翠青　傅一笑　蒙華慶等

[摘要】目的 探索編碼測驗、數(shù)字符號編碼測驗及符號搜索測驗作為認知內(nèi)表型的穩(wěn)定性。方法 從重慶市主城區(qū)募集6～16歲的雙生子，共募集122對雙生子，用數(shù)字符號編碼測驗及符號搜索測驗對雙生子進行認知功能測定。并采取雙生子頰黏膜標本以提取DNA進行卵型鑒定。分析三個測試的得分情況，評估雙生子兩個個體分值的相關(guān)系數(shù)。結(jié)果 最終有卵型鑒定結(jié)果的雙生子共102對，同卵雙生子組（以下用MZ表示）和異卵雙生子組（以下用DZ表示）的年齡及性別分布無顯著性差異（P>0.05），MZ組及DZ組編碼測驗、cording B及searching B相關(guān)系數(shù)分別為0.687和0.433，0.837和0.820，0.776和0.678，結(jié)果顯示均有顯著相關(guān)（P<0.05），且三個測驗結(jié)果相關(guān)系數(shù)MZ組高于DZ組。結(jié)論 韋氏兒童智力測試中編碼測驗及韋氏兒童智力測試第三版中的數(shù)字符號編碼測驗、符號搜索測驗所反應(yīng)的信息處理速度和啟動過程以及隨機自由回憶和線索性回憶功能受遺傳影響較大，適合作為認知內(nèi)表型的指標。

[關(guān)鍵詞】雙生子；神經(jīng)心理；韋氏兒童智力測試編碼測驗；韋氏兒童智力測試第三版數(shù)字符號編碼測驗；符號搜索測驗；認知功能；內(nèi)表型

[中圖分類號】R749 [文獻標識碼]A [文章編號]2095-0616（2016）11-21-04

我國兒童精神衛(wèi)生問題的檢出率約為7.03%～14.89%，內(nèi)表型比疾病的外在表現(xiàn)更接近疾病的生物學基礎(chǔ)，通過內(nèi)表型研究疾病的遺傳學基因具有顯著優(yōu)勢，內(nèi)表型的方法包括神經(jīng)生理、生物化學及認知等。目前探討的與精神疾病相關(guān)的認知內(nèi)表型包括言語記憶，工作記憶，持續(xù)注意及反應(yīng)抑制等。內(nèi)表型在精神醫(yī)學中的應(yīng)用還處于初步探索階段。應(yīng)用雙生子研究探索內(nèi)表型穩(wěn)定性是常用的重要方法之一，現(xiàn)有的雙生子研究多集中于發(fā)達國家，通過雙生子法探索兒童精神障礙的相關(guān)的認知內(nèi)表型穩(wěn)定性具有重要意義。

1資料與方法

1.1一般資料

自2010年開始，以教委-學校途徑在重慶地區(qū)募集共同生活的6～16歲雙生子，每對雙生子均由同一撫養(yǎng)者撫養(yǎng)。排除嚴重的上肢殘疾、軀體疾病及精神疾病者。受試者在簽署書面知情同意書后進行測定及采集頰黏膜標本。共納入雙生子122對，同卵雙生子男童共55例，女童共53例，異卵雙生子男童為44例，女童為52例。

1.2方法

1.2.1神經(jīng)認知功能評定工具 韋氏兒童智力測驗中的編碼測驗、韋氏兒童智力測試第三版的數(shù)字符號編碼測驗（WAIS-ⅢDigit Symbol-cording B，以下簡稱為cording B）及符號搜索（WAIS-ⅢSymbol-searching B，以下簡稱為searching B）。韋氏兒童智力測試中編碼測驗和第三版中的數(shù)字符號編碼測驗均能很好的反應(yīng)信息處理速度和啟動過程，信息處理速度及啟動過程與角回、內(nèi)頂皮層、左側(cè)額下回等腦區(qū)功能相關(guān)，三個神經(jīng)心理測試同時可評定隨機自由回憶和線索性回憶功能。

