張林霞　孫　茜　孫　波

(唐山工人醫(yī)院，河北　唐山　063000)

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血漿活化蛋白C水平在老年糖尿病腎病動脈粥樣硬化形成中的機制

張林霞孫茜孫波

(唐山工人醫(yī)院，河北唐山063000)

目的探討血漿活化蛋白C(APC)在老年糖尿病腎病(DN)動脈粥樣硬化(AS)形成。方法2型糖尿DN病未接受透析治療的老年患者60例和本院體檢中心52例健康志愿者。ELISA法檢測可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白(sTM)、可溶性血管細(xì)胞黏附分子(sVCAM)-1、可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)、APC水平，超聲檢測頸動脈內(nèi)-中膜厚度(IMT)。根據(jù)尿蛋白嚴(yán)重程度將60例患者分為微量蛋白尿組26例(30 mg/d<尿蛋白量≤300 mg/d)和蛋白尿組34例(尿蛋白量>300 mg/d)；根據(jù)患者IMT水平分為IMT<0.1 cm組12例、0.1 cm≤IMT≤0.12 cm組14例、IMT>0.12 cm組34例；分析與血管內(nèi)皮損傷指標(biāo)的關(guān)系。結(jié)果糖尿病腎病患者IMT水平與24 h尿白蛋白、sTM、sVCAM-1、sEPCR呈明顯正相關(guān)(P<0.05)；APC水平與24 h尿白蛋白、sTM、sVCAM-1、IMT呈明顯負(fù)相關(guān)(P<0.05)；對照組、微量蛋白尿組、蛋白尿組之間sTM、sVCAM-1、sEPCR、APC、IMT均有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)；不同頸動脈IMT組之間APC水平有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。結(jié)論老年DN患者血漿APC水平與病情嚴(yán)重程度和IMT呈負(fù)相關(guān)，APC水平降低可能導(dǎo)致炎性介質(zhì)水平升高和內(nèi)皮細(xì)胞損傷而參與DN患者AS的發(fā)生發(fā)展。

血漿活化蛋白C；糖尿病腎??；動脈粥樣硬化

蛋白C是一類由肝臟合成的維生素K依賴性蛋白酶，經(jīng)凝血酶活化后成為激活的蛋白C(APC)。APC作為一種體內(nèi)重要保護因子，具有抗凝、抗炎、抗氧化應(yīng)激等作用。炎性反應(yīng)為誘發(fā)血管內(nèi)皮損傷的主要機制，相關(guān)研究顯示，APC能夠通過改善敗血癥患者體內(nèi)炎癥狀態(tài)，防止腎損傷，外源性APC還能夠緩解糖尿病腎病(DN)進展〔1〕。而DN患者體內(nèi)APC水平降低加重體內(nèi)炎性反應(yīng)和內(nèi)皮細(xì)胞損傷能否促進動脈粥樣硬化(AS)形成至今尚未明確。同時考慮到DN多發(fā)于老年人群〔2〕，而AS也是誘發(fā)老年人全身性疾病的重要原因。因此，本次研究擬分析DN患者血漿APC、炎性介質(zhì)水平、內(nèi)皮細(xì)胞損傷情況，并探討與其AS的相關(guān)性。

1　資料與方法

1.1一般資料選取2014年1～12月本院收治的2型糖尿病DN未接受透析治療的患者60例。篩選標(biāo)準(zhǔn)：年齡≥60歲，患者及其家屬自愿參與本次研究并簽署知情同意書；糖尿病病程≥6年，糖尿病視網(wǎng)膜病變；尿白蛋白量>30 mg/d；無嚴(yán)重應(yīng)激狀態(tài)。入選本研究前2個月內(nèi)未使用免疫抑制劑、激素，以及其他可引發(fā)腎損傷的藥物。男36例，女24例；年齡60～78歲，平均(67.29±8.87)歲。選取同期本院體檢中心52例健康老年志愿者為對照組，男32例，女20例；年齡56～74歲，平均(65.07±6.32)歲；入選者血壓、血常規(guī)、尿常規(guī)、尿微量蛋白、肝腎功能均正常。

1.2方法

1.2.1頸動脈內(nèi)-中膜厚度(IMT)檢測采用美國GEVivid7Pr0彩色多普勒超聲診斷儀檢測IMT，由本院同一名超聲科醫(yī)師單盲檢測，IMT值取兩側(cè)最大值，≥1 mm為IMT增厚，分叉處>1.2 mm為斑塊。

1.2.2實驗室指標(biāo)檢測清晨抽取兩組研究對象空腹肘靜脈血，放于枸櫞酸鈉抗凝管中，5 000 r/min離心30 min，取上清置于-80℃超低溫冰箱中保存待測。采用ELISA法檢測可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白(sTM)、可溶性血管細(xì)胞黏附分子(sVCAM)-1、可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)、APC，試劑盒購于上海心語生物科技有限公司。采用貝克曼庫爾特ACCESS2化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測全段甲狀旁腺激素(iPTH)；邁瑞B(yǎng)c2600全自動血球分析儀檢測血常規(guī)；邁瑞B(yǎng)S-400全自動生化分析儀檢測血生化。

1.3統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS13.0軟件進行t檢驗，多組間進行單因素F檢驗；進行兩變量直線相關(guān)分析。

2　結(jié)　果

2.1IMT、APC與各指標(biāo)相關(guān)性分析DN患者IMT水平與24 h尿白蛋白、sTM、sVCAM-1、sEPCR呈明顯正相關(guān)(P<0.05)；APC水平與24 h尿白蛋白、sTM、sVCAM-1、IMT呈明顯負(fù)相關(guān)(P<0.05)，見表1。

