吳　菲

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多重耐藥鮑曼不動桿菌對不同成分手消毒劑敏感性研究

吳菲

[目的]探討多重耐藥鮑曼不動桿菌對成品手消毒劑的敏感性，為臨床使用提供依據(jù)。[方法]采用消毒劑對細菌殺菌效果及最低抑菌濃度(MIC)的檢測方法，評估多重耐藥鮑曼不動桿菌對3種成品手消毒劑的敏感性。[結(jié)果]3種手消毒劑對多重耐藥鮑曼不動桿菌殺菌效果為100%。對多重耐藥鮑曼不動桿菌的有效稀釋比從高到低依次是：正丙醇和乙醇成分、氯己定和乙醇成分、季銨鹽類成分其MIC分別為：0.17%和1.02%，0.03%和2.35%，0.03%。[結(jié)論]3種手消毒劑可以控制多重耐藥菌株的傳播，但抑菌作用以正丙醇和乙醇成分的手消毒劑最好。

鮑曼不動桿菌；多重耐藥；手消毒劑；敏感性

鮑曼不動桿菌(Acinetobacter baumannii，Ab)是非發(fā)酵、需氧的革蘭陰性桿菌，它廣泛分布于醫(yī)院環(huán)境中，是醫(yī)院重要的致病菌。近年來，院內(nèi)抗生素的大量使用，鮑曼不動桿菌出現(xiàn)了耐藥、多重耐藥情況。遲細俤等[1]曾報道住院病人鮑曼不動桿菌感染者中多重耐藥菌株感染分離率為31.36%，重癥監(jiān)護室和神經(jīng)外科的分離率則高達60%。耐藥菌株在臨床檢出率逐年增加，大量使用抗生素增加了多重耐藥鮑曼不動桿菌(MDR-Ab)定植。抵抗力弱或有創(chuàng)傷的病人可通過醫(yī)護人員的手或消毒不徹底的醫(yī)療器械獲得感染[2]。鮑曼不動桿菌的院內(nèi)傳播主要是醫(yī)護人員手的傳播，加強手衛(wèi)生管理成為減少院內(nèi)感染的必要手段。有文獻報道， MDR-Ab對濕熱、紫外線及化學消毒劑表現(xiàn)出更強的抵抗力。目前，控制接觸傳播的有效消毒制劑之一為手消毒劑，其產(chǎn)品檢驗常規(guī)為院內(nèi)常見的化膿性球菌、腸道致病菌和致病性酵母菌等的殺菌效果測定[3]。針對成品手消毒劑MDR-Ab的消毒效果評價未見報道。為探求MDR-Ab是否存在對成品手消毒劑耐藥而產(chǎn)生院內(nèi)傳播的問題，現(xiàn)取市場上常見的3種手消毒劑進行試驗。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1菌株來源試驗菌株為2014年3月—2015年2月從本院南、北、東3個院區(qū)住院病人尿液、痰液、膿液標本中分離所得。同一病人同一部位多次分離的菌株未重復(fù)計入，共計30例。試驗標準菌株：金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922、鮑曼不動桿菌ATCC19606、銅綠假單胞桿菌ATCC27853。

1.1.2儀器及試劑自動細菌測定儀(西門子walkaway96)、生化鑒定試劑、中和劑、手消毒劑等。手消毒劑：①季銨鹽成分(安立久牌手部皮膚消毒液)。有效成分為單、雙烷基甲基復(fù)合季銨鹽，濃度為0.14%～0.17%。上海九譽生物科技有限公司第一分公司生產(chǎn)，批號:20140516。②正丙醇和乙醇成分(潔芙柔消毒凝膠)。有效成分為正丙醇9%～11%，乙醇54%～66%。上海利康消毒高科技有限公司生產(chǎn)，批號：20140221。③氯己定和乙醇成分(衛(wèi)華漢德福消毒液)。有效成分為醋酸氯己定0.48%～0.58%，乙醇30%～40%。遼寧衛(wèi)華醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)，批號：20130101。中和劑的選擇：根據(jù)《醫(yī)療機構(gòu)消毒技術(shù)規(guī)范》[4]WS/T367-2012中要求選用0.3%吐溫80，0.3%卵磷脂，普通肉湯進行中和。

1.2方法最低抑菌濃度(MIC)測定：MIC測定方法參照文獻[5]，將消毒劑用標準硬水稀釋成各試驗濃度，從37 ℃培養(yǎng)24 h的新鮮平板中挑取單個菌落，取0.1 mL含菌量為106cfu/mL～108cfu/mL菌懸液，分別加入不同稀釋濃度5.0 mL消毒劑中振蕩混勻，各取0.5 mL分別加入平皿中，作用1 min，加入15 mL營養(yǎng)瓊脂溶液，置37 ℃溫箱培養(yǎng)48 h，結(jié)果以無菌生長的營養(yǎng)瓊脂平皿中消毒劑最高稀釋度為MIC。

2　結(jié)果

3種手消毒劑對多重耐藥鮑曼不動桿菌的抑菌效果為100%。有效稀釋比從高到低依次是：正丙醇和乙醇成分、氯己定和乙醇成分、季銨鹽類成分，以手消毒劑無菌生長的最高稀釋配比計算MIC。其MIC值分別為：0.17%和1.02%，0.03%和2.35%，0.03%。3種不同種類手消毒劑對多重耐藥鮑曼不動桿菌的MIC見表1；3種不同種類手消毒劑對多重耐藥鮑曼不動桿菌抑菌率見表2、圖1。

