翟玉娥，孫樹凱，馬金龍，岳康，趙鵬

(青島大學附屬醫(yī)院，山東青島266555)

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血清 NGAL、CysC、Cr和BUN水平檢測對高血壓腎病的早期診斷價值

翟玉娥，孫樹凱，馬金龍，岳康，趙鵬

(青島大學附屬醫(yī)院，山東青島266555)

目的探討中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)、胱抑素C(CysC)、肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)檢測對高血壓腎病的早期診斷價值。方法 189例高血壓腎病患者根據(jù)腎小球濾過率(eGFR)分成高血壓Ⅰ組88例、高血壓Ⅱ組59例和高血壓Ⅲ組64例；另從健康查體中心隨機選取107例健康人作為對照組。以上研究對象均采用酶聯(lián)免疫法檢測血清NGAL水平，全自動生化分析儀檢測血清CysC、Cr 和BUN水平，繪制ROC曲線并計算曲線下面積(AUC)，采用Pearson相關分析各指標與eGFR的相關性。結果 高血壓Ⅱ組和高血壓Ⅲ組患者血清NGAL、CysC、Cr和BUN水平高于對照組(P<0.05或<0.01)。NGAL、CysC、Cr和BUN診斷高血壓腎病AUC分別為0.873、0.857、0.824和0.791。Pearson相關分析結果顯示血清NGAL、CysC、Cr和BUN水平與eGFR均呈負相關(r分別為-0.836、-0.793、-0.762和-0.683，P均<0.01)。NGAL、CysC、Cr和BUN檢測診斷高血壓腎病的陽性率分別為 69.8%、65.6%、52.3%和54.4%，聯(lián)合檢測NGAL、CysC、Cr和BUN診斷高血壓腎病的陽性率可達80.9%。結論 血清NGAL和CysC檢測對高血壓腎早期損傷具有較高的診斷價值；血清NGAL、CysC、Cr和BUN聯(lián)合檢測有助于高血壓腎病的早期診斷。

高血壓腎?。恢行粤＜毎髂z酶相關脂質運載蛋白；胱抑素C；肌酐；尿素氮；腎小球濾過率

高血壓腎損傷是導致終末期腎病(ESRD)的最常見病因之一[1]。由高血壓導致的ESRD約占ESRD病因的30%，僅次于糖尿病[2]。因此，尋找診斷腎損傷的敏感指標，早期發(fā)現(xiàn)高血壓腎病，及時采取規(guī)范有效的治療措施，對防止高血壓腎病進一步發(fā)展為ESRD至關重要。為此，本文就血清中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)、胱抑素C(CysC)、肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平檢測對高血壓腎病的早期診斷價值進行了研究。

1　資料與方法

1.1 臨床資料選取2015年2～12月本院心血管內科住院的高血壓患者189例，根據(jù)KDIGO指南[3]中對慢性腎臟疾病(CKD)的診斷標準，將患者分為三組。高血壓Ⅰ組66例，男35例、女31例，年齡41～76(62.6±11.7)歲；腎小球濾過率(eGFR)≥90 mL/min，為無腎臟結構或功能異常的單純高血壓。高血壓Ⅱ組59例，男33例、女26例，年齡43～78(64.5±12.8)歲；患者eGFR≥90 mL/min但有腎臟結構或功能異常，或為89 mL/min≥eGFR≥60 mL/min的高血壓腎病。高血壓Ⅲ組64例，男33例、女31例，年齡44～79(65.4±13.1)歲；為eGFR<60 mL/min高血壓中晚期腎損傷患者。另隨機選取本院查體中心107例健康人作為對照組，男56例、女51例，年齡38～75(63.5±10.9)歲，其性別年齡構成與高血壓組比較差異無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)。入選對象均排除繼發(fā)性高血壓、自身免疫性疾病、糖尿病、惡性腫瘤等。

