鐘　貞　李　穎

1.麗珠集團(tuán)麗珠制藥廠，廣東　珠海　519020；2.珠海天鴻潤生物工程有限公司，廣東　珠海　519020

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正交試驗優(yōu)化氯霉素包合工藝的實驗研究

鐘貞1李穎2*

1.麗珠集團(tuán)麗珠制藥廠，廣東珠海519020；2.珠海天鴻潤生物工程有限公司，廣東珠海519020

【摘要】目的：研究復(fù)方爐甘石氯霉素包合的制備工藝，以提高氯霉素洗劑的穩(wěn)定性。方法：采用飽和水溶液法制備氯霉素包合物，通過正交試驗，以包封率為考察指標(biāo)，篩選最佳工藝條件。結(jié)果：氯霉素-γ-環(huán)糊精包合物的最佳制備工藝條件為：氯霉素與γ-CD的質(zhì)量比為1∶2，包合溫度為40℃，包合時間為2h，γ-CD與水的用量比例為1∶30(g/ml)。用該工藝獲得的氯霉素包合物進(jìn)行制備復(fù)方爐甘石氯霉素洗劑，在6個月后檢測結(jié)果與生產(chǎn)時進(jìn)行對比，氯霉素含量較為穩(wěn)定。結(jié)論：γ-環(huán)糊精包合氯霉素制備的復(fù)方爐甘石氯霉素洗劑工藝穩(wěn)定，重現(xiàn)性良好，為工業(yè)化生產(chǎn)復(fù)方爐甘石氯霉素洗劑提供實驗依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】復(fù)方爐甘石氯霉素；工藝改進(jìn)；正交實驗

復(fù)方爐甘石氯霉素洗劑是皮膚科常用藥物，具有收斂、止癢、殺菌、消炎的功效，臨床對滲出性皮炎、感染性濕疹、膿皰瘡及痱子等有較好療效[1-2]。復(fù)方爐甘石氯霉素洗劑包括爐甘石、氯霉素、氧化鋅、薄荷等主要成分，但氯霉素在水溶液中穩(wěn)定性差，容易降解，其發(fā)生水解的同時，也易發(fā)生氧化還原反應(yīng)，降解產(chǎn)物主要有二氯乙酸、1-(4-硝基苯)- 2-二羥基乙酰胺基-1,3-丙二醇、1-(4-硝基苯)- 2-氨基-1,3-丙二醇、對硝基苯甲醛、4,4′氮雜苯甲酸等多種過敏原[3-4]，該類物質(zhì)是引起過敏反應(yīng)的主要原因。為降低復(fù)方爐甘石氯霉素洗劑中過敏物質(zhì)的生成，提高復(fù)方制劑的穩(wěn)定性和質(zhì)量，本文將對該制劑工藝進(jìn)行改進(jìn)研究。

1儀器與材料

1.1儀器1260型液相色譜儀(日本島津)；DZKW-4電熱恒溫水浴鍋(北京中興偉業(yè)儀器有限公司)；SHZ-D循環(huán)水式真空泵(鄭州長城科工貿(mào)有限公司)；6020AB真空干燥箱(北京中興偉業(yè)儀器有限公司)；BS110S電子天平(北京賽多利斯天平有限公司)；XTZ-05T體視顯微鏡(上海光學(xué)儀器六廠)。

1.2材料氯霉素對照品(批號：130303-200614)、氯霉素二醇物對照品(批號：100712-201303)、對硝基苯甲醛對照品(批號：130562-200501)均由中國藥品生物制品檢定所提供；γ-環(huán)糊精(γ-CD，批號：20150607，西安天正藥用輔料有限公司)；無水乙醇(批號：20150806，成都市科龍化工試劑廠)；聚維酮-PVP(批號：20150607，西安天正藥用輔料有限公司)；正己烷(批號：20141201，成都市科龍化工試劑廠)；鹽酸(批號：20141125，成都市科龍化工試劑廠)。

2方法與結(jié)果

2.1氯霉素含量測定

2.1.1色譜條件色譜柱：C18(250mm×4.6mm，5μm)；流動相：甲醇-0.4%磷酸溶液(55∶45)；進(jìn)樣量：20μl；檢測波長：272nm；流速：1.0ml/min。

