董　娜　張雪青　穆　恩

(天津市環(huán)湖醫(yī)院電生理科，天津　300060)

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老年腦出血患者血清基質(zhì)金屬蛋白酶-9、細胞纖維連接蛋白水平及其與病情程度的相關性

董娜張雪青穆恩1

(天津市環(huán)湖醫(yī)院電生理科，天津300060)

〔摘要〕目的觀察老年腦出血患者血清基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-9和細胞纖維連接蛋白(cFN)水平的變化及其與病情程度的關系。方法觀察60例老年腦出血患者和60例健康老年人(對照組)血清MMP-9和cFN水平，比較不同出血量和出血部位的腦出血患者血清MMP-9和cFN水平的差異，分析腦出血患者血清MMP-9、cFN水平與年齡、出血量、血腫周圍水腫體積和美國國立衛(wèi)生研究院腦卒中量表(NIHSS)評分的相關性。結(jié)果腦出血組血清MMP-9和cFN水平均明顯高于對照組(P<0.05)；大量出血組血清MMP-9、cFN水平高于中量出血組，中量出血組高于少量出血組(P<0.05)；腦室出血組血清MMP-9、cFN水平高于腦葉出血組，而腦葉出血組上述指標高于基底節(jié)出血組(P<0.05)；腦出血組MMP-9、cFN水平與年齡、出血量、血腫周圍水腫體積和NIHSS評分顯著正相關(P<0.05)。結(jié)論血清 MMP-9及cFN 水平可間接反映腦出血患者腦組織損傷的嚴重程度，早期對其含量測定可輔助 CT 判斷病情。

〔關鍵詞〕腦出血；基質(zhì)金屬蛋白酶-9；細胞纖維連接蛋白

腦出血占所有腦卒中的 10%～20%，是目前循證醫(yī)學證實有效治療手段較少的腦卒中之一〔1〕，腦出血的發(fā)生與腦血管的彈性下降及長期的慢性血管內(nèi)皮損傷導致的動脈粥樣硬化有關，病死率及致殘率可達30%以上〔2〕。腦出血發(fā)生后可通過刺激周圍神經(jīng)組織及血管促進生物活性物質(zhì)的浸潤，加重組織損傷?；|(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-9是MMPs 的一種，MMP-9可以水解神經(jīng)細胞間質(zhì)成分中膠原纖維，參與炎癥細胞的損傷作用。細胞纖維連接蛋白(cFN)由動脈管壁的血管內(nèi)皮細胞和成纖維細胞分泌，與心腦血管疾病有關，cFN的升高可以損傷血管內(nèi)皮，進而參與腦出血導致的神經(jīng)細胞損傷〔3〕。本研究探討老年腦出血患者血清MMP-9和cFN水平的變化及其與腦出血量、水腫程度及出血部分的關系。

1資料與方法

1.1一般資料2014年3月至2015年6月我院老年腦出血患者60例，納入標準：①年齡≥65歲；②高血壓性腦出血者；③符合腦出血診斷標準。排除標準：①合并血管畸形或腦外傷者；②合并心臟、肝臟和腎功能不全者。男34例，女26例；年齡65～80歲，平均(72.45±6.21)歲。對照組60例為體檢健康老年人，男30例；女30例，年齡65～79歲，平均(72.37±5.87)歲。兩組年齡、性別無明顯差異，具有可比性。

1.2酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清MMP-9和cFN水平采取靜脈血，經(jīng)1 500 r/min離心5 min后得到血清，4℃保存待測，以標準品稀釋液將標準品復溶，靜置15 min后混勻，倍比稀釋為7個濃度，取出板條，除了空白對照孔外每個孔加入不同濃度的標準品，劑量為100 μl/孔，采用封板蓋封住，室溫反應120 min，使用磷酸鹽緩沖液(PBS)洗滌3次，室溫孵育1 h，PBS洗滌3次，加入底物(50 μl/孔)，避光孵育25 min，加入終止液5 min后測定450 nm處吸光度。人cFN ELISA 試劑盒購自美國 Cusabio 公司，MMP-9檢測試劑盒購自南京凱基生物科技有限公司。

1.3評價指標觀察血清MMP-9和cFN水平，比較不同出血量和出血部位的腦出血患者血清MMP-9和cFN水平的差異，分析腦出血患者血清MMP-9、cFN水平與年齡、出血量、血腫周圍水腫體積和美國國立衛(wèi)生研究院腦卒中量表(NIHSS)評分的相關性。

1.4統(tǒng)計學方法采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件進行t檢驗或χ2檢驗，Pearson相關分析。