1.2檢測方法常規(guī)靜脈采血4 mL，置真空采血管，3 500 r/min離心10 min分離血清，分成2份。1份標本用貝克曼AU5400全自動生化分析儀(美國貝克曼公司)檢測血清中CysC、Cr和BUN的濃度；1份標本-70 ℃保存，檢測時室溫復溶，采用雷杜RT6000酶標儀(深圳雷杜生命科技有限公司)以酶聯(lián)免疫法檢測血清中NGAL的濃度。檢測步驟嚴格按照NGAL酶聯(lián)免疫檢測試劑盒(美國R&D公司)、CysC免疫比濁法檢測試劑盒( 上海復星長征醫(yī)學科學公司)、Cr酶法檢測試劑盒(北京利德曼生物公司)、BUN酶法檢測試劑盒(北京利德曼生物公司)說明書進行。

2　結果

2.1各組血清NGAL、CysC、Cr和BUN水平比較組間血清NGAL、CysC、Cr和BUN水平差異有統(tǒng)計學意義(F=50.13 ～397.67，P均<0.01)；與對照組相比，高血壓Ⅱ組和Ⅲ組血清NGAL、CysC、Cr和BUN水平均顯著升高(q=2.42～14.98，P<0.05或<0.01)。對照組和高血壓Ⅰ組間各指標的差異無統(tǒng)計學意義(q=0.61～1.75，P均>0.05)。見表1。

表1各組血清NGAL、CysC、Cr和BUN水平比較

注：與對照組比較：*P<0.05，#P<0.01。

2.2血清NGAL、CysC、Cr和BUN水平檢測對高血壓腎病的診斷價值以各檢驗指標為檢驗變量，診斷結果為狀態(tài)變量作ROC曲線分析，繪制血清NGAL、CysC、Cr和BUN檢測診斷高血壓腎病的ROC曲線， AUC分別為0.873、0.857、0.824和0.791；NGAL檢測診斷高血壓腎病的效果最好，CysC和Cr次之，BUN診斷高血壓腎病的效果較差。

2.3高血壓腎病患者血清中NGAL、CysC、Cr和BUN水平與eGFR的相關性Pearson相關分析結果顯示，血清中NGAL、CysC、Cr和BUN水平與eGFR均呈負相關(r分別為-0.836、-0.793、-0.762和-0.683，P均<0.01)，其中以NGAL的水平與eGFR相關性最好。

2.4NGAL、CysC、Cr和BUN單檢和聯(lián)合檢測診斷高血壓腎病陽性率比較按照試劑說明書推薦的參考范圍，NGAL、CysC、Cr和BUN檢測診斷高血壓腎病陽性率分別為 69.8%(132/189)、65.6%(124/189)、52.3%(99/189)和54.4%(103/189)；與其他指標比較，NGAL檢測診斷高血壓腎病的陽性率最高(P均<0.05)；四項指標聯(lián)合檢測診斷高血壓腎病的陽性率達80.9%(153/189)。

3　討論

NGAL屬于lipocalin家族中的成員，是中性粒細胞和腎小管上皮細胞在受到有害刺激時分泌的一種小分子糖蛋白[4]。在腎病領域，NGAL最早是急性腎損傷的早期診斷標志物。近年來研究發(fā)現(xiàn)NGAL在 CKD的腎小管也有表達，而且其表達水平與腎功能損傷程度密切相關，對CKD的診斷和預后評估具有重要意義[5]。Blumczynski等[6]對39例兒童高血壓患者的研究發(fā)現(xiàn)，其血清和尿中NGAL水平顯著升高，與尿白蛋白/肌酐比值呈正相關，與尿視黃醇結合蛋白和白細胞介素-18相比，可更早發(fā)現(xiàn)高血壓腎損傷。本研究結果顯示，高血壓Ⅱ組患者血清NAGL水平顯著升高，其升高幅度顯著大于Cr和BUN；而且隨病情加重，高血壓Ⅲ組NGAL水平升高更為顯著，與eGFR呈顯著負相關。ROC曲線分析顯示，血清NGAL檢測診斷高血壓腎病的AUC為0.873，陽性率為69.8%，顯著優(yōu)于血清CysC、Cr和BUN等指標。Gharishvandi等[7]研究發(fā)現(xiàn)，血清NAGL水平檢測在預測eGFR異常方面優(yōu)于CysC和Cr，當eGFR < 78 mL/min時，NAGL預測eGFR異常的敏感性為96%，特異性為100%。本文結果與Gharishvandi等[7]研究基本一致。

