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        接骨丹對大鼠骨缺損愈合療效的影像學(xué)研究

        2016-10-27 05:19:16牛恒立,趙國彪,馬中興
        西部中醫(yī)藥 2016年5期
        關(guān)鍵詞:藥組線片空白對照

        接骨丹對大鼠骨缺損愈合療效的影像學(xué)研究

        骨缺損指骨的結(jié)構(gòu)完整性被破壞,是臨床常見病。其典型的缺損局部臨床表現(xiàn)結(jié)合X線檢查即可明確診斷[1]。較小的骨缺損(通常指8 mm以下),有可能自行愈合;但骨缺損過大,或者是較小骨頭上的骨缺損很難完全愈合。骨損傷模型一般采用開放性骨折模型制作方法進(jìn)行制作[2]。

        甘肅民間中藥接骨丹[3]由西藏山溪鯢組成,可促進(jìn)細(xì)胞增殖、成骨性分化,提高堿性磷酸酶活性、鈣鹽沉積量、Ⅰ型膠原含量、骨鈣素含量和鈣化結(jié)節(jié)數(shù),口服后的代謝產(chǎn)物可刺激大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖,并能促進(jìn)其成骨性分化[4]。本研究通過大鼠開放型骨折模型制作方法制作骨損傷模型,同時通過此模型考察接骨丹對于骨折愈合及骨形成的促進(jìn)作用。

        1 材料與方法

        1.1材料SD大鼠40只,雌雄各半,體質(zhì)量(230±50)g,購自甘肅中醫(yī)藥大學(xué)SPF級動物實驗中心,動物質(zhì)量合格證號:0001112;德國萊佧LEICA RM-2015生物組織切片機;O1ympus BX41顯微攝影系統(tǒng);四川大學(xué)Mias病理圖像分析系統(tǒng)。實驗所用BMP-2兔抗鼠多克隆抗體(北京博奧森生物工程有限公司提供),即用型SABC免疫組化試劑盒(福州邁新生物公司提供)。接骨丹(西藏山溪鯢)購自甘肅省渭源縣黃香溝羅家磨民間,經(jīng)定西市藥檢所鑒定;鹽酸氯胺酮注射液(福建吉田藥業(yè)有限公司,批號:110530);藥物溶液配制:稱取曬干研磨均勻的西藏山溪鯢適量,取生理鹽水適量溶解,配制成0.025 g/mL的接骨丹混懸液。

        1.2實驗方法

        1.2.1骨折模型[5]的制造各組大鼠腹腔注射氯胺酮(20 mg/kg),待麻醉后,仰臥固定,對左后肢脛骨處進(jìn)行脫毛處理、消毒,于左后肢脛骨下端切開1.5~2 cm切口,分離肌肉,避免血管神經(jīng)損傷,暴露脛骨,用專用電鉆于脛骨中端磨出寬4 mm深達(dá)髓腔骨缺損,逐層縫合,傷口不包扎不固定[6-7],每天消毒,7天后分籠飼養(yǎng)。

        1.2.2分組將造模成功大鼠隨機分為給藥組和空白對照組,每組20只。給藥組大鼠經(jīng)灌胃給予治療量接骨丹(0.25 g/kg),2次/d,連續(xù)給藥28天,空白對照組灌服2 mL生理鹽水。

