付杰　陳亮　潘虹　馬京梅　于麗　楊慧霞

[摘要]目的：探討染色體多態(tài)性與不良孕產(chǎn)史的關(guān)系。方法：對(duì)2007年10月1日至2014年9月30日在北京大學(xué)第一醫(yī)院行羊水穿刺的兩組孕婦的胎兒染色體多態(tài)性的發(fā)生率進(jìn)行比較。孕婦曾有自然流產(chǎn)、胎停育、胎兒畸形史共836例（A組）；已分娩正常活嬰、生育年齡大于35歲并且B超未發(fā)現(xiàn)胎兒異常2899例（B組）。結(jié)果：A組檢出30例胎兒染色體多態(tài)性，檢出率為3.59%，明顯高于B組胎兒染色體多態(tài)性檢出率2.03%（P<0.01）。A組檢出的染色體多態(tài)性中，9號(hào)染色體臂間倒位[inv（9）]最多，檢出率為1.67%，與B組0.83%相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）：A組檢出含Y染色體胎兒432例，4例Yqh-，檢出率為0.93%，B組檢出含Y染色體胎兒1471例，3例Yqh-，檢出率為0.20%，Yqh-兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。而D、G組染色體隨體區(qū)變異、1qh+、9qh+、16qh+及Yqh+等染色體多態(tài)性檢出率兩組胎兒差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：染色體多態(tài)性中inv（9）、Yqh-與不良孕產(chǎn)史可能存在相關(guān)性，需進(jìn)一步大樣本資料加以證實(shí)。染色體多態(tài)性與不良孕產(chǎn)史的關(guān)系值得進(jìn)一步深入研究。

[關(guān)鍵詞]染色體多態(tài)性；不良孕產(chǎn)史

[中圖分類號(hào)]R698+.2 [文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A

染色體多態(tài)性是可遺傳的同源染色體位點(diǎn)變異或染色體區(qū)域變異，通過(guò)大量人群對(duì)比研究表明對(duì)表型不會(huì)產(chǎn)生影響。但一些研究表明染色體多態(tài)性在不良孕產(chǎn)史夫婦中較普通人群發(fā)生率高，其相關(guān)性有待于積累更多的臨床資料。我們對(duì)因自然流產(chǎn)、胎停育、胎兒畸形來(lái)我院行羊水細(xì)胞遺傳學(xué)檢測(cè)的不良孕產(chǎn)史孕婦進(jìn)行回顧性分析，以胎兒染色體多態(tài)性的檢出率為主因素進(jìn)行研究，探討染色體多態(tài)性及與不良孕產(chǎn)史之間的關(guān)系。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象

2007年10月1日至2014年9月30日在我院行羊水穿刺的孕婦3735例，其中836例有自然流產(chǎn)、胎停育、胎兒畸形引產(chǎn)史（A組），排除遺傳代謝、夫妻一方染色體異常病例；2899例已分娩正?；顙搿⒃袐D生育年齡大于35歲、沒(méi)有不良孕產(chǎn)史并且B超未發(fā)現(xiàn)胎兒異常（B組）。

1.2 方法

常規(guī)分裂中期染色體核型分析，G顯帶。

染色體多態(tài)性的判定：（1）異染色質(zhì)增大或減小：觀察1、9、16、Y染色體及D、G組染色體隨體與隨體柄，必要時(shí)輔以C顯帶、銀染分析，如果感興趣的染色體區(qū)段比同源染色體相同區(qū)段明顯增大或減小，就可認(rèn)為是異染色質(zhì)多態(tài)性。如果Y染色體>D組染色體，認(rèn)為是Yqh+；Y染色體

總結(jié)、分析兩組染色體多態(tài)性的檢出率，采用x²檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 發(fā)現(xiàn)的染色體多態(tài)性變異類型

