楊勇 胡端敏 唐文

·短篇論著·

急性壞死性胰腺炎小鼠不同組織中連接黏附分子C的表達(dá)

楊勇 胡端敏 唐文

中性粒細(xì)胞的過度激活被認(rèn)為是引起重癥急性胰腺炎(SAP)病情加重、多器官功能衰竭以致病死的重要原因[1]。連接黏附分子-C(junctional adhesion molecule C，JAM-C)是近些年新發(fā)現(xiàn)的血管內(nèi)皮細(xì)胞上的細(xì)胞黏附分子，它在中性粒細(xì)胞向炎癥和組織損傷處浸潤(rùn)和聚集過程中起重要作用[2]。因此，JAM-C可能參與了SAP的病情進(jìn)展。本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)JAM-C在急性壞死性胰腺炎(ANP)小鼠胰腺、腎和肺的表達(dá)，探討其在ANP病情進(jìn)展中的作用。

一、材料和方法

1．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組：清潔級(jí)昆明小鼠40只，雌雄不分，體重(20±2)g，購自蘇州大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。按完全隨機(jī)法分成ANP組和對(duì)照組。采用腹腔注射雨蛙素50 μg/kg體重、6次、間隔1 h、末次注射后立即給予腹腔注射內(nèi)毒素10 mg/kg體重的方法制備ANP模型。對(duì)照組腹腔注射無菌生理鹽水10 ml/kg體重，6次。

2．觀察指標(biāo)：末次注射后3 h摘眼球取血，分離血清，應(yīng)用全自動(dòng)生化儀檢測(cè)血清淀粉酶濃度。小鼠斷頸后開腹取胰腺、腎和肺組織，常規(guī)病理學(xué)檢查，并采用免疫組化染色檢測(cè)JAM-C蛋白表達(dá)。再采用MIQAS醫(yī)學(xué)圖像定量分析系統(tǒng)進(jìn)行半定量。

二、結(jié)果

1．血淀粉酶含量的變化：對(duì)照組血淀粉酶含量為(1299±70)U/L，ANP組為(19608±1769)U/L，相差顯著(P<0.05)。

2．組織病理學(xué)改變：ANP小鼠胰腺水腫，腺泡呈孤島狀，腺細(xì)胞壞死、結(jié)構(gòu)模糊不清，胞質(zhì)內(nèi)空泡形成，局部有壞死灶，中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞浸潤(rùn)，胰周脂肪壞死，大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，局部血管壁壞死、出血，大量中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞浸潤(rùn)；肺泡壁的毛細(xì)血管彌漫性擴(kuò)張充血，肺泡腔內(nèi)有少量滲出液及紅細(xì)胞和炎癥細(xì)胞，肺間質(zhì)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)明顯；腎小球充血，毛細(xì)血管袢之間可見中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞浸潤(rùn)，腎間質(zhì)輕度水腫。對(duì)照組胰腺、腎和肺組織均無明顯改變。

3．JAM-C蛋白表達(dá)的變化：JAM-C在ANP組不同組織上均有高表達(dá)(P<0.05，圖1、2)。

圖1對(duì)照組(左)和ANP組(右)肺(上)、腎(中)和胰腺(下)組織的蛋白表達(dá)(免疫組化 ×200)

圖2 對(duì)照組與ANP組肺、腎、胰腺組織的陽性面積表達(dá)值

討論JAM-C是免疫球蛋白超家族成員之一，JAM-C在內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞、血小板、T細(xì)胞、NK細(xì)胞、成纖維細(xì)胞以及淋巴管上均有表達(dá)[3]。它的配體主要是分布在白細(xì)胞上的整合蛋白Mac-1 (αMβ2，CD11b/CD18)[4]。Orlova等[5]報(bào)道，JAM-C大量分布在血管內(nèi)皮細(xì)胞之間的緊密連接上，使用可溶性JAM-C結(jié)合中性粒細(xì)胞上的整合蛋白Mac-1后，可使血管炎癥明顯減輕，且白細(xì)胞滲出也明顯減少。在腹膜炎、肺炎、皮膚炎癥、關(guān)節(jié)炎等動(dòng)物模型的研究中發(fā)現(xiàn)[6-9]，JAM-C可增加中性粒細(xì)胞在炎癥部位和組織損傷處的浸潤(rùn)和聚集，而使用抗JAM-C抗體或者可溶性JAM-C可有效減輕病情的嚴(yán)重性以及炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)。但是這種作用的基本機(jī)制仍需要未來進(jìn)一步研究明確。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，ANP小鼠肺臟、胰腺和腎臟上均有JAM-C高表達(dá)(P<0.05)，與Vonlaufen等[10]的結(jié)果一致。由此可見，JAM-C在ANP的病理發(fā)展中可能起到重要作用。通過拮抗JAM-C這一參與后期細(xì)胞事件的黏附分子可能成為治療ANP的新的突破口。

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2009-12-08)

(本文編輯：屠振興)

10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2010.05.025

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唐文，Email: louisetangwen@yahoo.com.cn