        1.2.3影像學(xué)檢查于術(shù)后第4、7、14、21、28天各組隨機選取4只大鼠(雌雄各半)進(jìn)行影像學(xué)檢查。

        1.2.4影像學(xué)檢查條件影像學(xué)檢查在63 kv、374 mA、22 mses、8.1 mAs的條件下進(jìn)行X線掃描拍片。

        1.2.5骨損傷X片評分骨損傷的愈合情況根據(jù)影像學(xué)檢查結(jié)果,按下述標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評分[8-10]:1)錯位:已缺損脛骨無錯位包括錯位<0.1 cm者得1分;有錯位包括骨折斷端錯位未超過其斷端的1/2或骨折端輕度成角者得0分。2)骨缺損:已缺損脛骨缺損部位部分模糊或消失者得1分;未有明顯變化者得0分。3)連接:已缺損脛骨骨折端連接成一整體者得1分;未連接者得0分。4)腓骨:腓骨未斷裂或斷裂后連接者得1分;腓骨斷裂者得0分。5)愈合:已缺損脛骨未愈合包括無內(nèi)外骨痂或骨折縫依舊者得0分;骨折愈合包括有內(nèi)外輕度骨痂改變,同時骨折縫變淺或模糊者得1分。

        2 結(jié)果

        藥物治療第4、7天后骨缺損清晰可見,同時空白對照組骨缺損亦未有任何變化,2組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);給藥14天給藥組骨折斷端有大量骨痂生成,骨缺損開始明顯變小,空白對照組雖然也有骨痂生成但骨缺損變化不大,兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);給藥21天后骨缺損進(jìn)一步變小甚至消失,與空白對照組比較骨缺損變化不明顯;給藥28天后骨缺損脛骨基本連接成一個整體,骨愈合顯著,空白對照組骨缺損變小,但骨愈合較給藥組顯著,兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表1,圖1。

        表1 接骨丹對大鼠脛骨骨折X線片評分的影響(±s)

        表1 接骨丹對大鼠脛骨骨折X線片評分的影響(±s)

        注:*表示與空白對照組,P<0.05。

        組別只數(shù)劑量/(g · k g-1)X線片評分/分4天7天1 4天2 1天2 8天給藥組4 0 . 2 5 2 . 5 0 ± 0 . 5 8 2 . 7 5 ± 0 . 5 0*3 . 5 0 ± 0 . 5 8*3 . 7 5 ± 0 . 5 0*4 . 7 5 ± 0 . 5 0*空白對照組4 0 . 2 5 2 . 0 5 ± 0 . 5 0 2 . 5 0 ± 0 . 5 0 2 . 5 0 ± 0 . 5 8 2 . 7 5 ± 0 . 5 0 3 . 2 5 ± 0 . 5 0

        圖1 各時期大鼠脛骨X線片比較

        3 討論

        中藥治療骨折已在臨床實踐中證明有一定的優(yōu)勢[11],中醫(yī)認(rèn)為“跌打損傷皆瘀血在內(nèi)而不散也,血不活則瘀不能去,瘀不去則折不能續(xù)”,肝失血養(yǎng)則骨折愈合較為緩慢。甘肅民間中藥接骨丹作為接骨續(xù)筋的藥物,可用來養(yǎng)肝血,去瘀血。X線檢查可以較好地反應(yīng)骨折愈合情況。

        本研究采用X線檢查方法對各組大鼠骨損傷愈合及治療效果進(jìn)行評分。結(jié)果表明接骨丹能明顯改善骨折愈合情況,提高影像學(xué)檢查評分,縮短骨折愈合時間,促進(jìn)骨折愈合。同時,隨著給藥時間的增加,骨損傷的改善尤為明顯。但在治療骨損傷中接骨丹中哪種主要成分發(fā)揮作用,以及作用的部位、靶點、通路,是今后研究的方向和重點。

        [1]湯譯博,趙亮,蘇佳燦.骨折動物模型的研究進(jìn)展[J].中國骨傷,2011,24(1):91-93.

        [2]佘昶,董啟榮,周曉中.大鼠股骨開放骨折模型與閉合骨折模型制作的比較[J].中國組織工程研究與臨床康復(fù),2008,12(46):9071-9075.

        [3]《中國藥用動物志》協(xié)作組.中國藥用動物志[M].天津:天津科學(xué)技術(shù)出版社,1979:166.

        [4]甘肅省革命委員會衛(wèi)生局.甘肅中草藥手冊[M].蘭州:甘肅人名出版社,1972.