（1）1、9、16號(hào)染色體長(zhǎng)臂異染色質(zhì)區(qū)長(zhǎng)度的增加（1qh+、9qh+、16qh+）：（2）D/G組染色體隨體區(qū)變異；（3）Y染色體變異，包括Yqh+、Yqh-：（4）inv（9）（p11q13）。發(fā)現(xiàn)胎兒染色體多態(tài)性后，我們對(duì)夫婦雙方均做了外周血染色體檢查，證實(shí)胎兒染色體多態(tài)性的親源來(lái)源，為非新生變異。

2.2 染色體多態(tài)性的檢出率

A組孕婦檢出30例胎兒染色體多態(tài)性，檢出率為3.59%（30/836）：B組孕婦檢出59例胎兒染色體多態(tài)性，檢出率為2.03%（59/2899）。A組染色體多態(tài)性檢出率與B組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。

A組檢出的染色體多態(tài)性中，inv（9）最多，檢出率為1.67%（14/836），與B組0.83%（24/2899）的檢出率相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；A組檢出含Y染色體胎兒432例，Yqh-檢出率為0.93%（4/432），B組檢出含Y染色體胎兒1471例，Yqh一檢出率為0.20%（3/1471），兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。見表1。

3 討論

3.1 兩組間染色體多態(tài)性檢出率的差異

染色體多態(tài)性主要表現(xiàn)為異染色質(zhì)的變異，特別是含有高度重復(fù)DNA的結(jié)構(gòu)性異染色質(zhì)，通常不含有編碼基因，故一般認(rèn)為不引起表型效應(yīng)。在產(chǎn)前診斷中，當(dāng)檢出胎兒染色體多態(tài)性時(shí)，為了減輕其父母的焦慮，我們建議雙方進(jìn)行外周血染色體檢查，以證實(shí)胎兒染色體異常核型的親源性。本研究所選胎兒染色體的多態(tài)性均來(lái)自父母之一，其檢出率的差異一定程度地反映了父母染色體多態(tài)性發(fā)生率的差異。由于B組孕婦B超尚未發(fā)現(xiàn)胎兒結(jié)構(gòu)異常，減少了因異染色質(zhì)變異可能與各種胎兒畸形相關(guān)所引起的結(jié)果偏差。本研究A組胎兒染色體多態(tài)性總檢出率為3.59%，而B組為2.03%，兩組胎兒染色體多態(tài)性的總檢出率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。但是，通過(guò)對(duì)兩組間各種染色體多態(tài)性的差異進(jìn)一步分析，僅inv（9）、Yqh-兩組間存在差異。

B組胎兒inv（9）檢出率為0.83%，明顯低于A組的檢出率1.67%，提示inv（9）與不良孕產(chǎn)史有一定的相關(guān)性。有學(xué)者認(rèn)為inv（9）倒位區(qū)即（p11q12）僅含著絲粒和著絲粒異染色質(zhì)，互換后很少形成異常染色體，因此，一些遺傳學(xué)家甚至認(rèn)為inv（9）是沒(méi)有表型效應(yīng)的正常變異。但是也有研究表明，在有精神疾病、慢性粒細(xì)胞性白血病患者中，inv（9）的發(fā)生率較高，是否是位置效應(yīng)所致尚不清楚，其相關(guān)性還有待于大樣本研究及9號(hào)染色體DNA標(biāo)記物與疾病連鎖分析研究。由于臂間倒位的染色體在第一次減數(shù)分裂中經(jīng)過(guò)倒位圈的互換，將導(dǎo)致帶有部分重復(fù)、部分缺失的重排染色體的生成，因此inv（9）的臨床意義在染色體多態(tài)中是最受關(guān)注的，但并沒(méi)有inv（9）導(dǎo)致重組異倍體的報(bào)道。因此，大部分inv（9）是沒(méi)有危害的，而有些特定的inv（9）可能具有臨床意義，但是單純依靠G顯帶很難明確定位斷裂點(diǎn)，有必要通過(guò)分子細(xì)胞遺傳學(xué)探針、分子生物學(xué)方法進(jìn)行確定。我們的研究表明對(duì)于不良孕產(chǎn)史患者，不應(yīng)忽視inv（9）可能存在的表型效應(yīng)。

