳源培養(yǎng)基上生長速度和長勢均不同。綜合菌絲生長速度和長勢，平菇最適宜碳源為果糖，蔗糖次之，乳糖最差；杏鮑菇最適宜碳源為淀粉，葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、果糖次之，乳糖最差；秀珍菇最適宜碳源為葡萄糖，淀粉、麥芽糖次之，乳糖最差。

2.4側(cè)耳屬3個種菌株的適宜氮源

不同氮源對側(cè)耳屬3個種菌株菌絲生長速度及長勢的影響見圖4、表4。

表4　不同氮源對側(cè)耳屬3個種菌株菌絲生長勢的影響Tab.4Influence of different nitrogen source on mycelial growth vigor of Pleurotus

圖4　不同氮源對側(cè)耳屬菌株菌絲生長的影響Fig.4Influence of different nitrogen source on mycelial growth rate of Pleurotus

試驗結(jié)果表明，側(cè)耳屬3個種菌株菌絲在不同氮源培養(yǎng)基上生長速度和長勢均不同。綜合菌絲生長速度和長勢，平菇最適宜氮源為酵母膏，牛肉膏次之，NH4NO3最差；杏鮑菇最適宜氮源為牛肉膏，酵母膏次之，NH4NO3最差；秀珍菇最適宜氮源為酵母膏，蛋白胨次之，NH4NO3最差。

3　結(jié)論與討論

本試驗表明，溫度對側(cè)耳屬3個種菌株的菌絲生長速度的影響特別顯著，在溫度較低和較高的環(huán)境下均不適宜生長，較適宜的溫度范圍為25℃～30℃，這與哈申吐力古爾[7]研究得出的平菇最佳溫度為24℃～28℃、馮志勇等[8]研究得出的秀珍菇最佳溫度為25℃結(jié)果基本一致；郭美英[9]報道杏鮑菇適宜溫度為20℃～28℃，最適溫度為24℃，而本試驗最適溫度為30℃，差異的產(chǎn)生可能與供試菌株不同有關(guān)。

微生物生長和生物合成都有其最適和能夠耐受的pH值范圍，pH值過低或過高均不利于側(cè)耳屬菌株菌絲生長，側(cè)耳屬3個種菌株較適宜菌絲生長pH值為6～7；平菇菌絲在偏堿條件下比在偏酸條件下生長速度快，長勢也好，這與哈申吐力古爾[7]研究的基本相符；杏鮑菇菌株菌絲在pH值5～10范圍內(nèi)生長速度差異不大，表明其適應(yīng)范圍廣；秀珍菇適宜pH為6，與馮志勇等[8]研究的相一致；在相同pH值條件下，平菇菌株菌絲生長速度明顯快于杏鮑菇和秀珍菇。

側(cè)耳屬3個種菌株對碳氮源的利用范圍較廣，但利用能力有一定的差異；在無碳源、氮源培養(yǎng)基上，側(cè)耳屬3個種菌株菌絲長勢均最差，生長速度慢，說明菌絲生長需要適宜的碳源、氮源。

以乳糖作為碳源的側(cè)耳屬3個種菌株菌絲生長速度慢，長勢一般，均不利于菌絲的生長，不宜作為側(cè)耳屬菌株碳源；杏鮑菇菌絲對碳源的利用能力較強，在6種碳源培養(yǎng)基上生長速度和長勢差異不大，最佳碳源為淀粉，這與韓春華[10]研究結(jié)果相一致；馮志勇等[8]報導(dǎo)的秀珍菇適宜碳源為淀粉，而本試驗則為淀粉次之，兩者結(jié)果差異不大；薛志明[11]報導(dǎo)的平菇最適碳源為葡萄糖，果糖一般，卻與本試驗結(jié)果相反。

