蘇燕，梁偉娟

(1、烏魯木齊市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科，新疆　烏魯木齊830000；2、烏魯木齊市中醫(yī)醫(yī)院內(nèi)分泌科，新疆　烏魯木齊830000)

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·檢驗與臨床·

4項聯(lián)合檢測在糖尿病腎病早期診斷中的臨床應(yīng)用

蘇燕1，梁偉娟2

(1、烏魯木齊市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科，新疆烏魯木齊830000；2、烏魯木齊市中醫(yī)醫(yī)院內(nèi)分泌科，新疆烏魯木齊830000)

摘要：目的探討血清胱抑素C(Cys-C)、轉(zhuǎn)鐵蛋白（TRF）、β2-微球蛋白（β2-MG）、尿微量白蛋白（UmAlb）的聯(lián)合檢測對糖尿病腎?。―N）早期診斷的價值，為該病的早期診斷、早期治療提供依據(jù)。方法回顧性分析2010年2月-2014年8月在烏魯木齊市中醫(yī)醫(yī)院治療的122例糖尿病腎病(DN)患者（觀察組），和50例健康體檢者（對照組），的檢測資料進行比對。結(jié)果觀察組4項檢測結(jié)果明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；觀察組男性患者和女性患者陽性率無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0. 05）；病程大于10年的患者檢測結(jié)果陽性率明顯比0~3年，3~5年，5~10年，10年以上患者要高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0. 05)；經(jīng)ROC曲線分析，Cys-C敏感性84.3%，特異性86.6%；TRF敏感性76.3%特異性84.5%；β2-MG敏感性82.6%，特異性86.6%；UmALb敏感性85.6%，特異性91.2%。而幾項聯(lián)合檢測時，其診斷的敏感性、特異性、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值分別為88.6%、98.4%、95.6%和94.7%，均較Cys-C和UmAlb等單項檢測時升高。結(jié)論血清胱抑素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、β2-微球蛋白、尿微量白蛋白的聯(lián)合檢測比單項檢測對糖尿病早期腎損害的診斷效能高，可用于臨床的輔助診斷。

關(guān)鍵詞：糖尿病腎?。谎咫滓炙谻；轉(zhuǎn)鐵蛋白；β2-微球蛋白；尿微量白蛋白；早期診斷

糖尿病是臨床常見的代謝性疾病之一，患者以高血糖為主要特征，它的發(fā)病與胰島素分泌缺陷及胰島素生物能力損傷有關(guān)?；颊咄橛行?、腎、眼、神經(jīng)和血管等系統(tǒng)的慢性損傷，嚴重影響了患者的生活質(zhì)量[1]。糖尿病之說以危害大，除了其原發(fā)疾病對患者的健康的影響以外，還會引起失明、腎病、高血壓，冠心病，感覺神經(jīng)障礙等多種并發(fā)疾病，而這些并發(fā)癥往往是糖尿病患者致殘、致死的主要原因[2，3]。因此糖尿病并發(fā)癥的早期診斷和治療同樣要引起各界的高度重視。現(xiàn)將對糖尿病早期腎損傷患者相關(guān)檢測結(jié)果報告如下。

1　材料與方法

1.1一般資料選取本院2010年2月至2014年8 月122例DN患者作為研究對象，其中男性68例，女性54例，年齡38~83，平均（57.8±10.8）歲，同時選擇門診健康體檢者50例，作為對照組，其中男性29例，女性21例，年齡39~76歲，平均（50.6± 6.1）歲。兩組各項基本資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義，（P> 0.05），具有可比性。

1.2診斷標準⑴糖尿病診斷標準參照世界衛(wèi)生組織（WHO）1998糖尿病的相關(guān)標準；⑵DN參照Megensem分期標準，患者連續(xù)6個月2~3次查尿微量清蛋白排泄率超過200μg/min，或尿蛋白定量超過0.5g/dl；⑶患者無原發(fā)性或繼發(fā)性腎臟病病史；⑷蛋白尿非藥物性腎損傷所致；⑸排除并發(fā)尿路感染、心力衰竭、慢性腹瀉等可能致尿蛋白水平異常因素；⑹受試者均知情同意。