兩組Yqh-的檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05，提示Yqh-與不良孕產(chǎn)史有一定的相關(guān)性。在Y染色體上有一些與男性生殖相關(guān)的基因，如位于Y染色體的Vp11.3區(qū)域與睪丸發(fā)生相關(guān)的SRY基因，位于Y染色體Yq11區(qū)與精子發(fā)生相關(guān)的無(wú)精子因子（Azoospermia factor，AZF），精子發(fā)生基因主要位于Y染色體長(zhǎng)臂分別稱為AZFa、AZFb和AZFc的3個(gè)區(qū)域。Yqh-是否伴隨一些基因的丟失從而影響胎兒的生育能力是檢出Yqh-后要考慮的問(wèn)題。由于胎兒的Yqh-為父源性，因此當(dāng)父親具有正常生育能力，胎兒的Y染色體大小與父親的一致時(shí)，一般不認(rèn)為具有臨床效應(yīng)，故未行Y染色體微缺失檢測(cè)。DYZ1是Y染色體長(zhǎng)臂遠(yuǎn)端的異染質(zhì)區(qū)的重要串聯(lián)重復(fù)序列，占Y染色體近40%，Y染色體的長(zhǎng)度與DYZ1拷貝數(shù)有關(guān)，Yqh-時(shí)DYZ1的拷貝數(shù)降低。研究發(fā)現(xiàn)DYZ1的一定拷貝數(shù)可能對(duì)維持Y染色體的結(jié)構(gòu)和功能是必須的，重復(fù)流產(chǎn)患者存在DYZ1重復(fù)片段的部分缺失，我們的結(jié)果與此吻合。

本研究中A組胎兒D、G組染色體隨體區(qū)變異、1qh+、9qh+、16qh+及Yqh+等染色體多態(tài)性檢出率與B組胎兒差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。異染色質(zhì)在紡錘絲附著、染色體運(yùn)動(dòng)、減數(shù)分裂配對(duì)及姊妹染色單體結(jié)合上起重要作用。因此一些研究認(rèn)為異染色質(zhì)變異會(huì)減弱染色體配對(duì)、紡錘絲附著，下調(diào)正常表達(dá)的基因，影響減數(shù)分裂。但目前仍缺乏對(duì)這類人群生殖細(xì)胞的分裂與分化及胚胎發(fā)育的研究，也沒(méi)有異染色質(zhì)變異導(dǎo)致減數(shù)分裂異常，生成重組異倍體的報(bào)道。另外細(xì)胞遺傳學(xué)對(duì)染色體多態(tài)性的觀察描述不夠精細(xì)，不能發(fā)現(xiàn)異染色質(zhì)變異中的潛在差異，造成染色體多態(tài)性與生殖異常相關(guān)性研究的結(jié)論不一，既有研究表明染色體多態(tài)性在不良孕產(chǎn)史夫婦中發(fā)生率高，也有研究表明染色體多態(tài)性和生殖異常無(wú)相關(guān)性，不影響體外受精及胚胎移植的結(jié)果。因此有必要利用分辨率更高的方法如分子生物學(xué)技術(shù)，從基因、分子等層面認(rèn)識(shí)染色體多態(tài)性，研究染色體多態(tài)性與不良孕產(chǎn)史的關(guān)系。

綜上所述，本研究中，inv（9）、Yqh-與不良孕產(chǎn)史可能相關(guān)，需進(jìn)一步大樣本研究進(jìn)行證實(shí)，各種染色體多態(tài)性的臨床效應(yīng)可能不盡相同。分子水平的研究將對(duì)揭示染色體多態(tài)性與不良孕產(chǎn)史關(guān)系具有重要意義。

（收稿日期：2015-12-08）