殷惠　陳志芳　馬德高

【摘 要】在水體污染監(jiān)測中糞大腸菌群為其指示菌，對現(xiàn)階段水質檢測有著重要的作用。因此，在進行水質檢測是選擇出快速、準確的糞大腸菌群檢測方法對于有效的方式疾病的發(fā)生于傳播有著關鍵性的意義。本文簡要介紹了酶底物法，并與與其他方法進行了比較，然后分析了酶底物法的應用及其前景，相信隨著酶底物法不斷推廣而具有更廣闊的應用范圍。

【關鍵詞】糞大腸菌群 酶底物法 環(huán)境監(jiān)測 應用研究

糞大腸菌群能夠在45℃左右的環(huán)境中生存，產氣產酸，其主要來源于人和動物的糞便，能夠導致腸道性疾病的傳播，是進行水質檢測的重要指標，所以，更好的優(yōu)化糞大腸菌群檢測有著較為重要的醫(yī)學意義。其中酶底物法為現(xiàn)階段糞大腸菌群檢測的新型方法之一，具有快速、精確及可靠的檢測優(yōu)勢，能夠及時的將水體的污染情況反應出來。

1 酶底物法解析

1.1 酶底物法介紹

酶底物法為利用糞大腸菌群在45℃左右生長過程中產生的半乳糖苷酶與葡萄糖醛酸酶，分解培養(yǎng)基中所含的葡萄糖醛酸與半乳糖苷，從而使整個培養(yǎng)基呈現(xiàn)出黃色與發(fā)生熒光反應，根據(jù)最終的陽性組合，查閱MPN表而得出糞大腸菌群的數(shù)量。

在實際操作的過程中，檢測人員首先應當根據(jù)污染的程度對需檢測的水樣進行適當性的稀釋，然后取100ml的水樣加入到無菌瓶中，再向其中加入科立得，搖勻，然后將其倒入97孔定量盤中，放置于45℃的培養(yǎng)箱中，連續(xù)培養(yǎng)24小時，最后根據(jù)實際的陽性孔數(shù)，通過查MPN表進行計算。

1.2酶底物法與其他方法比較

現(xiàn)階段我國使用的糞大腸菌群檢測方法主要為國外早期使用的實驗方法—濾膜法和MPN法為主，同時隨著現(xiàn)代化生物監(jiān)測技術的發(fā)展，紙片法、分子生物鑒定法及固定酶底物法在很多方面得到一定的應用，各種方法比較如表1所示。

從糞大腸菌群檢測的實驗操作方面來講，酶底物法采用了取藥封口的培養(yǎng)方式，相對于其他檢測方面過程較為簡單，降低了人為污染帶來的影響，特別是紙片法，其操作過程雖然也較為簡單，但是其操作過程中交易受到人為的污染，此外還需要進行確認實驗。其次，從實驗的結果方面來分析，酶底物法使用的97孔定量盤所包含的數(shù)表能夠達到近2400組，遠遠大于其他檢測方法，因此其檢測的結果更為準確。第三，酶底物法使用了酶技術對糞大腸菌群進行了檢測，出現(xiàn)假陽性與假陰性的現(xiàn)象非常少，這在很大程度上能夠提升糞大腸菌群檢測的準確性。

2酶底物法的應用

糞大腸菌群為一種衛(wèi)生學指標，在很多行業(yè)內均有著較為嚴格的要求，其中酶底物法在糞大腸菌群檢測標準中的應用如表2所示。

從上表2中可以看出，現(xiàn)階段我國對糞大腸菌群的檢測標準多數(shù)情況下為發(fā)酵法，并沒有對酶底物法進行規(guī)定性使用，由此可知，在今后進行糞大腸菌群的檢測時，將酶底物法應用到糞大腸菌群的檢測試驗中，在很大程度上能夠彌補我國在糞大腸菌群檢測方面使用酶底物法的空白，同時在很多程度上也為更好的提升我國糞大腸菌群的檢測的準確性打下了良好的基礎。

3酶底物法應用前景

酶底物法相對于其他的糞大腸菌群檢測方法操作較為簡單，所得結果也較為準確快速，在今后的環(huán)境監(jiān)測中有著較為廣泛的應用前景，主要表現(xiàn)在如下方面：

首先糞大腸菌群檢測為我國環(huán)境監(jiān)測的主要衛(wèi)生學指標之一，具有非常重要的實際檢測意義，因此，在進行糞大腸菌群檢測時采用酶底物法能夠有效的滿足檢測應用的需求。

其次，現(xiàn)階段國內使用的糞大腸菌群檢測方法較為傳統(tǒng)，實際的操作流程較為繁瑣，所需的檢測時間較長，一般在48小時到72小時才能獲得糞大腸菌群的檢測結果，并對檢測條件、檢測技術人員水平等方面有著較高的要求，在進行水樣的保存時也往往較為苛刻，這在很大程度上限制了傳統(tǒng)的糞大腸菌群檢測方法在我國中西部地區(qū)的使用，直接的影響到我國中西部地區(qū)衛(wèi)生檢測的效果。

第三，糞大腸菌群在檢測時使用酶底物法能夠較為迅速、準確及可靠的將結果檢測出來，同時所需的玻璃器皿也不需要進行清洗，檢測環(huán)境要求也不高，一般均不需要在無菌的環(huán)境中進行，也不需要進行培養(yǎng)基的專門配置，在24小時內進行定量的檢測，這在很大程度上降低了糞大腸菌群的檢測所需的工作量，同時可以避免使用多管法時逐級稀釋帶來的操作誤差，也避免了使用濾膜法時肉眼讀數(shù)的人為誤差，能夠較為準確地判斷水樣的污染狀況。

第四，國內現(xiàn)階段使用的糞大腸菌群檢測標準并沒有對酶底物法的使用進行針對性的規(guī)定，但是在國外特別是西方的發(fā)達國家內，酶底物法在糞大腸菌群的檢測中已經得到了較為廣泛的應用，并取得了較好的效果，國際上各個組織機構已經認可了酶底物法在檢測糞大腸菌群的作用，因此，國內在進行糞大腸菌群的檢測時也應當順應時代的需求，認清時代所處的位置，針對性的將酶底物法嵌入到我國糞大腸菌群的檢測工作中，從而更好的完善我國糞大腸菌群的檢測方法，提升我國糞大腸菌群檢測的準確性。

4結語

酶底物法在進行糞大腸菌群的檢測時，根據(jù)糞大腸菌群特異性酶針對性的與特異性物質產生化學反應，從而得到熒光與顏色的變化作為糞大腸菌群的檢測依據(jù)，整個操作的過程非常簡單，結果也較為清晰，直觀，客觀性也較強?，F(xiàn)階段影響酶底物法應用的主要因素為其檢測過程中使用的培養(yǎng)基現(xiàn)階段只有國外的生產商生產，因此，使用該方法時所需的檢測費用較高，這在很大程度上也是由于酶底物法在國內現(xiàn)階段并沒有得到廣泛的推廣而導致的，因此，隨著酶底物法在我國糞大腸菌群檢測中的不斷應用，其所需的檢測成本必然會大幅度的降低，使其具有更廣闊的應用范圍和前景，作為評價水質微生物污染的快速標準檢測方法在日常監(jiān)測和應急監(jiān)測中發(fā)揮重要作用。

參考文獻：

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