邵東梅，邢 坤，陳 雷

(大連海洋大學，遼寧省海洋生物資源恢復與生境修復重點實驗室，遼寧大連 116023)

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口蝦蛄促雄腺的形態(tài)結構研究

邵東梅，邢 坤，陳 雷

(大連海洋大學，遼寧省海洋生物資源恢復與生境修復重點實驗室，遼寧大連 116023)

[目的]對口蝦蛄的形態(tài)結構進行觀察。[方法]利用組織切片技術觀察雄性口蝦蛄(Oratosquillaoratoria)促雄腺的形態(tài)結構特征。[結果]口蝦蛄促雄腺1對，乳白色，呈橢圓形，分別位于第三步足的交接肢基部內側，包埋于肌肉、肝胰腺之間，通過組織膜附著在輸精管表面。腺體發(fā)育分為3個時期：增殖期、合成期和分泌期。腺體的分泌方式為全漿式。[結論]該研究結果可為豐富口蝦蛄繁殖生物學的研究提供基礎資料。

口蝦蛄；促雄腺；組織學

口蝦蛄(Oratosquillaoratoria)隸屬節(jié)肢動物門甲殼綱軟甲亞綱口足目蝦蛄科口蝦蛄屬[1]，是沿海地區(qū)重要的漁業(yè)捕撈對象。促雄腺(Androgenic gland)又稱促雄性腺，是甲殼動物軟甲亞綱生物所特有的雄性內分泌腺體，對于精巢的發(fā)育和性別分化起決定作用[1-3]。近年來，對十足目甲殼動物促雄腺以及促雄腺的位置、結構和功能的研究日益廣泛和深入[4]，然而對口足目的口蝦蛄促雄腺的研究報道較少。筆者應用組織切片技術研究了口蝦蛄促雄腺的形態(tài)結構特征，旨在為豐富口蝦蛄繁殖生物學的研究提供基礎資料。

1　材料與方法

1.1試驗材料口蝦蛄均于2014年4～11月購自大連，雄性口蝦蛄體長11～14 cm，體重24.5～36.8 g。

1.2組織切片觀察解剖鏡下活體取出口蝦蛄促雄腺，用Bouin氏液固定，24 h后用酒精二甲苯脫水透明處理，常規(guī)石蠟包埋，常溫下連續(xù)切片，切片厚5～6 μm，使用燙片機烘烤2 h后，蘇木精-伊紅染色后，置于光學顯微鏡下觀察并拍照。

2　結果與分析

2.1位置形態(tài)觀察從圖1可以看出，口蝦蛄促雄腺1對，分別位于第三步足的交接支基部內側，包埋于肌肉和肝胰腺之間，通過組織膜附著在輸精管表面。肉眼觀察發(fā)現，口蝦蛄的促雄腺呈乳白色；橢圓形；大小約為5～10 mm3。肉眼不易于觀察；腺體組織易脫落。

注：CA交接肢;AG.促雄腺；VD.輸精管；A附屬腺。Note：CA.Copulatory appendage；AG.Androgenic gland；VD.Vas deferens；A.Ffiliated gland.圖1　口蝦蛄促雄腺的結構Fig.1　The androgenic gland structure of adult male O.oratoria

2.2組織切片觀察

2.2.1增殖期。腺體體積相對較小，各空心腺泡間界限明顯，腺泡內的腺細胞數量相對較少，排列多不規(guī)則，腺細胞呈橢圓形；細胞核體積約占整個細胞的50%，細胞核染色深，嗜堿性強；核仁1個，不易分辨，核染色質含量少(圖2A)。

2.2.2合成期。腺泡間界限清晰，腺泡內腺細胞數量明顯增多，且規(guī)則的排列在腺泡膜內側，腺細胞多呈長條形，少數為橢圓形；細胞核規(guī)則的排列在細胞的外側，細胞核染色較淺，嗜堿性減弱；核仁1～3個，清晰可見，核染色質含量增多(圖2B、C)。

2.2.3分泌期。分泌期腺細胞出現2種類型：Ⅰ類細胞染色深，嗜堿性強；Ⅱ類細胞染色淺，嗜堿性較Ⅰ類型弱；隨著分泌活動的進行，Ⅰ類細胞的數量逐漸比Ⅱ類細胞多(圖2D)。腺體體積小，腺泡間界限模糊，血竇明顯；腺泡內腺細胞數量減少，腺泡內出現空隙；腺細胞多數為圓形，不規(guī)則的在腺泡內部，呈游離狀態(tài)(圖2E)；細胞質含量少，腺細胞細胞核固縮，位于腺細胞中央，染色深，嗜堿性強；核仁消失，核染色質含量甚少。

注：A.增殖期；B、C.合成期；D、E.分泌期。Note: A. Proliferative stage; B, C. Synthetic stage; D, E. Secretory stage.圖2　不同時期促雄腺的形態(tài)特征觀察Fig.2　Morphological characterization of androgenic gland in different development stages

