細(xì)胞生物學(xué)

用于細(xì)胞核鈣成像的新型鈣指示劑的構(gòu)建與鑒定

齊特，楊華乾，范雪新，等

細(xì)胞核鈣離子是基因轉(zhuǎn)錄等細(xì)胞核反應(yīng)過(guò)程重要的調(diào)控因子.然而，細(xì)胞核內(nèi)鈣離子信號(hào)的調(diào)控機(jī)制尚不清楚.缺乏穩(wěn)定的、敏感的細(xì)胞核鈣指示劑，是導(dǎo)致其調(diào)控機(jī)制難以研究的重要原因之一.針對(duì)這一問(wèn)題，設(shè)計(jì)了能夠在細(xì)胞核內(nèi)特異性表達(dá)的、具有核定位功能的鈣指示劑.以基因編碼鈣指示劑（GECIs）家族成員GCaMP6為模板，首先融合了對(duì)鈣離子不敏感的紅色熒光蛋白tdTomato來(lái)對(duì)局部的鈣信號(hào)進(jìn)行量化，其次融合了核定位信號(hào)（NLS），使GCaMP6能夠特異定位于細(xì)胞核中.結(jié)果表明，NLS-GCaMP6-tdTomato能夠在細(xì)胞核中有效發(fā)揮作用，并且在鈣敏感性與動(dòng)力學(xué)上，也與GCaMP6相當(dāng).這一新型細(xì)胞核鈣指示劑將為研究細(xì)胞核鈣離子的功能及其調(diào)控機(jī)制提供新的方法與途徑.

細(xì)胞核鈣離子；鈣成像；基因編碼鈣指示劑

來(lái)源出版物：中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào)，2015，31（6）： 592-598

聯(lián)系郵箱：葉海虹，yehh@ccmu.edu.cn