2結(jié)果

2.1兩組血清MMP-9、cFN水平比較腦出血組血清MMP-9和cFN水平均高于對照組(P<0.001)。見表1。

2.2不同腦出血量患者的MMP-9、cFN水平的比較大量出血組血清MMP-9、cFN水平高于中量出血組，中量出血組高于少量出血組(P<0.05)。見表1。

表1　兩組及各亞組血清MMP-9、cFN水平的比較

2.3不同出血部位的腦出血患者血清MMP-9、cFN水平的比較腦室出血組血清MMP-9、cFN水平高于腦葉出血組，而腦葉出血組上述指標高于基底節(jié)出血組(P<0.05)。見表1。

2.4腦出血患者血清MMP-9、cFN水平的相關性腦出血患者的MMP-9、cFN水平與年齡、出血量、血腫周圍水腫體積和NIHSS評分顯著正相關(P<0.05)。見表2。

表2　腦出血患者血清MMP-9、cFN水平的相關分析

3討論

腦出血與高血脂、糖尿病、高血壓、血管老化、吸煙等密切相關。腦出血患者往往由于情緒激動、費勁用力時突然發(fā)病，早期死亡率很高，同時30%～35%腦出血患者存在不同程度的運動障礙、認知障礙、言語吞咽障礙等后遺癥〔4〕。影響腦出血患者預后的因素中，除了腦出血導致的血腫本身外，腦出血周邊神經(jīng)組織水腫、血管炎癥性刺激等原因?qū)е碌纳锘钚晕镔|(zhì)釋放，可以進一步促進腦血管的水腫、腦組織的損傷。cFN參與血管內(nèi)皮損傷及血小板性血栓的形成，在腦缺血導致的周圍神經(jīng)損傷中發(fā)揮了重要作用〔5,6〕；在缺血缺氧狀態(tài)下及血清炎癥因子白細胞介素(IL)-6、IL-10、腫瘤壞死因子(TNF)-α的刺激下，血管內(nèi)皮細胞、成熟的纖維細胞、Ⅱ型膠質(zhì)細胞等可合成 MMP-9，貯存在中性粒細胞和 T 細胞中的 MMP-9在腦缺血急性期大量釋放，促進腦血管水腫及神經(jīng)元細胞的不可逆性損傷，導致面癱、言語障礙及精細運動功能障礙〔7,8〕。

Wang等〔9,10〕探討了基底節(jié)區(qū)腦出血導致的腦卒中患者的臨床資料，發(fā)現(xiàn)患者血清 cFN 的含量與 CT所示出血量間具有相關性 ，同時cFN與病情轉(zhuǎn)歸中腦出血的吸收具有顯著的相關性。腦水腫是腦出血的繼發(fā)性病理改變，腦水腫程度與患者的病死率及恢復期并發(fā)癥的發(fā)生具有重要的評估價值〔11〕，本次研究提示 cFN及MMP-9可以作為判斷腦出血患 者病情嚴重程度的臨床指標之一。

NIHSS通過評估感覺功能、瞳孔反應、意識障礙、運動系統(tǒng)受累等，進而評估腦血管疾病患者的神經(jīng)功能，NIHSS評分越高，腦出血患者的預后越差〔12〕，本次研究表明MMP-9、cFN血清的升高，往往提示神經(jīng)系統(tǒng)功能的損傷較為嚴重，二者是評估腦出血患者預后的重要臨床指標。本研究首次探討了不同部位腦出血患者血清MMP-9、cFN的差異，發(fā)現(xiàn)腦室出血患者的血清相關指標最高，而基底節(jié)出血患者表達最低，考慮豆紋動脈外側(cè)支破裂或者丘腦膝狀體動脈和丘腦穿通動脈破裂所致的腦出血，對于周圍腦組織的刺激較輕，MMP-9、cFN的分泌不足，另一方面，MMP-9、cFN的上述改變可以為協(xié)助診斷不同部位的腦出血提供參考，但其協(xié)助診斷的一致性仍需要隨機對照、獨立樣本的進一步探討。

4參考文獻

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〔2014-12-19修回〕

(編輯苑云杰)

通訊作者：穆恩(1976-)，男，副主任醫(yī)師，博士，主要從事危重癥急救研究。

〔中圖分類號〕R743.9

〔文獻標識碼〕A

〔文章編號〕1005-9202(2016)13-3178-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.13.039

1天津醫(yī)院外科ICU

第一作者：董娜(1976-)，女，主治醫(yī)師，碩士，主要從事神經(jīng)電生理研究。