丁金云

（鹽城市大豐區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 鹽城 224100）

臨床大腸埃希菌耐藥性檢測(cè)及超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的流行病學(xué)調(diào)查

丁金云

（鹽城市大豐區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 鹽城 224100）

目的 對(duì)鹽城市大豐區(qū)的臨床大腸埃希菌耐藥性檢測(cè)及超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的流行情況進(jìn)行分析和研究。方法 對(duì)50株大腸埃希菌臨床分離鑒定，并且對(duì)其實(shí)施11種抗菌藥物的耐藥性檢測(cè)。利用表型確認(rèn)試驗(yàn)的方式將其中的產(chǎn)ESBLs菌株篩選出來(lái)。結(jié)果 藥敏試驗(yàn)結(jié)果如下：面對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)藥物中的氨芐西林實(shí)驗(yàn)菌株具有90%耐藥率；面對(duì)第四代頭孢中的頭孢吡肟實(shí)驗(yàn)菌株具有60%的耐藥率；面對(duì)單環(huán)類(lèi)酰胺類(lèi)的氨曲南實(shí)驗(yàn)菌株具有66%的耐藥率；面對(duì)亞胺培南實(shí)驗(yàn)菌株具有60%的敏感度；面對(duì)氨基糖苷類(lèi)藥物中的阿米卡星實(shí)驗(yàn)菌株具有高達(dá)60%以上的耐藥率；面對(duì)氨基糖苷類(lèi)藥物中的卡那霉素實(shí)驗(yàn)菌株具有高達(dá)60%以上的耐藥率；面對(duì)第三代頭孢中的頭孢他啶實(shí)驗(yàn)菌株具有63%的耐藥率；面對(duì)第三代頭孢中的頭孢噻肟實(shí)驗(yàn)菌株具有82%的耐藥率；面對(duì)氟喹諾酮類(lèi)藥物諾氟沙星實(shí)驗(yàn)菌株具有74%的耐藥率；面對(duì)氟喹諾酮類(lèi)藥物環(huán)丙沙星實(shí)驗(yàn)菌株具有76%的耐藥率；面對(duì)氟喹諾酮類(lèi)藥物氧氟沙星實(shí)驗(yàn)菌株具有82%的耐藥率。結(jié)論 目前該地區(qū)仍然存在著十分嚴(yán)峻的大腸埃希菌耐藥情況，需要引起高度的重視。

ESBLs；大腸埃希菌；耐藥性

作為一種常見(jiàn)的社區(qū)和醫(yī)院感染的病原菌，大腸埃希菌在廣泛使用廣譜β-內(nèi)酰胺類(lèi)藥物的今天產(chǎn)生了越來(lái)越高的耐藥率，產(chǎn)ESBLs（超廣譜β-內(nèi)酰胺酶）在其耐藥機(jī)制中屬于最為重要的一種［1］。為了對(duì)臨床大腸埃希菌耐藥性檢測(cè)及超廣譜β-內(nèi)酰胺酶流行情況進(jìn)行分析和研究，本文以鹽城市大豐區(qū)為例，對(duì)50株大腸埃希菌進(jìn)行臨床分離鑒定，并且對(duì)其實(shí)施11種抗菌藥物的耐藥性檢測(cè)，報(bào)道如下。

1　材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)菌株：選擇鹽城市大豐區(qū)2014年6月至2015年5月在臨床標(biāo)本中分離的大腸埃希菌共計(jì)50株［2］。

1.2藥敏試驗(yàn)：選擇肉湯稀釋法檢測(cè)在11種抗菌藥物中50株大腸埃希菌的敏感性。①菌液培養(yǎng)：在1 mLMH肉湯中加入10 μL取待測(cè)菌保存液，在37 ℃溫箱中對(duì)其進(jìn)行放置，使其進(jìn)行12 h的過(guò)夜靜止培養(yǎng)。選擇紫外分光光度儀對(duì)其OD值進(jìn)行測(cè)定，對(duì)其濃度進(jìn)行調(diào)整，達(dá)到0.08～0.1的OD600值，這時(shí)候菌液達(dá)到108cfu/mL的濃度。在此基礎(chǔ)之上再對(duì)待測(cè)菌液進(jìn)行1000倍的稀釋?zhuān)@時(shí)候菌液可以達(dá)到105cfu/mL的濃度，此時(shí)的菌液就是所謂的上樣菌懸液。②藥敏試驗(yàn)：對(duì)待測(cè)抗菌藥物進(jìn)行10倍稀釋?zhuān)缓髮缇鶰H肉湯100 μL加入到無(wú)菌96孔板第1～11列；將10倍稀釋的藥液100 μL分別加入到無(wú)菌96孔板的每一孔中。在完成藥物和菌液上樣工作之后，將板蓋好，在37 ℃溫箱中對(duì)其進(jìn)行放置，使其進(jìn)行18～22 h的培養(yǎng)。對(duì)2012年美國(guó)CLSL制定的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行參照判斷藥敏結(jié)果［3］。

