◎李 慧，金 紅，王 曄，蘇風(fēng)龍

（北京頤興堂生物科技有限公司，北京 100022）

美藤果油增強(qiáng)免疫力的試驗(yàn)研究

◎李 慧，金 紅，王 曄，蘇風(fēng)龍

（北京頤興堂生物科技有限公司，北京 100022）

為探究美藤果油對(duì)免疫力的增強(qiáng)作用，選用雄性健康Wistar大鼠20只，雄性高血脂Wistar大鼠20只，體重（200±10）g，按照隨機(jī)法將健康Wistar大鼠分為實(shí)驗(yàn)1組和對(duì)照1組，將雄性高血脂Wistar大鼠分為實(shí)驗(yàn)2組和對(duì)照2組，每組10只。對(duì)照1、2組大鼠使用普通大鼠飼料；實(shí)驗(yàn)1、2組大鼠在對(duì)照組基礎(chǔ)上，每百克飼料中混合7 g美藤果油，連續(xù)飼養(yǎng)10周后進(jìn)行免疫力檢測(cè)。結(jié)果表明：4組大鼠均未出現(xiàn)死亡，且通過(guò)觀察發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)1組大鼠活力及精力均強(qiáng)于其他大鼠，且對(duì)照2組大鼠的精力及活力最差；實(shí)驗(yàn)1組淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)、IL-2、IL-4的含量顯著高于實(shí)驗(yàn)2組、對(duì)照1組及對(duì)照2組（P＜0.05），實(shí)驗(yàn)2組與對(duì)照1組大鼠則不存在顯著性差異（P＞0.05），對(duì)照2組大鼠顯著低于實(shí)驗(yàn)2組（P＜0.05）。由此可知，美藤果油具有增強(qiáng)免疫力的功能，值得推廣食用。

美藤果油；免疫力；增強(qiáng)作用

美藤果產(chǎn)自于南美洲印加地區(qū)，在該地區(qū)已有千百年食用美藤果的歷史［1］。美藤果油是經(jīng)美藤種子榨取提煉出的一類植物油，美藤果油中富含大量的不飽和脂肪酸、維生素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)［2］。在美藤果油中不飽和脂肪酸的比例超過(guò)90%以上，其中ω-3與ω-4的比例為1∶0.75，與人體的吸收比例非常接近。相關(guān)研究指出不飽和脂肪酸與免疫機(jī)能有關(guān)［3］，但是有關(guān)美藤果油與免疫能力的相關(guān)報(bào)道較少，為了探究美藤果油與免疫能力的關(guān)系，做了相關(guān)研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及分組

雄性健康Wistar大鼠20只，雄性高血脂Wistar大鼠20只，體重（200±10）g，由北京市第一醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。試驗(yàn)前，為使大鼠適應(yīng)環(huán)境將大鼠放在實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)一周，隨后按照隨機(jī)法將健康Wistar大鼠分為實(shí)驗(yàn)1組和對(duì)照1組，將雄性高血脂Wistar大鼠分為實(shí)驗(yàn)2組和對(duì)照2組，每組10只。

1.2 飼料配制

對(duì)照1、2組大鼠使用普通大鼠飼料，實(shí)驗(yàn)1、2組大鼠在對(duì)照組基礎(chǔ)上，每百克飼料中混合7 g美藤果油（購(gòu)自于西雙版納印奇生物資源開(kāi)發(fā)有限公司，批號(hào)：20140204）。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 試驗(yàn)儀器

24、96 孔培養(yǎng)板（上海臥宏生物科技有限公司），高速離心機(jī)（張家港市中沃機(jī)械有限公司），全自動(dòng)生化儀（普朗醫(yī)療器械有限公司）。