1.2.2卵型鑒定 所有受試雙生子均采集頰黏膜拭子，常溫下保存在裝有緩沖液的試管，隨后采用酚2氯仿法進行DNA提取，并采用STR分型法進行卵型鑒定。采用Promega公司的Power2Plex16系統(tǒng)進行16個基因座的同時擴增并用三色熒光鏡檢測15個STR基因座性別基因：PentaE，D18S51，D21S11，TH01，D3S1358，F(xiàn)GA，TPOX，D8S 1179，VWA，Amelogenin，Penta D，CSF 1 PO，D16S539，D7S820，D13S317和D5S818。以鑒定雙生子對是同卵還是異卵。若兩同性雙生子在5個STR位點基因型完全一致，則作出MZ判斷的可信度>99%。通過這種遺傳分析，單卵雙生子的可靠性可以達到0.1999。

1.3統(tǒng)計學方法

2結(jié)果

2.1 MZ組和DZ組一般人口學資料

共納入雙生子122對，有卵型鑒定結(jié)果的共102對。其中同卵雙生子54對，異卵雙生子48對。

對兩組雙生子的性別、年齡分別進行X²檢驗及t檢驗，結(jié)果顯示差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見表1。

2.2 MZ組和DZ組數(shù)字符號編碼測驗及symbol-searching B、symbol-cording B測驗正態(tài)性檢驗

102對雙生子分為同卵組及異卵組，進行數(shù)字符號編碼測驗及symbol-searching B、symbol-cording B測驗，對三個結(jié)果的得分進行Shapiro-Wilk正態(tài)性檢驗以確定相關(guān)分析統(tǒng)計方法，結(jié)果示除了DZ組searching B分數(shù)不符合正態(tài)分布外，其余均符合正態(tài)分布。見表2。

2.3 MZ組與DZ組編碼測驗及符號搜索測驗在雙生子問兩個個體之間相關(guān)分析

將102對雙生子按卵型鑒定結(jié)果分為同卵雙生子及異卵雙生子。將兩組同時按大小雙原則再行分組，根據(jù)編碼測驗、searching B及cording B分值情況分別對雙生子中兩個個體進行雙變量相關(guān)分析，并比較兩組的相關(guān)系數(shù)。根據(jù)上述正態(tài)檢驗結(jié)果，由于DZ組searching B的分值不符合正態(tài)分布，故進行雙變量的Spearman相關(guān)分析。

用Fisher函數(shù)法將r值轉(zhuǎn)化為Z值。估計MZ組Z值的95%CI及DZ組的Z值。從表3中可見編碼測驗、searching B及cording B的分值在雙生子對大小雙間有顯著相關(guān)，且對比95%的可信區(qū)間發(fā)現(xiàn)兩組相關(guān)系數(shù)具有可比性。三項測驗分值的雙生子對間相關(guān)系數(shù)MZ組均大于DZ組。

3討論

迄今為止精神疾病的發(fā)病機制仍未明確，大量家系研究和雙生子研究顯示遺傳在其中發(fā)揮重要作用。但對疾病的遺傳學研究尚未得到一致的結(jié)論，如精神分裂癥及雙相情感障礙存在很多交叉基因，多年研究結(jié)果未發(fā)現(xiàn)與疾病相關(guān)的特異性基因。并且現(xiàn)有的精神疾病診斷和分類標準缺少生物學基礎(chǔ)，傳統(tǒng)的遺傳研究仍未明確病因。內(nèi)表型處于疾病和遺傳基因之間，與遺傳基因的聯(lián)系更密切，內(nèi)表型正在此基礎(chǔ)上提出，目前內(nèi)表型在精神醫(yī)學中的應(yīng)用還處于初步階段。

