韋迪岱，陳晉，鄭文明

(三亞市人民醫(yī)院，海南三亞 572000)

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星形細胞瘤組織中PCNA、HMGB1的表達觀察

韋迪岱，陳晉，鄭文明

(三亞市人民醫(yī)院，海南三亞 572000)

目的觀察星形細胞瘤組織中增殖細胞核抗原(PCNA)和高遷移率族蛋白B1(HMGB1)的表達變化。方法采用免疫組化SP法檢測70例份星形細胞瘤組織(腫瘤組)和20例份癌旁正常組織(癌旁組)PCNA、HMGB1，分析兩指標間及其與星形細胞瘤臨床病理參數(shù)的關系。結(jié)果腫瘤組及癌旁組PCNA陽性表達率分別為90.0%、45.0%，HMGB1陽性表達率分別為72.9%、0，兩組比較，P均<0.05。PCNA、HMGB1表達均與星形細胞瘤病理分級有關(P均<0.05)。星形細胞瘤組織中PCNA與HMGB1表達呈正相關(r=6.82，P<0.05)。PCNA陽性、陰性表達者生存期分別為(21.27±7.15)、(33.47±4.61)個月，HMGB1陽性、陰性表達者生存期分別為(20.58±6.33)、(35.18±4.55)個月，兩者比較，P均<0.05。結(jié)論星形細胞瘤組織中PCNA、HMGB1的表達升高，并與星形細胞瘤病理分級有關，陽性表達者預后差。

星形細胞瘤；高遷移率族蛋白B1；增殖細胞核抗原

星形細胞瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)常見腫瘤之一，根據(jù)其惡性程度可分為星形細胞瘤(WHOⅡ級)、間變型星形細胞瘤(WHO Ⅲ級)和膠質(zhì)母細胞瘤(WHO Ⅳ級)。大量實驗表明，星形細胞瘤的病理過程與腫瘤的增殖、侵襲性相關[1]。增殖細胞核抗原(PCNA)是一種核蛋白，與細胞的增殖狀態(tài)密切相關，可作為反映腫瘤細胞增殖程度與判斷預后的指標[2]。高遷移率族蛋白B1(HMGB1)是一種細胞因子，研究認為其參與了部分腫瘤的增殖、生長、浸潤與轉(zhuǎn)移。本研究觀察了星形細胞瘤組織中PCNA、HMGB1的表達變化，并探討其意義。

1　資料與方法

1.1臨床資料收集2010年5月～2014年6月三亞市人民醫(yī)院收治的顱內(nèi)原發(fā)星形細胞瘤患者70例，男46例，女24例；年齡29～74(48.6±13.2)歲，其中≤40歲31例，>40歲39例；腫瘤直徑≤4 cm 24例，>4 cm 46例；按WHO 2007中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類標準[3]，Ⅰ、Ⅱ級23例，Ⅲ級26例，Ⅳ級21例。所有患者均經(jīng)病理證實且術前均未行放化療。手術留取原發(fā)星形細胞瘤組織70例份(腫瘤組)，另取20例份癌旁正常組織作為對照(癌旁組)。

1.2PCNA、HMGB1檢測方法采用免疫組化SP法。收集石蠟包埋的組織標本，常規(guī)切片(厚4～5 μm)、脫蠟，蒸餾水漂洗3遍，加入5%BSA，4 ℃條件下放置30 min，分別加入一抗4 ℃條件下過夜，次日沖洗后加入二抗，DBA顯色，蘇木素復染，脫水、透明、封片后鏡檢。PBS代替一抗作為陰性對照，已知抗體陽性標本作為陽性對照。結(jié)果判定標準：HMGB1陽性染色為細胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕色細小顆粒，PCNA陽性染色為細胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色乃至棕褐色顆粒。每一張星形細胞瘤切片選取連續(xù)的10個高倍視野(400×)，每個視野計數(shù)200個細胞，分別統(tǒng)計其中的所有陽性細胞，計算陽性率。