2　結(jié) 果

藥敏試驗(yàn)結(jié)果分析：選擇肉湯稀釋法檢測(cè)在11種抗菌藥物中50株大腸埃希菌的敏感性，結(jié)果顯示：面對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)藥物中的氨芐西林實(shí)驗(yàn)菌株具有90%耐藥率；面對(duì)第四代頭孢中的頭孢吡肟實(shí)驗(yàn)菌株具有60%的耐藥率；面對(duì)單環(huán)類(lèi)酰胺類(lèi)的氨曲南實(shí)驗(yàn)菌株具有66%的耐藥率；面對(duì)亞胺培南實(shí)驗(yàn)菌株具有60%的敏感度；面對(duì)氨基糖苷類(lèi)藥物中的阿米卡星實(shí)驗(yàn)菌株具有高達(dá)60%以上的耐藥率；面對(duì)氨基糖苷類(lèi)藥物中的卡那霉素實(shí)驗(yàn)菌株具有高達(dá)60%以上的耐藥率；面對(duì)第三代頭孢中的頭孢他啶實(shí)驗(yàn)菌株具有63%的耐藥率；面對(duì)第三代頭孢中的頭孢噻肟實(shí)驗(yàn)菌株具有82%的耐藥率；面對(duì)氟喹諾酮類(lèi)藥物諾氟沙星實(shí)驗(yàn)菌株具有74%的耐藥率；面對(duì)氟喹諾酮類(lèi)藥物環(huán)丙沙星實(shí)驗(yàn)菌株具有76%的耐藥率；面對(duì)氟喹諾酮類(lèi)藥物氧氟沙星實(shí)驗(yàn)菌株具有82%的耐藥率。見(jiàn)表1。

3　討 論

通過(guò)質(zhì)粒介導(dǎo)ESBLs能夠在細(xì)菌間傳播，在廣泛使用第三代頭孢菌素的今天，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌具有越來(lái)越高的流行性和越來(lái)越嚴(yán)重的耐藥情況。然而在使用抗生素的劑量和種類(lèi)方面，不同的地區(qū)和醫(yī)院存在的較大的差異，因此在產(chǎn)ESBLs細(xì)菌的耐藥性和檢出率方面也存在著較大的差異［4］。

表1　大腸埃希菌的耐藥情況分析

以β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素為例，β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素屬于臨床上常用的一種抗生素，其主要包括碳青霉烯類(lèi)抗生素、頭孢菌素和青霉素類(lèi)抗生素，在臨床中其主要是利用β-內(nèi)酰胺抑制細(xì)菌細(xì)胞壁肽聚糖的形成從而對(duì)細(xì)菌細(xì)胞壁的形成產(chǎn)生影響這一機(jī)制發(fā)揮殺菌作用［5］。然而在臨床上普遍應(yīng)用廣譜類(lèi)抗生素的今天，β-內(nèi)酰胺酶的基因在與抗生素進(jìn)行長(zhǎng)期大量接觸之后，可以對(duì)其中的β-內(nèi)酰胺環(huán)進(jìn)行水解，使得β-內(nèi)酰胺抑制肽聚糖合成的作用被解除，導(dǎo)致抗生素失效，最終形成耐藥性。在本次研究中，面對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)藥物中的氨芐西林實(shí)驗(yàn)菌株具有90%耐藥率，這說(shuō)明大腸埃希菌在面對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)藥物時(shí)具有越來(lái)越嚴(yán)重的耐藥情況［6］。綜上所述，目前鹽城市大豐區(qū)仍然存在著十分嚴(yán)峻的大腸埃希菌耐藥情況，而且ESBLs流行趨勢(shì)出現(xiàn)了一定的變化，需要引起高度的重視。

［1］張姝，莫非，黃志卓，等.2009-2010年貴州省6家教學(xué)醫(yī)院革蘭陰性桿菌耐藥性分析［J］.中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2011，31（23）：1953-1956.

［2］姜梅杰，孫啟英，劉廣麗，等.472株大腸埃希菌分布及耐藥性分析［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2012，22（10） ： 2192-2193.

［3］肖永紅，沈萍，魏澤慶，等.Mohnarin2010年度全國(guó)細(xì)菌耐藥檢測(cè)［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2011，21（23） ： 4896-4902.

［4］胡麗慶，呂火祥，孫定河，等.2007-2009年大腸埃希菌產(chǎn)ESBLs株分離率及對(duì)碳青霉烯類(lèi)藥物的耐藥性變遷［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2011，21（15） ： 3258-3260.

［5］董文輝，馬曉艷，孫延波，等.腸桿菌科細(xì)菌的耐藥性及超廣譜 β-內(nèi)酰胺酶檢測(cè)［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2009，13（3） ： 356-358.

［6］吳學(xué)兵，李蘇華，楊建華，等.上海松江中心醫(yī)院 2007-2009年臨床分離大腸埃希菌耐藥性監(jiān)測(cè)［J］.中華臨床醫(yī)師雜志，2011，5（5）：1457-1459.

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1671-8194（2016）27-0120-02