2.1.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密稱取對照品0.02g，置100ml容量瓶中，用甲醇溶解并用30%甲醇稀釋至刻度，精密吸取對照品溶液1、2、4、6ml及對照貯備液10ml于10ml容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，照標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)樣，以對照品濃度為橫坐標(biāo)(C)，峰面積為縱坐標(biāo)(A)進(jìn)行線性回歸，回歸方程為A=9.127×103C+0.0987(R2=0.9998)，表明氯霉素濃度在15～28μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.1.3包合物中氯霉素含量測定精密稱定20mg氯霉素包合物，置于50ml干燥的容量瓶中，用30%甲醇溶解并稀釋至50ml，搖勻，60℃水浴5min，過濾，取續(xù)濾液5ml，置100ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，精密量取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；根據(jù)所做標(biāo)準(zhǔn)曲線，按外標(biāo)法以峰面積計算氯霉素含量。按下式進(jìn)行計算氯霉素包封率：氯霉素包封率(%)=包合物中氯霉素含量/氯霉素投藥量×100%。

2.2氯霉素環(huán)糊精包合工藝優(yōu)選

2.2.1包合物制備采用飽和水溶液法制備氯霉素-γ-環(huán)糊精包合物。精密稱取0.3g氯霉素干燥粉末，加30ml甲醇使其完全溶解，備用。按不同投藥比例精密稱取γ-環(huán)糊精干燥粉末，根據(jù)輔料與水的比例用60℃的溫水使γ-環(huán)糊精完全溶解，冷卻待用。將氯霉素溶液緩緩加入到γ-環(huán)糊精的水溶液中，使用磁力攪拌器制備包合物。完全包合后在4℃的環(huán)境中放置48h，洗滌抽濾，60℃干燥4h，得黃色疏松包合物，分別測定氯霉素-γ-環(huán)糊精包合物的得率。

2.2.2正交實驗根據(jù)前期預(yù)實驗和相關(guān)文獻(xiàn)研究[5]，制備工藝主要影響因素有：氯霉素與γ-CD的質(zhì)量比例(A)、包合溫度(B)、包合時間(C)、γ-CD 與用水量的質(zhì)量比(D)進(jìn)行L9(34)正交實驗，各因素水平見表1。正交實驗結(jié)果采用公式藥物包封率，結(jié)果見表2和表3。

表1　氯霉素包合物制備工藝正交實驗因素和水平

表2　正交試驗藥物包封率

表3　氯霉素包合物制備工藝優(yōu)化方差分析

注:F0. 05(2, 2)=19.00，F(xiàn)0.01(2,2)=99.00。

通過綜合分析評比結(jié)果表明，影響氯霉素藥物包封率的因素依次為A>C>D>B，主要影響因素為氯霉素與γ-CD的用量比例(A)、包合時間(C)。綜合分析得率的首要影響因素以及包封率的首要影響因素，得到最佳工藝條件為A1B2C2D2，即氯霉素與γ-CD的質(zhì)量比為1∶2，包合溫度為40℃，包合時間為2h，γ-CD與水的用量比例為1∶30(g/ml)。

2.3最優(yōu)條件的驗證以最佳制備工藝制備6份氯霉素包合物，按最佳包合工藝為A1B2C2D2，進(jìn)行驗證性試驗，包封率如表4所示。此時包封率為78.30%，RSD為1.20%。表明該制備工藝穩(wěn)定可靠，重現(xiàn)性良好。

表4　驗證性試驗

2.4復(fù)方爐甘石氯霉素的制備取甘油加水適量，加入爐甘石、氧化鋅細(xì)粉，邊加邊攪拌成糊狀，備用，取氯霉素包合物，加水溶解(原氯霉素用吐溫-80及適量乙醇溶解)，薄荷腦用乙醇溶解，分別緩緩加入到備用液中，然后攪拌加水使成1000ml。按上述設(shè)計，配制氯霉素包合后的氯霉素爐甘石洗劑，取三批試制品，在溫度(40±2)℃，相對濕度75%±5%的條件下保存。在6個月內(nèi)，每隔1個月取樣一次，按穩(wěn)定性重點(diǎn)考察項目檢測并進(jìn)行氯霉素含量測定，檢測結(jié)果與生產(chǎn)時進(jìn)行對比，結(jié)果表明復(fù)方爐甘石氯霉素在加速試驗條件下密封保存各項指標(biāo)變化不明顯。