1.3統(tǒng)計學方法采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料比較采用χ2檢驗，相關性分析采用Pearson相關分析法。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結(jié)果

2.1兩組PCNA、HMGB1表達比較腫瘤組及癌旁組PCNA陽性表達率分別為90.0%(63/70)、45.0%(9/20)，HMGB1陽性表達率分別為72.9%(51/70)、0，兩組比較，P均<0.05。

2.2PCNA、HMGB1表達與星形細胞瘤臨床病理參數(shù)的關系結(jié)果見表1。由表1可知，PCNA、HMGB1表達均與星形細胞瘤病理分級有關(P均<0.05)。

2.3星形細胞瘤組織中PCNA與HMGB1表達的相關性星形細胞瘤組織中PCNA與HMGB1表達呈正相關關系(r=6.82，P<0.05)。

表1　PCNA、HMGB1表達與星形細胞瘤臨床病理參數(shù)的關系

2.4PCNA、HMGB1表達與星形細胞瘤患者預后的關系所有患者隨訪2 a以上。PCNA陽性、陰性表達者生存期分別為(21.27±7.15)、(33.47±4.61)個月，HMGB1陽性、陰性表達者生存期分別為(20.58±6.33)、(35.18±4.55)個月，兩者比較，P均<0.05。

3　討論

星形細胞瘤是常見的惡性腦腫瘤之一，惡性程度及病死率高。星形細胞瘤的典型特征為腫瘤侵襲性及轉(zhuǎn)移，目前認為一些細胞調(diào)節(jié)因子及生物活性介質(zhì)在其中發(fā)揮至關重要的作用。大量臨床試驗表明，高表達侵襲性生物因子的患者預后較差。因此，尋找一個星形細胞瘤新的基因治療靶點尤為重要。

PCNA是一種S期細胞核內(nèi)大量表達的核蛋白之一，在DNA的合成調(diào)控中發(fā)揮至關重要的作用[4]。細胞無限增殖被認為是腫瘤發(fā)生機制之一，腫瘤細胞的增殖活性與腫瘤的浸潤、轉(zhuǎn)移和預后密切相關[5]。有研究[6,7]表明，正常胃黏膜組織PCNA不表達，而胃癌組織中PCNA呈高表達，分化程度越低，含量越高。本研究顯示，腫瘤組PCNA陽性表達率高于癌旁組，PCNA表達與星形細胞瘤病理分級有關，PCNA陽性表達者生存期短于陰性表達者。

HMGB1是一種細胞因子，研究[8]認為其參與了腫瘤的增殖、生長、浸潤與轉(zhuǎn)移。近年大量研究[9～12]證實，HMGB1與胃癌、結(jié)直腸癌、胰腺癌的侵襲及淋巴、血液轉(zhuǎn)移相關。HMGB1在多種腫瘤和未成熟細胞中表達豐富，趨化作用可被其誘導產(chǎn)生，參與腫瘤細胞轉(zhuǎn)移。本研究顯示，腫瘤組HMGB1陽性表達率高于癌旁組，HMGB1表達與星形細胞瘤病理分級有關，HMGB1陽性表達者生存期短于陰性表達者。我們推測，可能與HMGB1通過Ras、MAPK途徑，促使MAPKs磷酸化，進而激活NF-κB，而NF-κB是一種重要的核轉(zhuǎn)錄因子，存在于真核細胞中，其與基因上啟動子區(qū)的固定核苷酸序列結(jié)合啟動基因轉(zhuǎn)錄，從而完成細胞增殖與分化、腫瘤形成與轉(zhuǎn)移等一系列重要生物學功能[13]。

綜上，星形細胞瘤組織中PCNA、HMGB1的表達升高，并與星形細胞瘤病理分級有關，陽性表達患者預后差。

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10.3969/j.issn.1002-266X.2016.15.017

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1002-266X(2016)15-0050-02

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