CysC亦稱半胱氨酸蛋白酶抑制蛋白C，由機體有核細胞產生，其產生和釋放速率相對恒定，且血清濃度變化不受飲食、體表面積、炎癥、肌肉量等因素的影響，而腎臟是其唯一的清除器官，因此是一種理想的反映eGFR 的內源性物質[8]。Shlipak等[9]在對11篇共90750例正常人群的研究和5例共2960例慢性腎病人群研究的meta分析發(fā)現(xiàn)，CysC水平與eGFR密切相關，用血清CysC水平計算eGFR的準確性可能優(yōu)于用Cr去衡量eGFR。本研究也發(fā)現(xiàn)高血壓腎病患者血清CysC水平明顯升高，且與eGFR呈明顯負相關，ROC曲線分析AUC可達0.857。BUN和Cr作為傳統(tǒng)反映腎功能的指標，在臨床上仍廣泛應用，但其影響因素較多。如血清BUN水平易受飲食、氮平衡、藥物等因素的影響，而血清Cr水平易受性別、年齡、體表面積、肌肉代謝等非腎性因素的影響，只有當eGFR下降超過50%時，血清BUN和Cr才輕微升高，診斷早期腎損害的敏感性和特異性均較差[10]。本研究結果也顯示，血清Cr和BUN水平在診斷早期高血壓腎損害方面均不如NGAL和CysC敏感。本研究還顯示，單一指標的檢測對診斷高血壓腎病的陽性率相對較低，而四項指標聯(lián)合檢測可顯著提高診斷早期高血壓腎病的陽性率，從而有利于早期發(fā)現(xiàn)高血壓腎病，減少漏診率。

綜上所述，NGAL和CysC在高血壓腎病的早期診斷方面具有較高的敏感性和特異性，是一種值得推廣的高血壓腎病早期篩查項目。NGAL、CysC、Cr和BUN 聯(lián)合檢測更有利于高血壓腎病的早期發(fā)現(xiàn)，對高血壓腎病的早期診斷具有重要的臨床價值。

[1] 朱運濤,張艷紅.高血壓性腎損害患者血清HCY、尿液β2 -MG水平變化及意義[J].山東醫(yī)藥，2014,54(34):82-83.

[2] Kopp JB.Rethinking hypertensive kidney disease: arterionephrosclerosis as a genetic, metabolic, and inflammatory disorder[J].Curr Opin Nephrol Hypertens, 2013,22(3):266-272.

[3] Stevens PE, Levin A. Evaluation and management of chronic kidney disease: synopsis of the kidney disease: improving global outcomes 2012 clinical practice guideline[J].Ann Intern Med, 2013,158(11):825-830.

[4] Bolignano D, Donato V, Coppolino G,et al.Neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) as a marker of kidney damage[J].Am J Kidney Dis, 2008,52(3):595-605.

[5] Patel ML, Sachan R, Verma A，et al.Neutrophil gelatinase-associated lipocalin as a biomarker of disease progression in patients with chronic kidney disease[J]. Indian J Nephrol, 2016,26(2):125-130.

[6] Blumczynski A, Sotysiak J, Lipkowska K,et al. Hypertensive nephropathy in children - do we diagnose early enough[J].Blood Press, 2012 ,21(4):233-239.

[7] Gharishvandi F, Kazerouni F, Ghanei E,et al.Comparative assessment of neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) and cystatin C as early biomarkers for early detection of renal failure in patients with hypertension[J].Iran Biomed J, 2015,19(2):76-81.

[8] Lopez-Giacoman S, Madero M. Biomarkers in chronic kidney disease, from kidney function to kidney damage[J].World J Nephrol, 2015,4(1):57-73.

[9] Shlipak MG, Matsushita K, rnlv J, et al. Cystatin C versus creatinine in determining risk based on kidney function[J]. N Engl J Med, 2013,369(10):932-943.

[10] Santos J, Martins LS.Estimating glomerular filtration rate in kidney transplantation: Still searching for the best marker[J].World J Nephrol, 2015,4(3):345-353.

10.3969/j.issn.1002-266X.2016.33.022

R544.1+4

B

1002-266X(2016)33-0063-03

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