3討論

復(fù)方爐甘石氯霉素屬于混懸劑類型，容易沉淀分層，且氯霉素對光、pH值及熱敏感的增強(qiáng)均會引起其分解反應(yīng)[6]。在炎熱的夏季特別不利于運(yùn)輸和保存，局部溫度或短時間強(qiáng)烈光照均導(dǎo)致氯霉素含量的降低、增加過敏原，導(dǎo)致臨床應(yīng)用中產(chǎn)生不良反應(yīng)，影響藥物治療效果。γ-環(huán)糊精具有比β-環(huán)糊精更大內(nèi)容體積，可包裹更多的藥物分子，應(yīng)用范圍廣，尤其適用于大分子類抗生素藥物。此外，γ-環(huán)糊精具有極強(qiáng)水溶性，常溫下γ-環(huán)糊精溶解度為25.6g/100ml，而β-環(huán)糊精溶解度為1.88g/100ml[7]。隨著γ-環(huán)糊精應(yīng)用范圍的擴(kuò)大、生產(chǎn)成本的降低，市場價格也在下降，更多的藥物將應(yīng)用γ-環(huán)糊精進(jìn)行包合[8]。氯霉素與γ-環(huán)糊精包合后，對其包合物進(jìn)行全波長掃描發(fā)現(xiàn)其最大吸收未變，仍在277nm附近，包合并未出現(xiàn)性質(zhì)的改變，然而其溶解性增強(qiáng)，與爐甘石混懸沉淀時間變長。采用包合后的氯霉素制備復(fù)方爐甘石氯霉素洗劑，由于氯霉素包合在疏水γ-環(huán)糊精空腔內(nèi)，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，對光、溫度及pH值的變化敏感性降低，其分解速度降低，在試用中不良反應(yīng)減少，擴(kuò)大了藥物的適用范圍。對于化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定溶解性差的制劑，可以在上述工藝制備的包合物基礎(chǔ)上，再進(jìn)一步制備成具有良好溶解特性的制劑，為臨床用藥中達(dá)到更好的療效提供了實驗依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

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作者簡介：鐘貞，碩士，主管藥師，主要從事藥物制劑的研究。

通信作者：李穎，工程師，主要從事藥物制劑的研究。

【中圖分類號】R283.6

【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A

【文章編號】1007-8517(2016)12-0022-02

(收稿日期：2016.04.14)

Study on Improvement of the Lotion of Compound of calamine and chloramphenicol

ZHONG Zhen1LI Ying2*

1. Livzon(Group) PharmaceuticalFactory,Zhuhai 519020，China；2.Zhuhai Tian Hong run Biological Engineering Co.Ltd.,Zhuhai 519020，China

Abstract:Objective To study the Improvement process of the lotion of compound of calamine chloramphenicol. Methods Using a saturated aqueous solution inclusion complex of chloramphenicol prepared by orthogonal experiment to evaluate the preparation of entrapment was screened optimum conditions. Results Chloramphenicol was preferably after γ-cyclodextrin optimum preparation conditions cyclodextrin inclusion complexes as follows: the mass ratio of chloramphenicol and γ-CD was 1∶2, the inclusion temperature was 40℃, inclusion time was 2h , γ-CD and the ratio of the amount of water is 1∶30(g/ml). During the six-month test, the test results were compared with October, Compound calamine chloramphenicol under accelerated test conditions sealed the indicators did not change significantly.Conclusion Compound calamine lotion chloramphenicol process γ-cyclodextrin inclusion chloramphenicol prepared stable, reproducibility, and provide a theoretical basis for the industrial production of compound chloramphenicol calamine lotion.

Key words:Compound calamine chloramphenicol; Improvement process; Orthogonal experiment