1.3標本采集空腹且禁食12h靜脈采血3ml，注入不含抗凝劑的真空管，3500r/min，離心10min，分離血清，同時采集晨尿標本20ml，2000r/min，離心3min，收集上清液。

1.4儀器和試劑血清胱抑素C檢測采用免疫比濁法，轉(zhuǎn)鐵蛋白、β2-微球蛋白檢測采用膠乳增強免疫比濁，試劑由北京九強生物技術(shù)股份有限公司提供，UmAlb檢測采用免疫透射比濁法，試劑由英國朗道公司提供，Urea檢測采用紫外速率法，Ser檢測采用Jaffe速率法，試劑由九強公司提供，儀器是貝克曼AU-2700生化分析儀，同時用標準品校準儀器，通過室內(nèi)質(zhì)控實行全程質(zhì)量控制，保證結(jié)果的準確性，（質(zhì)控品由朗道公司提供）。尿蛋白定性由迪瑞H-500尿液干化學(xué)分析儀檢測，試紙條由北京迪瑞醫(yī)療科技股份有限公司提供。所有操作均嚴格按照試劑盒及儀器說明書進行。

1.5統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS 19.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示，比較采用t檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1健康對照組與觀察組的基本情況比較兩組研究對象的性別、年齡等進行比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義，P>0.05，健康對照組與觀察組的Cys-C、Urea、Ser、β2-MG、TRF、UmAlb檢測結(jié)果，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.05，相互之間有較好的正相關(guān)性，見表1。2.2不同病程患者的Cys-C、β2-MG、UmAlb、TRF檢測結(jié)果差異有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.05，見表2。 2.3 Cys-C、β2-MG、UmAlb、TRF敏感性和特異性比較 經(jīng)ROC曲線分析，Cys-C敏感性84.3%，特異性86.6%；TRF敏感性76.3%，特異性84.5%；β2-MG敏感性82.6%，特異性86.6%；UmAlb敏感性85.6%，特異性91.2%。聯(lián)合檢測后，其診斷的敏感性、特異性、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值分別為88.6%、98.4%、95.6%和94.7%，均較Cys-C和U-mAlb等單項檢測時升高，表明診斷的效能有較大提升。見圖1。

表1　兩組研究對象基本檢測數(shù)據(jù)比較（±s）

表1　兩組研究對象基本檢測數(shù)據(jù)比較（±s）

注：與健康對照組比較，P<0.05。

Cys-C（mg/L）β2-MG(mg/L) UmAlb(mg/L) TRF(mg/dl) Urea(mmol/L) Ser(μmol/L) 3.16±1.29 0.82±0.52 2.67 <0.05 4.1±1.6 1.1±0.8 3.54 <0.05 43.8±5.3 11.1±3.2 3.21 <0.05 376±18.1 162±11.1 5.84 <0.05 7.84±2.19 5.12±1.01 7.01 <0.05 78.1±5.2 42.1±3.3 6.37 <0.05年齡（歲）57.8±7.8 50.6±6.2組別　n　性別（男/女）觀察組健康對照組tP 122 50 68/54 29/21

表2　不同病程患者的各項檢測數(shù)據(jù)比較（±s）

表2　不同病程患者的各項檢測數(shù)據(jù)比較（±s）

注：不同病程組之間比較，P<0.05。

Cys-C（mg/L）　β2-MG(mg/L)　UmAlb(mg/L)　TRF(mg/dl)　Urea(mmol/L)　Ser(μmol/L) 0.82±0.51 2.1±1.05 3.16±1.29 4.8±2.14 4.62 <0.05 1.1±0.6 2.12±1.5 3.65±2.7 4.76±2.8 6.60 <0.05 11.2±3.2 24.5±4.3 33.89±5.36 88.6±7.4 5.41 <0.05 162±11.1 296±22.5 336±18.7 450±16.7 3.89 <0.05 5.19±1.71 5.47±1.32 7.84±2.22 9.12±2.02 5.69 <0.05 52.11±3.6 67.57±4.1 76.16±5.2 88.6±7.4 2.75 <0.05病程（年）　n 0~3 3~5 5~10 >10 tP 11 36 43 32

