王健，方建軍（衢州市食品藥品檢驗研究院，浙江衢州324000）

HPLC快速測定月餅中5種添加劑

王健，方建軍*
（衢州市食品藥品檢驗研究院，浙江衢州324000）

建立快速、簡便、高效、準(zhǔn)確測定安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和脫氫乙酸的高效液相色譜方法。將月餅樣品充分粉碎，加超純水，用超聲輔助提取，過濾后定容，0.45 μm微孔濾膜過濾上機(jī)檢測。5種食品添加劑在1.00 μg/mL～50.00 μg/mL的范圍具有良好線性，相關(guān)系數(shù)在0.995以上，加標(biāo)回收率在90%～100%之間，RSD在5%以內(nèi)，表明試驗方法準(zhǔn)確可靠。

安賽蜜；苯甲酸；山梨酸；糖精鈉；脫氫乙酸

食品添加劑是為了改善食品品質(zhì)和色、香、味以及為滿足防腐和加工工藝的需要而加入食品中的化學(xué)合成物或者天然物質(zhì)。甜味劑是賦予食品甜味的添加劑，可分為天然甜味劑和人工合成甜味劑［1］。防腐劑是指一類加入食品中能防止或延緩食品腐敗的食品添加劑，其本質(zhì)是具有抑制微生物增殖或殺死微生物的一類化合物。安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和脫氫乙酸屬于食品中常見的食品添加劑，其中安賽蜜、糖精鈉屬于甜味劑，苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸屬于防腐劑。食品添加劑是有機(jī)化工產(chǎn)品，除了防止食物腐敗變質(zhì)和味覺上給人甜的感覺，毫無營養(yǎng)價值，但是違禁、濫用以及超范圍、超標(biāo)準(zhǔn)使用添加劑，都會給食品質(zhì)量、安全衛(wèi)生以及消費(fèi)者的健康帶來巨大的損害。近年來，由于消費(fèi)者的食品安全意識日益增強(qiáng)，各種食品添加劑的使用情況越來越受到人們的關(guān)注與重視。在我國《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》中對其使用范圍和相應(yīng)限量均有明確規(guī)定［2］。

目前，國標(biāo)報道的分析方法多是針對這些添加劑中的一種或幾種［3-7］，而關(guān)于這5種食品添加劑同時檢測的報道甚少，因此建立一種快速準(zhǔn)確且能夠同時測定食品中這5種食品添加劑的檢測方法十分必要。由于高效液相色譜法同時具備分離效能高、選擇性強(qiáng)、靈敏度高、分析速度快等優(yōu)點，因此，在食品分析檢測中應(yīng)是目前進(jìn)行上述物質(zhì)分析的首選方法。本試驗探討了采用反相高效液相色譜法同時測定月餅中的安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和脫氫乙酸的方法。

1　材料與方法

1.1儀器與試劑

1.1.1儀器

1260高效液相色譜儀：安捷倫。

1.1.2試劑

甲醇、超純水，乙酸銨、標(biāo)準(zhǔn)品（安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和脫氫乙酸）純度≥99%。

1.2標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

準(zhǔn)確稱取5種標(biāo)準(zhǔn)品1mg，用超純水定容至10mL，配成0.1 g/L的標(biāo)準(zhǔn)儲備液，至于4℃冰箱中避光保存。使用時用超純水逐級稀釋儲備液，配制成1.00、5.00、10.00、20.00、50.00 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.3樣品提取

本實驗與現(xiàn)有的國家標(biāo)準(zhǔn)所用的提取溶劑的區(qū)別見表1。

表1　本試驗與現(xiàn)有的國家標(biāo)準(zhǔn)所用的提取溶劑的區(qū)別Table 1　The difference between the present experiment and the existing standard

由表1可知，本試驗采用的提取溶劑的種類最少、無污染、低成本、操作簡單方便，符合當(dāng)前倡導(dǎo)的資源節(jié)約型和環(huán)境友好型思想。

準(zhǔn)確稱取充分粉碎的月餅5 g（精確到0.01 g）于100 mL燒杯中，加入超純水40 mL左右，超聲提取10 min，用中性濾紙過濾到50 mL容量瓶中，用超純水定容，待檢測。