有機氮較無機氮菌絲生長速度快、長勢好，說明有機氮比無機氮更有利于菌絲的生長，這可能是因為有機氮還可以作為碳源來利用，可促進營養(yǎng)平衡及物質(zhì)轉(zhuǎn)化[12]。秀珍菇最佳氮源為酵母膏，這與李偉平[13]、馮志勇等[8]的研究結(jié)果一致；韓春華[10]認為杏鮑菇最適氮源為酵母膏和蛋白胨，這與本試驗牛肉膏、酵母膏、蛋白胨均可作為杏鮑菇氮源的結(jié)果差別不大；薛志明[11]報導(dǎo)的平菇液體培養(yǎng)適宜氮源為麥麩，而本試驗中平菇在含麥麩培養(yǎng)基上的長勢差。NH4NO3均不利于側(cè)耳屬3個種菌株菌絲的生長，不宜作為氮源。

[1]卯曉嵐.中國經(jīng)濟真菌[M].北京：科學(xué)出版社，1998:1-762.

[2]盧啟泉.四類平菇種質(zhì)資源的分子標記分析[D].福州：福建農(nóng)林大學(xué)，2007.

[3]陳文良.我國食用菌的生產(chǎn)現(xiàn)狀及發(fā)展前景[J].食用菌市場信息，2005（7）：5-6.

[4]鄭斌.木耳屬種質(zhì)資源評價的研究[D].長春：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，2012.

[5]肖玉珍，許修宏，李長林.食用菌栽培技術(shù)[M].哈爾濱：東北林業(yè)大學(xué)出版社，2001.

[6]鄭少華，姜奉華.試驗設(shè)計與數(shù)據(jù)處理（第一版）[M].北京：中國建材工業(yè)出版社，2004.

[7]哈申吐力古爾，白福林.平菇的生物學(xué)特性[J].內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)科技，2009（6）：79-80.

[8]馮志勇，王志強，郭力剛，等.秀珍菇生物學(xué)特性研究[J].食用菌學(xué)報，2003，10（3）：11-16.

[9]郭美英.珍稀食用菌杏鮑菇生物學(xué)特性的研究[J].福建農(nóng)業(yè)學(xué)報，1998，13（3）：44-49.

[10]韓春華.杏鮑菇碳氮源營養(yǎng)生理的研究[D].保定：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)，2003.

[11]薛志明.平菇液體培養(yǎng)及接種自動化技術(shù)研究[D].鎮(zhèn)江：江蘇大學(xué)，2008.

[12]張松.食用菌學(xué)（第一版）[M].廣州：華南理工大學(xué)出版社，2000.

[13]李偉平.碳氮營養(yǎng)對秀珍菇生長發(fā)育及胞外媒活性的影響[D].保定：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)，2007.

Cultural Characteristic on Three Strains of Pleurotus

WANG Qing-wu,LAN Yu-fei,CUI Xiao,AN Xiu-rong
(Tai'an Academy of Agricultural Sciences,Tai'an 271000,China)

Based on the study of the mycelial growth rate and growth vigor of three major cultivated strains of Pleurotus in different nutrient and environmental conditions,the result showed that optimum temperature is 25℃for Pleurotus osreatus,30℃for Pleurotus eryngii，25℃for Pleurotus pulmonarius.The range of pH is 6～7 for P.osreatus，6 for P.eryngii and P.pulmonarius. The optimum carbon is fructose for P.osreatus,starch for P.eryngii,glucose for P.pulmonarius.The optimum nitrogen is yeast extract for P.osreatus and P.pulmonarius,beef extract for P.eryngii.

Pleurotus;cultural characteristic;temperature;pH;carbon and nitrogen source

S646.1

A

1003-8310（2016）04-0043-04

10.13629/j.cnki.53-1054.2016.04.011

國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)（食用菌）產(chǎn)業(yè)體系建設(shè)專項（CARS-24）；山東省食用菌創(chuàng)新團隊病蟲害防控崗位（SDAIT-11-011-05）；泰安市科技發(fā)展計劃項目（201440774-22B）。

王慶武（1967-），男，本科，農(nóng)藝師，主要從事食（藥）用菌育種及栽培技術(shù)推廣研究。E-mail:qw99@163.com

2016-06-01