●孫麗敏 邢秀梅（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所 吉林 長春 130112）

1 野生梅花鹿染色體研究進展

梅花鹿東北亞種（拉丁學(xué)名為Cervus nippon dybowskii，下文均以CND予以表述）是國內(nèi)鹿科動物中最廣為人知的一個品種，目前，對CND細(xì)胞核組成部分的研究遠多于其他鹿科動物。經(jīng)研究顯示，目前CND種群數(shù)量約為900 只，我國在1978年將CND列為一級保護動物，所以對CND資源的保護迫在眉睫。通過大量的實踐研究，我國目前已培育出了新的梅花鹿品種，不過因為很多養(yǎng)殖場對梅花鹿的育種與選種存在一定的片面性，所以在繁育新品時存在一定的盲目性，引入了很多品種之外的基因，進而影響了品系的純度，且影響了整個鹿群的質(zhì)量[1]。

20 世紀(jì)70年代初期，我國就開始著手梅花鹿細(xì)胞核組成部分的研究。近年我們研究了野生梅花鹿細(xì)胞核組成部分的G、C染帶，經(jīng)對9 只CND482個細(xì)胞的分析，確認(rèn)CND細(xì)胞核組成部分?jǐn)?shù)量為2n=66；在此基礎(chǔ)上經(jīng)C染帶對細(xì)胞核組成部分異染色質(zhì)的分布進行了研究。經(jīng)對9 只CND的186 個帶有銀染核仁組成區(qū)進行Ag-NORS染色法分析，結(jié)果表明，有95%的細(xì)胞有4 條細(xì)胞核組成部分出現(xiàn)Ag-NORS[2]。通過此次研究可認(rèn)為，東北野生馬鹿與CND是鹿屬中兩個不同的物種，因為東北野生馬鹿細(xì)胞核組成部分?jǐn)?shù)目通常為68 條，而CND細(xì)胞核組成部分?jǐn)?shù)目通常為66 條。而東北野生馬鹿和CND雜交，結(jié)果顯示，不論正交亦或反交，F(xiàn)1 代都具有較強的可育性，這和驢馬雜交造成子代無繁育力的情況為負(fù)相關(guān)性。不過經(jīng)對CND與東北馬鹿種間雜交F1代能育性的細(xì)胞核組成部分細(xì)胞遺傳學(xué)基礎(chǔ)的研究顯示，東北野生馬鹿與CND的細(xì)胞核組成部分具有一定的同源性，差異僅涉及一個羅伯遜易位，睪丸組織切片顯示F1 代生殖腺生長發(fā)育無異常，由此可證，東北野生馬鹿與CND間隔離機制不完善，進而東北野生馬鹿與CND均屬一個孟德爾群體[3]。

通過限制酶Hae3 與Hind3 對CND中期細(xì)胞核組成部分予以顯帶研究，結(jié)果顯示二者可使CND中期細(xì)胞核組成部分顯示出G樣帶與C樣帶，由此可證，CND12 對細(xì)胞核組成部分與兩條性細(xì)胞核組成部分結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)在上述酶處理過程中具有顯著的異質(zhì)性[4]。在此基礎(chǔ)上對CND的C帶與高分辨G帶予以分析，可繪制出CND高分辨G帶模式圖，結(jié)果表明，在亞種水平上，CND具有C帶多態(tài)性。近年來我們對CND的R帶予以綜合性研究，得到了CND的R分帶帶型，CND單套細(xì)胞核組成部分共顯帶400條；而一些學(xué)者對CND的N帶進行了分析，細(xì)胞核組成部分主要在著絲點區(qū)域顯帶，5、13、16、26、32 號常細(xì)胞核組成部分的著絲粒區(qū)域出現(xiàn)Ag-NORS、陽性帶，X細(xì)胞核組成部分臂出現(xiàn)深染區(qū)，Y細(xì)胞核組成部分整體深染，證明CND具有N帶多態(tài)性。

2 其他鹿科動物的細(xì)胞核組成部分研究

我們對鹿科各種核型及C、G帶帶型，對鹿科各屬、種的核型以及帶型予以對比分析，對其細(xì)胞核組成部分進化有了一定的認(rèn)知。在研究中對4 只雄性中亞馬鹿實施了細(xì)胞核組成部分組型分析及C、G帶研究，結(jié)果表明，細(xì)胞核組成部分?jǐn)?shù)目有多態(tài)現(xiàn)象(2n=66,67)[5]。

經(jīng)對毛冠鹿的細(xì)胞核組成部分組型進行研究，結(jié)果顯示毛冠鹿中存在細(xì)胞核組成部分?jǐn)?shù)的多態(tài)現(xiàn)象，因為其細(xì)胞核組成部分總臂數(shù)均為52 定值，所以由此推算，其多態(tài)性是因為羅伯遜易位所致。經(jīng)大量鹿科動物細(xì)胞核組成部分的研究，我們發(fā)現(xiàn)，鹿科動物細(xì)胞核組成部分進化2n數(shù)均呈現(xiàn)出從少至多的規(guī)律，亞科間細(xì)胞核組成部分差異主要體現(xiàn)于X細(xì)胞核組成部分，鹿亞科的細(xì)胞核組成部分差異除了空齒鹿亞科外主要由羅伯遜斷裂所造成。

近年來我國其他學(xué)者對梅花鹿、水鹿與其雜交F1 代細(xì)胞核組成部分組型進行對比，在雄性F1 代核型中發(fā)現(xiàn)了不配對的細(xì)胞核組成部分；中科院動物研究所的相關(guān)學(xué)者們研究了赤麂云南亞種的細(xì)胞核組成部分核型，進一步明確了其細(xì)胞核組成部分?jǐn)?shù)目為2n=32[6]。

3 總結(jié)

綜上所述，梅花鹿東北亞種是國內(nèi)鹿科動物中最廣為人知的一個品種，目前，對CND細(xì)胞核組成部分的研究遠多于其他鹿科動物。經(jīng)研究顯示，目前CND種群數(shù)量急劇減少，所以對CND資源的保護迫在眉睫。我們對鹿科各種的核型及C、G帶帶型，對鹿科各屬、種的核型以及帶型予以對比分析，對其細(xì)胞核組成部分進化有了一定的認(rèn)知。CND12 對細(xì)胞核組成部分與兩條性細(xì)胞核組成部分結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)在上述酶處理過程中具有顯著的異質(zhì)性。在此基礎(chǔ)上對CND的C帶與高分辨G帶予以分析，可繪制出CND高分辨G帶模式圖，結(jié)果表明，在亞種水平上，CND具有C帶多態(tài)性。近年來我們對CND的R帶予以綜合性研究，得到了CND的R分帶帶型，CND單套細(xì)胞核組成部分共顯帶400 條。東北野生馬鹿和CND雜交，結(jié)果顯示，不論正交亦或反交，F(xiàn)1 代都具有較強的可育性，且東北野生馬鹿與CND間隔離機制不完善，進而東北野生馬鹿與CND同屬一個孟德爾群體。細(xì)胞核組成部分由脫氧核糖核酸及蛋白質(zhì)構(gòu)成，熒光原位雜交技術(shù)的發(fā)展使得細(xì)胞遺傳學(xué)與分子遺傳學(xué)有機的結(jié)合在一起，進而使細(xì)胞核組成部分研究在基因定位、細(xì)胞遺傳學(xué)圖構(gòu)建等領(lǐng)域起到積極的作用，同時對野生鹿科動物染色體的研究具有現(xiàn)實意義。