1.4液相色譜條件

1）色譜柱：YWG-C18 4.6 mm×250 mm 10 μm不銹鋼柱。

2）流動相：甲醇∶乙酸銨溶液（0.02mol/L）=5∶95。

3）流速：1 mL/min。

4）檢測器：紫外檢測器，230 nm波長，0.2AUFS。

2　結(jié)果與討論

2.1線性范圍和檢出限

將事先配制好的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液（1、5、10、20、50 μg/mL）經(jīng)上機(jī)檢測，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，線性方程、線性范圍及相關(guān)系數(shù)見表2，色譜圖見圖1。

表2　5種添加劑的線性方程、線性范圍及線性相關(guān)系Table 2　Linear equation，linear range and linear phase relationship of five additives

圖1　5種食品添加劑混合標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖Fig.1　Five kinds of food additives mixed with standard spectra

由表2可知5種食品添加劑的線性范圍在1μg/mL～50 μg/mL，相關(guān)系數(shù)在0.995以上，線性良好。

2.2加標(biāo)回收、精密度及檢測限

在月餅中添加了100 μg/kg的5種食品添加劑混合標(biāo)準(zhǔn)品，進(jìn)行液相色譜測定，其回收率及精密度見表3，按S/N=3計算5種添加劑的最低檢出限，結(jié)果表3。

由表3可知5中添加劑的加標(biāo)回收率在90%～100%之間，RSD在5%以內(nèi)，表明試驗方法準(zhǔn)確可靠。

3　結(jié)論

本試驗采用低成本，無污染的超純水提取樣品中的5種食品添加劑的簡便方法，在結(jié)果準(zhǔn)確可靠的前提下，可以在時間短的情況下，利用高效液相色譜儀進(jìn)行分析檢測，大大提高了工作成本和工作效率。本試驗最大的優(yōu)點是一次性對5種食品添加劑進(jìn)行了檢測，并且前處理提取方法比現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)都簡單，步驟少，避免繁瑣操作步驟帶來的損失。5種食品添加劑在1.00 μg/mL～50.00 μg/mL的范圍具有良好線性，相關(guān)系數(shù)在0.995以上，加標(biāo)回收率在90%～100%之間，RSD在5%以內(nèi)，表明試驗方法準(zhǔn)確可靠。

表3　5種添加劑的加標(biāo)回收、精密度及檢出限Table 3　Five kinds of additives，recovery，precision and detection limit

［1］鄧珍珍，關(guān)寧.食品甜味劑糖精鈉的檢測方法探究［J］科技傳播，2011（7）：115-116

［2］中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會.GB2760-2014食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)［S］北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2015

［3］中華人民共和國衛(wèi)生部，中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會.GB/T 5009.121-2003食品中脫氫乙酸的測定［S］.北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2004

［4］中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局，中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會.GB/T 23377-2009食品中脫氫乙酸的測定高效液相色譜法［S］.北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2004

［5］中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局，中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會.GB/T 5009.28-2003食品中糖精鈉的測定［S］.北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2004

［6］中華人民共和國衛(wèi)生部，中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會.GB/T 5009.140-2003飲料中乙?；前匪徕浀臏y定［S］.北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2004

［7］中華人民共和國衛(wèi)生部，中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會.GB/T 5009.29-2003食品中山梨酸、苯甲酸的測定［S］.北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2004

HPLC Rapid Determination of Five Kinds of Additives in Moon Cake

WANG Jian，F(xiàn)ANG Jian-jun*
（Quzhou City Food and Drug Inspection Institute，Quzhou 324000，Zhejiang，China）

A rapid，simple，efficient and accurate method based on HPLC was developed for determination of acesulfame potassium，benzoic acid，sorbic acid，sodium saccharin and dehydroacetic acid in moon cake.The moon cake sample was ultrasonically extracted by ultrasonic extraction with ultrapure water，the supernatant was constant volume after filtered with ltrapure water，then the sample was tested after filtered by 0.45 μm microporous membrane.The linear range of the method was 1.00 μg/mL-50.00 μg/mL with a correlation coefficient of 0.995.The average recovery among 90%and 100%，relative standard deviations（RSD）within 5%，which indicated the research method was accurate and reliable.

acesulfame potassium；benzoic acid；sorbic acid；sodium saccharin；dehydroacetic acid

10.3969/j.issn.1005-6521.2016.10.038

王?。?986—），男（漢），助理工程師，本科，從事食品安全檢測與研究。
*

方建軍（1983—），男（漢），工程師，碩士研究生，從事食品安全檢測與研究

2015-05-22