探索內(nèi)表型的穩(wěn)定性除了家系研究以外，雙生子研究也是分析和研究這一問題的重要方法。雙生子研究的創(chuàng)始人Galton認為雙生子的研究對探討遺傳因素和環(huán)境對人性格和智能形成的影響。瑞典從1959年即開始開展雙生子研究工作，擁有1886年以來出生23 000對性別相同的雙生子病史資料。英國倫敦精神病研究所于1996年建立研究兒童早期發(fā)育的雙生子研究，15000對雙生子已進入該研究登記系統(tǒng)，研究顯示相同基因可能對兒童早期的語言和認知功能有重要作用。長期以來我國一直沒有大規(guī)模的雙生子登記系統(tǒng)，近年來該狀況已開始改善，2002年青島地區(qū)建立起有8583對雙生子的信息庫，為評價遺傳、環(huán)境因素與慢性疾病發(fā)生的關(guān)系及易感基因等研究打下基礎(chǔ)。但采用雙生子研究的方法對兒童青少年精神衛(wèi)生問題及認知發(fā)育的病因研究還有待啟動。部分研究顯示兒茶酚胺系統(tǒng)的基因DRD4、DAT1、COMT基因可能與一些兒童期的精神障礙發(fā)生有關(guān)，而與這些基因輕度相關(guān)的內(nèi)表型存在異常，雙生子研究探索兒童精神障礙的內(nèi)表型穩(wěn)定性具有重要意義。

本研究采用韋氏兒童智力測試中編碼測驗及韋氏兒童智力測試第三版中的symbol-searchingB、symbol-cording B測驗測量認知加工中信息處理速度和啟動過程，同時測定隨機自由回憶和線索性回憶功能，通過比較同卵雙生子組和異卵雙生子組中兩個個體的相關(guān)系數(shù)，定性的了解這部分認知功能受遺傳因素影響較多。結(jié)果顯示上述測驗指標所反映的認知功能同卵雙生子組及異卵雙生子組的兩個個體問均有顯著相關(guān)，且同卵雙生子組兩個個體間的相關(guān)系數(shù)高于異卵雙生子組。結(jié)果提示symbol-searching B、symbol-cording B測驗所評定的認知功能受遺傳影響可能性更大，且韋氏兒童智力測試第三版中的symbol-searching B、symbol-cording B測驗穩(wěn)定性更佳，可作為具有相對穩(wěn)定及精確的內(nèi)表型指標。正如相關(guān)研究顯示多動癥兒童組存在反應(yīng)抑制功能障礙，精神分裂癥患者在持續(xù)性注意，言語記憶和工作記憶方面存在缺陷，后續(xù)相關(guān)研究證實注意缺陷是精神分裂癥的核心特征，同時Snitz等研究結(jié)果支持信息處理速度、執(zhí)行功能的轉(zhuǎn)換功能以及工作記憶功能受損作為精神分裂癥易感性指標的觀點。Milner應(yīng)用威斯康星卡片測驗進行精神疾病認知功能研究，發(fā)現(xiàn)威斯康星卡片測驗中的持續(xù)錯誤數(shù)是區(qū)分腦損傷是否累及額葉的最敏感指標。

可見雙生子研究對于內(nèi)表型指標的探尋具有重要意義。分子遺傳學研究以及人類基因組學研究的進展為今后研究提出更高要求，對雙生子研究不只局限于單一的表現(xiàn)型變量，而應(yīng)收集相關(guān)的性狀和疾病信息及相關(guān)的環(huán)境因素，對象也不只局限于雙生子本身，也應(yīng)包括他們的家系成員。采用雙生子研究方法對內(nèi)表型進行探討，可為尋找精確穩(wěn)定及接近疾病本質(zhì)的內(nèi)表型提供基礎(chǔ)，為精神疾病預(yù)防策略的制定提供一定參考依據(jù)，有助于發(fā)現(xiàn)傳遞疾病易感性的、假定的多基因體系中的可能基因。