許樂，王媛媛，侯婭妮西安培華學(xué)院

HPLC對感冒靈膠囊中對乙酰氨基酚的含量測定研究

許樂，王媛媛，侯婭妮
西安培華學(xué)院

目的：建立測定感冒靈膠囊中對乙酰氨基酚含量的方法。方法：采用高效液相色譜法，Kromasil C18柱（200 mm×4.6 mm，5 μm），以甲醇：水：冰醋酸（25:75:0.5）為流動相，檢測波長：244 nm，流速：1.0 mL·min-1。結(jié)果：對乙酰氨基酚在50-200 μg·mL-1濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系（r=0.9993），平均回收率為99.318%，RSD為0.21%（n=6）。結(jié)論：用高效液相色譜法測定對乙酰氨基酚含量快速準(zhǔn)確，重現(xiàn)性良好，適用于感冒靈膠囊中對乙酰氨基酚的定量分析。

感冒靈膠囊；對乙酰氨基酚；含量；高效液相色譜

感冒靈膠囊是中西復(fù)方制劑，由三叉苦、野菊花、崗梅、金盞銀盤、薄荷油等中藥以及對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏等化學(xué)藥組成，具有辛熱解表，清熱解毒的作用，主要用于治療風(fēng)熱感冒，頭和身體疼痛，咽喉紅腫疼痛，等癥狀。由于感冒靈膠囊現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中對乙酰氨基酚含量測定的方法存在一些問題，如測定方法專屬性較差、實驗的重現(xiàn)性差、代表性不佳，且操作時間較長等。本研究在現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)檢的基礎(chǔ)上，建立了一種簡單、快速、準(zhǔn)確的HPLC的檢測方法。

一、儀器與試藥

上海舜宇恒平高效液相色譜儀、LC1620A高壓恒流泵、LC1620A紫外檢測器、N2000色譜工作站(浙江大學(xué)智能信息研究所)。對乙酰氨基酚標(biāo)準(zhǔn)品（中國食品藥品檢定研究院，批號：100018-200408，純度按100%計算）；感冒靈膠囊兩批分別為：華潤三九醫(yī)藥股份有限公司（批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字Z44021939，批號：1509008s）；廣西嘉進(jìn)藥業(yè)有限公司（批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字Z20055271，批號：1512301）；甲醇為色譜純；冰醋酸為分析純；水為重蒸餾水。

二、實驗方法與結(jié)果

1色譜條件：色譜柱為Kromasil C18柱（200 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相為甲醇：水：冰醋酸=25：75：0.5；檢測波長為244 nm；流速為1.0 mL·min-1；進(jìn)樣量：20 μL。

2對照品溶液的配制：將對乙酰氨基酚對照品在105℃干燥2小時至恒重，精密稱定，加流動相制成濃度為80 μg·mL-1對乙酰氨基酚溶液。

3供試品溶液的配制：取感冒靈膠囊去殼研細(xì)，精密稱量0.2 g，于50 mL容量瓶中，加流動相溶解，超聲處理5 min，冷卻后加流動相定容，混勻即得。

4陰性溶液的制備：按照處方組成，取感冒靈膠囊中除對乙酰氨基酚之外的其余成分，研細(xì)，精密稱量適量，以流動相溶解，定容即得。

5線性范圍的考察：精密稱取經(jīng)干燥恒重處理的對乙酰氨基酚對照品，用流動相溶解，配制成濃度為0.25 mg/mL的對乙酰氨基酚溶液，量取適量配制成終濃度為200、160、120、80、50 μg·mL-1的對照品溶液，分別取20 μL進(jìn)樣，記錄色譜圖，將對乙酰氨基酚的峰面積與濃度進(jìn)行回歸分析，繪標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為:Y= 1614.3X-12758(r=0.9993)。結(jié)果表明對乙酰氨基酚在50-200 μg· mL-1濃度范圍與吸收峰面積線性關(guān)系良好。

6系統(tǒng)適用性實驗：分別取陰性對照溶液、對照品溶液和供試品溶液，各進(jìn)樣20 μL，記錄色譜圖，如圖1所示（A：隱形對照，B:對照品，C:供試品）。結(jié)果顯示：供試品中對乙酰氨基酚峰的分離度比較好，而且陰性對照溶液在相同條件下未見干擾色譜峰。

圖1　對乙酰氨基酚PHLC色譜圖

7精密度實驗：取同一批次的感冒靈膠囊制備成供試品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，測定峰面積，計算RSD=0.10%。

8重現(xiàn)性實驗：分別取華潤三九醫(yī)藥股份有限公司三九感冒靈膠囊樣品6份，按2.3項下方法配制。依法測定對乙酰氨基酚的峰面積，計算RSD=0.36%。

9回收率實驗：取同一批次的感冒靈膠囊樣品0.1 g，精密稱定，加入濃度為0.220 mg·mL-1的對乙酰氨基酚對照品溶液10 mL，置于50 mL容量瓶中，加流動相超聲處理，冷卻定容，搖勻后制成，測定平均回收率為99.318%，RSD=0.21%（n=6）。

10穩(wěn)定性實驗：取同一供試品溶液,每隔2 h測定1次,在0、2、4、6、8、10、12 h各進(jìn)樣20 μL，記錄色譜圖，計算RSD=0.59%(n=6)，結(jié)果表明對乙酰氨基酚在12 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

11含量測定：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20 μl，按上述色譜條件進(jìn)樣測定，計算樣品中對乙酰氨基酚的含量，結(jié)果顯示批號為為1509008s的對乙酰氨基酚含量（標(biāo)示量）為101.2%；批號為1512301的對乙酰氨基酚含量（標(biāo)示量）為103.4%。

三、結(jié)論

本實驗用高效液相色譜法測定感冒靈膠囊中對乙酰氨基酚的含量，對其線性范圍進(jìn)行了考察、測定精密度實驗、重現(xiàn)性實驗、系統(tǒng)適用性實驗、回收率實驗、穩(wěn)定性實驗和含量測定，結(jié)果顯示對乙酰氨基酚在50-200 μg·mL-1濃度范圍內(nèi)與吸收面積呈良好的線性關(guān)系，平均回收率99.318%，RSD為0.21%，方法快速準(zhǔn)確，重現(xiàn)性良好，適用于感冒靈膠囊中對乙酰氨基酚的定量分析。

[1]張黎莉.感冒靈膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中檢測方法的研究[D].福建農(nóng)林大學(xué),2014.

[2]孫晶,薛壯.常用解熱鎮(zhèn)痛藥中對乙酰氨基酚含量測定[J].科技視界,2014,No.9205:184-185.