1.3.2 試驗(yàn)方法

4組大鼠連續(xù)飼養(yǎng)10周。飼養(yǎng)結(jié)束后，將大鼠禁食12 h，無(wú)菌取出脾臟分離獲得脾淋巴細(xì)胞。

一是測(cè)定脾淋巴細(xì)胞增殖活性［4，5］。將在無(wú)菌條件下取出的脾臟碾碎并制作成單個(gè)細(xì)胞懸液，將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為4×109個(gè)/L。將調(diào)整后的細(xì)胞懸液加入96孔平底板進(jìn)行培養(yǎng)，每孔加入200 μL，共加入8孔，將8孔分為陽(yáng)性孔和陰性孔，其中陽(yáng)性孔4孔，其中每孔加入25 μL濃度為50 mg/L的刀豆素（ConA），陰性孔也4孔則不加入ConA，加好后的平地培養(yǎng)板置于CO2培養(yǎng)箱，在37 ℃溫度下培養(yǎng)48 h。在培養(yǎng)結(jié)束前4 h，將10 μL濃度為5 g/L的MTT10加入96孔平底培養(yǎng)板的每個(gè)孔中，在培養(yǎng)結(jié)束前2 h，將100 μL緩沖液加入各個(gè)孔中用于測(cè)定光密度，加完后開(kāi)始測(cè)定光密度。其中，T淋巴細(xì)胞的增殖能力用刺激指數(shù)（Stimulation Index，SI）來(lái)反映。SI=ConA刺激的陽(yáng)性孔的平均光密度值/ConA未刺激的陰性孔的平均光密度值。

二是白介素-2、4（interleukin，IL-2，IL-4）測(cè)定。將淋巴細(xì)胞懸液分別加入24孔平底培養(yǎng)板，每孔1 mL，隨后再向每孔加入100 μL濃度為50 mg/L的ConA，放入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，溫度37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間48 h。培養(yǎng)結(jié)束后，將培養(yǎng)板中的淋巴細(xì)胞上清液在無(wú)菌條件下吸取后，載分別裝入0.5 mL EP管中，置入-20 ℃的冰箱中保存，用于IL-2和IL-4含量的檢測(cè)。采用ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)檢測(cè)IL-2和IL-4的含量。

1.4 數(shù)據(jù)記錄與統(tǒng)計(jì)分析

飼養(yǎng)期間觀察4組大鼠的活動(dòng)情況及死亡情況并記錄；對(duì)4組大鼠淋巴細(xì)胞的增殖能力用刺激指數(shù)及白介素-2、4結(jié)果進(jìn)行記錄。

本次研究所獲得數(shù)據(jù)均采用SPSS20.0進(jìn)行處理，組件比較采用t檢驗(yàn)，以（x±s）表示，以P＜0.05為統(tǒng)計(jì)學(xué)存在差異。

2 結(jié)果

2.1 觀察結(jié)果

在飼養(yǎng)期間，4組大鼠均未出現(xiàn)死亡，且通過(guò)觀察發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)1組大鼠活力及精力均強(qiáng)于其他大鼠，且對(duì)照2組大鼠的精力及活力最差。

2.2 小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖活性和白介素含量對(duì)比

實(shí)驗(yàn)1組淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)、IL-2、IL-4的含量顯著高于實(shí)驗(yàn)2組、對(duì)照1組及對(duì)照2組大鼠（P＜0.05），實(shí)驗(yàn)2組與對(duì)照1組則不存在顯著性差異（P＞0.05），對(duì)照2組大鼠顯著低于實(shí)驗(yàn)2組（P＜0.05），詳見(jiàn)表1。

表1 鼠脾淋巴細(xì)胞增殖活性和白介素含量對(duì)比表（x±s）

3 討論

美藤果油是一種對(duì)人類健康十分有益的可食用植物油，而且也是世界上質(zhì)量最佳的食用油之一［6］。相關(guān)報(bào)道指出［6］，美藤果油中含有豐富的蛋白質(zhì)及不飽和脂肪酸，其中蛋白質(zhì)含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于花生中蛋白質(zhì)的含量，而不飽和脂肪酸的含量?jī)H僅低于核桃中不飽和脂肪酸的含量。劉付英［2］曾對(duì)美藤果油中不飽和脂肪酸的含量進(jìn)行過(guò)分析，發(fā)現(xiàn)美藤果油中不飽和脂肪酸含量高達(dá)92.46%，其中亞麻酸的含量高達(dá)45.62%，進(jìn)一步證明了美藤果油的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。吳爭(zhēng)［7］等人曾對(duì)美藤果油做過(guò)相關(guān)安全性評(píng)價(jià)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在實(shí)驗(yàn)室條件下，并未觀察到美藤果油的不良生物學(xué)影響，說(shuō)明美藤果油是一類無(wú)任何毒副作用的食品油。此外，還有學(xué)者就美藤果油的功效進(jìn)行過(guò)研究，結(jié)果顯示美藤果油具有良好的降脂作用［8］，這可能與其含有豐富的不飽和脂肪酸有關(guān)，因?yàn)椴伙柡椭舅峋哂泻芎玫慕抵饔茫?］，所以美藤果油也具有良好的降脂作用。研究結(jié)果還顯示，美藤果油具有保護(hù)上皮細(xì)胞完整的作用，筆者認(rèn)為這與其含有豐富的蛋白質(zhì)存在關(guān)系。