圖1　Cys-C、UmAlb、β2-MG及TRF的ROC曲線

3　討論

DN是糖尿病常見的并發(fā)癥之一，它主要的病理基礎(chǔ)是腎臟的微血管病變[4]。當(dāng)糖尿病患者長期處于高血糖狀態(tài)，HbAlc合成增加，氧合血紅蛋白減少，致紅細胞攜氧能力下降，加上血糖升高，使血液的粘稠度增加，微血管的灌注不良，引起組織細胞缺血、缺氧，損傷內(nèi)皮細胞，致使內(nèi)皮細胞合成增多，腎血管收縮劇烈，血管阻力增加，降低了腎血流量，同時激活蛋白激酶C，使糖基化產(chǎn)物增加，致使血液的動力學(xué)發(fā)生改變，腎小球超濾過，產(chǎn)生微量蛋白尿及腎血管切應(yīng)力變化，使腎小球細胞多基質(zhì)蛋白沉積增加，腎小球基底膜腫脹、增厚，腎小管萎縮、纖維化、狹窄，導(dǎo)致供血不足引起腎功能破壞，若不及時治療，會進一步破壞殘余的腎功能，最后可發(fā)展為腎功能不全至終末期，導(dǎo)致尿毒癥[5]，所以，對該病的臨床診斷和治療已引起國內(nèi)外專家學(xué)者的廣泛關(guān)注，糖尿病患者是發(fā)展為DN的高危人群，因此，如何通過某些相關(guān)指標的檢測來評估早期DN顯得極其關(guān)鍵，尋找DN的發(fā)病機制以及早期干預(yù)的指標也成為預(yù)防和治療DN的新思路[6]。

血清胱抑素C（Cys-C）是目前反映GER較為理想的一種內(nèi)源性標志物[7]，腎臟是清除循環(huán)中血清Cys-C的唯一器官，機體內(nèi)幾乎所有的有核細胞都產(chǎn)生，并參與細胞內(nèi)肽和蛋白質(zhì)的代謝調(diào)節(jié)，可以自由通過腎小球濾膜，幾乎全部在腎小管被吸收分解代謝，當(dāng)腎功能有輕度損傷時，血循環(huán)中的Cys-C水平就明顯增加，對腎小球濾過膜的通透性變化要比尿素、肌酐更為敏感，幾乎不受患者性別、年齡，生理病理等因素干擾[8]，檢測方法簡便，對儀器要求不高，是一種反映腎小球濾過變化理想可靠的內(nèi)源性標志物，也逐漸成為臨床檢測腎小球濾過功能的核心指標[9]。近年來，國內(nèi)外大量報道認為Cys-C能有效反映腎小球GFR的變化，以其特有的靈敏性在DN的早期診斷中有更重要的臨床意義[10]。

β2-MG是由100多個氨基酸殘基組成的單鏈多肽，相對分子質(zhì)量為（11.6~11.8）102存在于有核細胞膜上，是細胞中完整的人類白細胞抗原（HLA）分子的一部分，在代謝過程中，β2-MG與HLA分離，釋放到體液中，被腎小球自由濾過，99%被近曲小管上皮細胞重吸收，并進行分解代謝，不再返流入血，最后由腎小管內(nèi)皮細胞降解為氨基酸，當(dāng)腎小球濾過功能受損或濾過負荷增加時，外周血β2-MG的水平相對升高[11]。