        [5]費琴明,陳統(tǒng)一,陳中偉.大鼠脛骨標(biāo)準(zhǔn)骨折模型的制作[J].上海實驗動物科學(xué),2002,22(1):10-12.

        [6]王華松,黃瓊霞,許申明.骨碎補對骨折愈合中血生化指標(biāo)及TG F-β1表達(dá)的影響[J].中醫(yī)正骨,2001,13(5):6-8.

        [7]鮑善芬,王海鷹,趙霖,等.飼料中不同水平的銅對大鼠骨折愈合的影響[J].中國骨質(zhì)疏松雜志,2004,10(1):23-26.

        [8]葉日喬,李茂,韋寶偉.生骨靈顆粒促進(jìn)骨折愈合的實驗研究[J].中草藥,2004,35(8):919-921.

        [9]Wang Shoubi ao,Shen Ruowu,Gong Shaolan,et al.Experimental study of chi nt in deri vat i ves on promoting fract ure healing[J].Chinese Journal of Marine Drangs,2004,23(3):7-10.

        [10]沈祥春,張貴林,任光友.抗骨折方促進(jìn)實驗性大鼠骨折愈合作用的研究[J].中華中醫(yī)藥雜志,2007,22(5):285-288.

        [11]Shen X C,Zhang G L,Ren G Y.Effects of kangguzhe formul a on promoting union of experimental rat fracture[J]. China Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy,2007,22(5):185-288.

        牛恒立1,趙國彪2,馬中興3,陳曉東4△,白雪紅5
        1蘭州大學(xué)第二醫(yī)院,甘肅蘭州730030;2蘭州大學(xué)藥學(xué)院;3秦安縣人民醫(yī)院;4甘肅藥業(yè)信息研究所;5甘肅省人民醫(yī)院

        目的:探討接骨丹對骨缺損愈合及骨形成的影響。方法:采用開放性骨折模型制作方法制作大鼠骨缺損模型,通過拍攝脛骨X光片,并根據(jù)骨折肢X片評分標(biāo)準(zhǔn),對各組大鼠不同時間段骨折肢進(jìn)行相應(yīng)評分,考察接骨丹對骨折愈合及骨形成的影響。結(jié)果:給藥組較空白組骨缺損部位骨痂生成良好、骨缺損明顯減小、骨折肢X線片評分明顯高于空白對照組(P<0.05)。結(jié)論:接骨丹對骨缺損愈合及骨形成有促進(jìn)作用。

        骨損傷;骨缺損;接骨丹;X線片

        Imaging Study on Curative Effects of JieGu Pills in Healing the Rats with Bone Defect

        NIU Hengli1,ZHAO Guobiao2,MA Zhongxing3,CHEN Xiaodong4△,BAI Xuehong5
        1 Lanzhou University Second Hospital,Lanzhou 730030,China;2 Pharmacy School of Lanzhou University;3 Qin′an County People′s Hospital;4 Gansu Institute for Pharmaceutical Information;5 Gansu Provincial Hospital

        Objective:To explore the influence of JieGu pills on the healing of bone defect and bone formation.Methods:Rat model with bone defect was prepared by adopting open bone fracture model establishment method,the fracture limb of the rats in different groups were scored at different times by filming tibial X-ray according to fractured limb X-ray scaling standard,and the influence of JieGu pills on the healing of bone fracture and bone formation was discussed.Results:Callus formation grew well,and bone defects reduced obviously when the medication group was compared with the blank group,it was higher than blank control group in X-ray scales of fractured limbs obviously(P<0.05).Conclusion:JieGu pills could promote the healing of bone defect and bone formation.

        bone injury;bone defect;JieGu pills;X-ray

        R32

        B

        1004-6852(2016)05-0124-03

        2015-02-27

        牛恒立(1972—),男,副主任藥師。研究方向:中藥藥理及制劑。

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