但是，目前臨床上有關(guān)美藤果油增強(qiáng)免疫力的報(bào)道較少，為了探究美藤果油與免疫力的關(guān)系，筆者做了相關(guān)研究，結(jié)果顯示4組大鼠均未出現(xiàn)死亡，且實(shí)驗(yàn)1組大鼠活力及精力均強(qiáng)于其他大鼠，對(duì)照2組大鼠的精力及活力最差；實(shí)驗(yàn)1組淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)、IL-2、IL-4 的含量顯著高于其他組（P＜0.05），實(shí)驗(yàn)2組與對(duì)照1組則不存在顯著性差異（P＞0.05），對(duì)照2組大鼠則顯著低于實(shí)驗(yàn)2組（P＜0.05）。本次研究結(jié)果說(shuō)明高血脂大鼠的免疫力低于健康大鼠，但是在喂養(yǎng)添加美藤果油的飼料后，健康大鼠及高血脂大鼠的免疫力均有提高，充分證實(shí)了美藤果油具有提高免疫力的作用。

綜上所述，美藤果油具有增強(qiáng)免疫力的功能，值得推廣食用。

［1］Guillen MD，Ruiz A，Cabo N，et al. Characterization of Sachainchi（Plukenetia volublilis L. ）oil by FTIR spectroscopy and H-1NMR.Comparison with linseed oil［J］. J Am Oil Chem Soc，2003，80（8）：755-762.

［2］劉付英.美藤果及美藤果油的理化性質(zhì)和油脂的脂肪酸組成分析［J］.中國(guó)油脂，2014，39（7）：95-97.

［3］郭 艷，蘇宜香.多不飽和脂肪酸對(duì)小鼠血脂和免疫功能的影響［J］.中國(guó)公共衛(wèi)生，2003，19（11）：1341-1342.

［4］Morten BH，Svend EN，Kurt B. Re-examination and further development of a precise and rapid dye method for measuring cell growth/cell kill［J］. J of Immunological Methods，1989，119（2）：203-210.

［5］林忠寧，董勝璋，董書(shū)蕓，等.MTT法檢測(cè)T淋巴細(xì)胞增殖功能的方法學(xué)探討與應(yīng)用［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2000，10（1）：8-10.

［6］蔡志全.特種木本油料作物星油藤的研究進(jìn)展［J］.中國(guó)油脂，2011，36（10）：1-6.

［7］吳 爭(zhēng)，丁 晟，蔡 宏，等.南美油藤果油的急性、亞急性及遺傳毒性的實(shí)驗(yàn)研究［J］.科技廣場(chǎng)，2012，25（12）：206-208.

［8］李 偉，王林元，王景霞，等.美藤果油對(duì)高脂血癥大鼠血脂的影響及對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用［J］.世界中醫(yī)藥，2015，10（8）：1227-1230.

［9］陳彩銳，李麗華，韓美娜，等.ω-3多不飽和脂肪酸血脂調(diào)節(jié)研究動(dòng)態(tài)［J］.食品安全導(dǎo)刊，2015，9（27）：170-172.

Experimental Study on Enhancing Immunity of Mido Fruit Oil

Li Hui， Jin Hong， Wang Ye， Su Fenglong
（Beijing Yixingtang Biotechnology Co. Ltd.， Beijing 100022， China）

To explore the effect of enhanced Mido fruit oil on immunity， tewnty male healthy Wistar rats and tewnty male Wistar rats ［weight （200±10） g］ were divided randomly into experimental group and control group， ten rats in each group； the rats of the control group were used normal rat diet； the rats in the experimental group on the basis of the control group， were mixed 7 g Mido encyclopedia per 100g feed，immunity test was carried out after ten weeks of continuous feeding. The results showed that during the rearing period， no death was found in the four groups， and the activity and energy of experimental group 1 were stronger than other rats， the energy and vitality of control group 2 were the worst； The lymphocyte stimulation index， IL-2， IL-4 levels of experimental group 1 were significantly higher than the experimental group 2，control group 1 and control group 2 （P＜0.05）， there were no sign ifcant diferences between experimental group 2 and control group 1 （P＜0.05）， rats in control group 2 were significantly lower than those in experimental group 2 （P＞0.05）. It can be known that Mido fruit oil has the function of enhancing immunity， it is worth popularizing.

Mido fruit oil； Immunity； Enhancement efect

TS225.1

10.16736/j.cnki.cn41-1434/ts.2016.16.039