UmAlb是腎臟異常滲漏蛋白質(zhì)，正常情況下，絕大多數(shù)的UmAlb不能通過濾過膜，在糖尿病的早期UmAlb在尿中排出量較少，但隨著病情的不斷發(fā)展，腎臟排泄蛋白的量也逐漸增加，最終導(dǎo)致微量清蛋白尿的發(fā)生[12，13]，此時已經(jīng)可以檢測到U-mALb，它是DN早期以及腎損傷程度的靈敏指標，在檢測糖尿病患者腎臟損傷時，UmAlb的意義比尿蛋白更大，且根據(jù)UmAlb含量可知，如果患者尿蛋白檢測結(jié)果為陽性，其UmAlb量必將遠遠高于尿蛋白陰性的患者及健康人群，如果患者尿蛋白檢測結(jié)果為陰性，其尿微量蛋白含量未必為陰性，所以，在糖尿病腎病的早期診斷中，UmAlb檢測具有積極的臨床意義[14]因此糖尿病患者如果出現(xiàn)腎臟損害而有蛋白尿時，應(yīng)及早提前干預(yù)治療，以控制病情發(fā)展。

TRF是一項反映腎小球濾膜損傷的靈敏指標，它是由多個氨基酸構(gòu)成的糖蛋白，主要在肝臟合成，為轉(zhuǎn)運Fe3+的主要蛋白，TRF是很難通過腎小球濾膜，當(dāng)腎小球的電荷屏障發(fā)生早期損害時，血中的TRF含量先升高[15]，隨著其基底膜內(nèi)外疏松層硫酸肝素糖蛋白水平的減低，使負電荷位點明顯減少，使帶負電荷（pH＝5.7）的循環(huán)中分子蛋白TRF自腎小球濾過膜濾過，出現(xiàn)在尿中，尿中的TRF含量也會逐漸上升[16]。

Urea、Ser和Cre是評估腎小球濾過功能的傳統(tǒng)指標，但易受蛋白質(zhì)分子代謝、血容量、胃腸道出血；以及患者體質(zhì)、肌肉水平等多種因素影響，而且，只有在腎功能損傷較嚴重時，血液中Urea、Ser和Cre的含量才會升高，難以對DN早期提供有價值的診斷依據(jù)。目前臨床用尿清蛋白排泄率作為DN分期的指標，也用過24h尿蛋白定量作為參考[17]，但是這些檢測值受患者飲食、運動、藥物、飲水的多少等影響因素較多，作為一個指標來講穩(wěn)定性不夠理想，也不夠全面。

本研究顯示，觀察組Cys-C、UmAlb等檢測結(jié)果明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），觀察組男性患者和女性患者陽性率無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；病程大于10年的患者檢測結(jié)果陽性率明顯比0~3年、3~5年、5~10年及10年以上患者要高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；Cys-C敏感性86.3%，特異性88.6%；TRF敏感性76.3%，特異性84.5%；β2-MG敏感性82.6%，特異性86.6%；U-mAlb敏感性85.6%，特異性91.2%。而在聯(lián)合檢測時，其診斷的敏感性、特異性、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值分別為87.6%、98.4%、95.6%和94.7%，均較Cys-C和UmAlb等單項檢測時升高。

綜上所述，Cys-C、UmAlb等聯(lián)合檢測具有互補作用，準確率也顯著高于單一項目檢測，使診斷的效能大為提高，既可以早期發(fā)現(xiàn)DN患者，又可以較綜合地判斷病損的程度，早期干預(yù)治療，從而更有效地防治或延緩DN患者損傷情況，進一步提高患者的生活質(zhì)量。

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·調(diào)查報告·

中圖分類號：R587.1

文獻標識碼：A

文章編號：1674-1129(2016)03-0379-03

DOI：10.3969/j.issn.1674-1129.2016.03.039

基金項目：烏魯木齊市科學(xué)技術(shù)項目（Y09132002）

通信作者：蘇燕，E-mail：1509082764@qq.com。

(收稿日期2015-11-09；修回日期2016-03-20)