表1　3種不同稀釋倍數(shù)的手消毒劑對多重耐藥鮑曼不動桿菌的MIC

表2　3種不同稀釋倍數(shù)的手消毒劑對多重耐藥鮑曼不動桿菌的抑菌率(n=30)　%

圖1　3種不同種類手消毒劑對多重耐藥鮑曼不動桿菌抑菌率趨勢圖

3　討論

目前，如何篩選消毒劑尚無規(guī)范的方法，一般采用檢測消毒劑對細菌最低殺菌濃度(MBC值)和MIC值來評價[5]。本次試驗為成品手消毒劑，成分、濃度穩(wěn)定，可直接使用于臨床，所以采用MIC值來評價。我院實驗MDR-Ab，對成品手消毒劑無耐藥現(xiàn)象。正丙醇手消毒劑在抑制MDR-Ab中較其他手消毒劑效果好。為減少非藥物原因?qū)е碌腗DR-Ab，需強調(diào)醫(yī)護人員手衛(wèi)生的重要性，使其掌握正確的手衛(wèi)生方法，自覺提高手衛(wèi)生的依從性。MDR-Ab的耐藥機制非常復(fù)雜，臨床治療比較困難。有報道指出，某些MDR-Ab帶有54個耐藥基因，其中45個基因位于稱為“耐藥島”的耐藥區(qū)域，表達受抗菌藥物選擇壓力的影響[6]。根據(jù)全球性細菌耐藥監(jiān)測表明，不同地區(qū)的菌株對抗生素的敏感性存在差異，即使在同一所醫(yī)院不同科室耐藥譜也有不同，這與臨床醫(yī)生抗生素使用模式及環(huán)境關(guān)系密切。消毒劑對于不同細菌的MIC值監(jiān)測正如抗菌藥物對于不同細菌的MIC測定一樣對于控制細菌感染性疾病的流行有一定預(yù)警作用[3]。目前，多重耐藥鮑曼不動桿菌攜帶的qacE△1-sul1基因的不動桿菌可以通過主動外排機制將消毒劑排出體外，從而對抗季銨鹽、雙胍類、堿類消毒劑等，造成消毒劑失活，引起醫(yī)院內(nèi)感染的暴發(fā)流行[7]。本次試驗中也出現(xiàn)季銨鹽類手消毒劑對多重耐藥菌抑制作用較其他兩種手消毒劑差的現(xiàn)象。因此，在控制MDR-Ab傳播過程中必要時進行手消毒劑的藥物敏感試驗，以排除耐藥情況。

細菌在反復(fù)接觸低劑量或亞致死量消毒劑情況下就會受到選擇性壓力的作用，可能更容易產(chǎn)生抗藥性。有研究發(fā)現(xiàn)，許多菌株對消毒劑產(chǎn)生了抗藥性[8]。因此，臨床需加強消毒劑在醫(yī)院的規(guī)范使用，以控制并減少消毒劑耐藥現(xiàn)象。本次試驗的受試菌株均來自同一所醫(yī)院，樣本例數(shù)較少，試驗結(jié)果有一定局限性。

[1]池細俤，高世華，陳家龍，等.多重耐藥鮑曼不動桿菌醫(yī)院感染危險因素[J].中國感染控制雜志，2014，9(13):534-537.

[2]陳佰義，何禮賢，胡必杰，等.中國鮑曼不動桿菌感染診治與防控專家共識[J].中華醫(yī)學雜志，2012，92(2)：76-85.

[3]何曉峰，劉芳，曹晉桂，等.多重耐藥革蘭氏陰性桿菌消毒劑基因qacE△1-sul1監(jiān)測[J].中國感染控制雜志，2011，10(2):97-99.

[4]中華人民共和國衛(wèi)生部. 消毒技術(shù)規(guī)范[S].2012-04-05.

[5]沈林海，任淑華，孫建榮，等.多重耐藥鮑曼不動桿菌對常用消毒劑的敏感性實驗[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2008，9(18)：1729-1731.

[6]Foumier PE，Vallenet D，Barbe V，etal.Comparative genomics of multidrug resistance in acinetobacter baumannii[J].PLoS Genet，2006，2(1):62-72.

[7]黃連江，黃仕杰，梁小亮，等.廈門地區(qū)ICU多重耐藥鮑曼不動桿菌的耐藥性及同源性分析[J].廣東醫(yī)學，2013，12(24)：3744-3746.

[8]王震宇.細菌對消毒劑抗性研究進展[J].中國消毒學雜志，2007，24(2)：169-173.

(本文編輯范秋霞)

Study on sensitivity of multi drug resistant Acinetobacter baumannii for different components of hand disinfectants

Wu Fei

(Affiliated Second Hospital of Shenyang Medical Collge,Liaoning 110002 China)

沈陽醫(yī)學院科技基金項目，編號:20141028。作者簡介吳菲，碩士研究生，單位：110002，沈陽醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院。

R471

B

10.3969/j.issn.1009-6493.2016.20.027

1009-6493(2016)07B-2511-02

2015-11-02；

2016-06-10)