3　結論與討論

3.1促雄腺的位置分布與形態(tài)結構該研究表明，口蝦蛄促雄腺的位置分布與十足類相似，位于第三步足的交接支基部內側，包埋于肌肉、肝胰腺之間，通過組織膜附著在輸精管表面；但是，其形態(tài)結構與腺體細胞較十足類之間差異顯著。

3.2促雄腺腺細胞結構該研究表明增殖期口蝦蛄促雄腺腺體體積相對較小，各空心腺泡間界限明顯，腺泡內的腺細胞數量相對較少，排列多不規(guī)則，腺細胞呈橢圓形；細胞核體積約占整個細胞的50%，細胞核染色深，嗜堿性強；此階段細胞處于發(fā)育階段，細胞核處于有絲分裂間期，為細胞的擴增做準備。合成期，腺體體積較腺泡發(fā)育期明顯增大，腺泡間界限清晰，腺泡內腺細胞數量明顯增多，且規(guī)則地排列在腺泡膜內側；細胞核規(guī)則地排列在細胞外側，嗜堿性減弱；核仁1～3個；分泌期，腺泡界限仍然清晰，但腺細胞間界限模糊，腺泡內出現空隙，血竇明顯。腺體細胞內的大量細胞器有外排現象，腺細胞細胞核固縮，多因腺體分泌激素導致細胞核固縮，細胞質的分解導致了腺體細胞間界限模糊。

口蝦蛄在全年各月份均可發(fā)現促雄腺體，個體差異不明顯。腺體發(fā)育的時間段與個體大小的相關性不顯著，而與周年溫度有關?？谖r蛄促雄腺內部結構不同于其他甲殼類，每個空心腺泡是由多個腺細胞組成，每個腺泡外圍有結膜，彼此隔離，界限清晰?？谖r蛄促雄腺分泌方式為胞漿式分泌方式，與中國對蝦(Penaeuschinensis)[5]、三疣梭子蟹[6]等多數十足類甲殼動物相似。

促雄腺腺體發(fā)育不僅受外界環(huán)境的影響，同時也受到蝦體自身激素調節(jié)器官的影響。眼柄的處理對促雄腺的發(fā)育有一定影響[7]，若研究口蝦蛄外界條件及自身處理對腺體的影響，可進一步試驗進行研究。

[1] 吳萍，樓允東，邱高峰.甲殼動物雄性腺研究的進展[J].水產學報，1999，23(1)：77-83.

[2] 張亞群，王克堅.甲殼動物促雄腺激素功能、生化和分子結構的研究[J].水產科學，2014，33(5)：331-336.

[3] SUZUKI S.Androgenic gland hormone is a sex-reversing factor but cannot bee a sex-determining factor in the demale crustacean isopodsArmadillidiumvulgare[J].General and comparative endocrinology，1999，115：370-378.

[4]葉海輝，李少菁，王桂忠.十足目甲殼動物促雄性腺研究概述[J].動物學雜志，2001，36(1)：43-47.

[5] 李富花，相建海.中國對蝦促雄腺形態(tài)結構和功能的初步研究[J].科學通報，1996，41(15)：1418-1422.

[6] 蘇青，朱冬發(fā)，楊濟芬，等.三疣梭子蟹促雄腺顯微和超微結構的研究[J].水產科學，2010，29(4)：193-197.

[7] KHALAILA I，MANOR R，KELLER R，et al.The eyestalk-androgenic gland-testis endocrine axis in the crayfishCheraxquadricarinatus[J].General and comparative endocrinology，2002，127：147-156.

Morphological Characterization of Androgenic Gland inOratosquillaoratoria

SHAO Dong-mei, XING Kun, CHEN Lei

(Key Laboratory of Marine Bio-resources Restoration and Habitat Reparation in Liaoning Province, Dalian Ocean University, Dalian, Liaoning 116023)

[Objective] To study the morphological characterization of androgenic gland inOratosquillaoratoria. [Method] The morphological characterization of androgenic gland in maleO.oratoriawas observed firstly by using histological section technique. [Result] There was one pair of white ovalandrogenic glandlocated at the base of the third pereopod and embodied between the muscles and hepatopancreas, and the androgenic gland adhered to the surface of vas deferens through the organic membrane. The development of androgenic gland was divided into proliferative, synthetic and secretory stages.The androgenicgland was a holocrine gland. [Conclusion] The study can provide basic data for the research of enriching reproductive biology ofO.oratoria.

Oratosquillaoratoria; Androgenic gland; Histology

國家海洋公益性行業(yè)科研專項(200905019)：國家自然科學基金項目(41006079)

邵東梅(1989- )，女，遼寧葫蘆島人，碩士研究生，研究方向：漁業(yè)資源。

2016-05-31

S 914.4

A

0517-6611(2016)19-006-02