2.2不同程度蛋白尿患者血管內(nèi)皮損傷指標(biāo)比較根據(jù)患者尿蛋白嚴(yán)重程度分為微量蛋白尿組26例(30 mg/d<尿蛋白量≤300 mg/d)和蛋白尿組34例(尿蛋白量>300 mg/d)，方差分析顯示，對照組、微量蛋白尿組、蛋白尿組之間sTM、sVCAM-1、sEPCR、APC、IMT均有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)，見表2。

2.3不同IMT病變患者血管內(nèi)皮損傷指標(biāo)比較根據(jù)患者IMT水平分為IMT<0.1 cm組12例、0.1 cm≤IMT≤0.12 cm組14例、IMT>0.12 cm組34例。方差分析顯示，三組間APC水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表1　DN患者IMT、APC與各指標(biāo)相關(guān)性分析

表2　不同程度蛋白尿患者血管內(nèi)皮損傷指標(biāo)比較±s)

表3　不同IMT病變患者血管內(nèi)皮損傷指標(biāo)比較±s)

3　討　論

機體處于長時間高血糖狀態(tài)可增強體內(nèi)氧化應(yīng)激、炎性介質(zhì)、PKC等信號途徑，損傷內(nèi)皮細(xì)胞，這是DN患者AS發(fā)生、發(fā)展的主要原因。相關(guān)研究顯示，外源性APC可有效抑制DN小鼠腎功能的惡化，因此推測，APC水平下降能夠加快腎功能和進展速度〔3〕。

本次研究中DN患者APC水平明顯降低，說明該類患者AS與APC對內(nèi)皮細(xì)胞保護能力降低有關(guān)。隨著蛋白尿程度、IMT的增加APC水平明顯降低，說明隨著患者腎臟病情的惡化，APC水平降低，導(dǎo)致對細(xì)胞的保護作用明顯減弱，加重了AS進程。血管內(nèi)皮細(xì)胞表面均存在sTM受體、sEPCR表達，當(dāng)內(nèi)皮細(xì)胞受到損傷時，sTM受體、sEPCR從細(xì)胞膜表面脫落，使細(xì)胞表面sTM受體、sEPCR密度降低。脫落到血漿中的sEPCR雖然仍能夠與APC結(jié)合，但會抑制APC活性。本研究結(jié)果提示患者血管內(nèi)皮細(xì)胞受到了明顯損傷，進一步引發(fā)APC水平下降，加速AS進程。但也有研究顯示，糖尿病患者APC受體表達水平與正常人無明顯差異〔4，5〕，而本次研究的DN患者病程較長，同時存在腎損害，病情較重，血管內(nèi)皮細(xì)胞受損較嚴(yán)重，可能導(dǎo)致與相關(guān)研究結(jié)論不同。

血管壁表面微炎性狀態(tài)也是AS形成的重要機制〔6〕。sVCAM-1多表達于內(nèi)皮和平滑肌細(xì)胞，誘導(dǎo)炎性因子黏附，參與AS形成〔7〕。糖尿病患者血管壁表面sVCAM-1水平明顯提升，但在AS早期sVCAM-1表達更明顯，且與腎功能密切相關(guān)，可作為DN早期血管損害的標(biāo)志物。本研究提示DN患者體內(nèi)APC水平隨病情進展而降低，導(dǎo)致抗炎作用減弱，體內(nèi)炎性反應(yīng)增強，促進AS的形成。

1陳婭，丁涵露，王莉，等.Ad-FLT-1/PC對糖尿病腎病動脈粥樣硬化大鼠炎癥因子表達的影響〔J〕.中華醫(yī)學(xué)雜志，2015；95(24)：1961-5.

2周穎，馮烈.老年糖尿病腎病腎內(nèi)動脈阻力指數(shù)異常與頸動脈粥樣硬化的相關(guān)性〔J〕.中國老年學(xué)雜志，2015；35(15)：4227-8.

3錢書虹，錢慶文.對氧磷酶2 C311S與對氧磷酶1 Q192R基因多態(tài)性與糖尿病腎病的關(guān)系〔J〕.中華腎臟病雜志，2010；26(2)：132-3.

4劉坤，高志敏.脂聯(lián)素與2型糖尿病及其血管并發(fā)癥關(guān)系的研究進展〔J〕.醫(yī)學(xué)綜述，2012；18(1)：126-9.

5Keller SA，Moore CC，Evans SL，etal.Activated protein C alters inflammation and protects renal function in sepsis〔J〕.J Surg Res，2011；168(5)：e103-6.

6劉鵬，王德寶，張鳳梅，等.替米沙坦對早期糖尿病腎病患者血漿同型半胱氨酸及頸動脈內(nèi)膜中層厚度的影響〔J〕.中國全科醫(yī)學(xué)，2012，15(21)：2431-3.

7楊生，張魯寧.糖尿病腎病與脂聯(lián)素、血管細(xì)胞黏附分子-1的相關(guān)性〔J〕.中國老年學(xué)雜志，2010；30(21)：3155-6.

〔2015-12-30修回〕

(編輯李相軍)

河南省醫(yī)學(xué)科技攻關(guān)計劃項目(No.201304053)

張林霞(1970-)，女，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事老年腎臟、心臟等疾病研究。

R587

A

1005-9202(2016)17-4186-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.17.023