杜玉曉　王彩紅　王軍

【摘要】 目的 研究誘捕受體3（DcR3）蛋白在鼻咽癌中的表達(dá)及臨床意義。方法 采用免疫組織化學(xué)（SABC法）檢測(cè)40例鼻咽癌組織中DcR3蛋白的表達(dá)情況， 同時(shí)與40例正常鼻咽黏膜組織進(jìn)行對(duì)照。結(jié)果 鼻咽癌組織中DcR3蛋白的表達(dá)（-）6例， （+）24例， （++）10例；正常鼻咽黏膜組織中DcR3蛋白的表達(dá)（-）26例， （+）11例， （++）3例；鼻咽癌組織中DcR3蛋白的表達(dá)明顯高于正常鼻咽黏膜組織， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；DcR3蛋白的表達(dá)與鼻咽癌組織的分化程度、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān) （P<0.05）， 與年齡、性別無(wú)關(guān)（P>0.05）。結(jié)論 DcR3蛋白在鼻咽癌組織的高表達(dá)， 可作為判斷鼻咽癌分化、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移的重要指標(biāo)。

【關(guān)鍵詞】 鼻咽癌；誘捕受體3；表達(dá)

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.16.010

【Abstract】 Objective To research expression and clinical significance of decoy receptor 3 （DcR3） protein in nasopharyngeal carcinoma. Methods Expression of DcR3 protein in 40 nasopharyngeal carcinoma tissues were detected by immunohistochemical SABC test， and they were compared with 40 normal nasopharyngeal mucosa tissues. Results Expression of DcR3 protein in nasopharyngeal carcinoma tissues included （-） 6 cases， （+） 24 cases and （++） 10 cases， and it in normal nasopharyngeal mucosa tissues were as （-） 26 cases， （+） 11 cases and （++） 3 cases. Nasopharyngeal carcinoma tissues showed obviously higher expression of DcR3 protein than normal nasopharyngeal mucosa tissues， and the difference had statistical significance （P<0.05）. Expression of DcR3 protein is correlated with differentiated degree， clinical stages and lymphatic metastasis of nasopharyngeal carcinoma tissues （P<0.05）， while it had no correlated with age and gender （P>0.05）. Conclusion High expression of DcR3 protein in nasopharyngeal carcinoma tissues can be taken as an important indicator for judging differentiation， infiltration and metastasis of nasopharyngeal carcinoma.

【Key words】 Nasopharyngeal carcinoma； Decoy receptor 3； Expression

誘捕受體3（decoy receptor 3， DcR3）是腫瘤壞死因子受體（TNFR）超家族的新成員， 能競(jìng)爭(zhēng)性地抑制配體與死亡受體的結(jié)合， 從而阻斷配體誘導(dǎo)的凋亡。DcR3的高表達(dá)與人類多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及腫瘤的免疫逃逸密切相關(guān)[1， 2]。在鼻咽癌中DcR3的表達(dá)國(guó)內(nèi)外鮮有報(bào)道， 本次研究旨在探討DcR3在鼻咽癌發(fā)生、發(fā)展中的作用， 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1. 1 實(shí)驗(yàn)材料 選取2010年1月～2015年12月在平煤神馬醫(yī)療集團(tuán)總醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科就診活檢的40例患者， 術(shù)前均未接受放、化療， 診斷均經(jīng)病理學(xué)檢查證實(shí)， 分別取其鼻咽癌組織和正常鼻咽黏膜組織進(jìn)行研究。40例患者中， 男25例， 女15例， 年齡41～65歲， 中位年齡50歲， 采用2008年國(guó)內(nèi)鼻咽癌TNM分期標(biāo)準(zhǔn)， Ⅰ～Ⅱ期24例， Ⅲ～Ⅳ期16例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移19例， 無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移21例；高分化（G1級(jí)）21例， 中分化（G2級(jí)）7例， 低分化（G3級(jí)）12例。所有標(biāo)本取材后立即用4%中性福爾馬林固定， 并及時(shí)進(jìn)行相關(guān)檢測(cè)。

1. 2 主要實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備 Benchmark XT 全自動(dòng)免疫組化染色儀。

1. 3 方法 免疫組織化學(xué)（SABC法）主要試劑：一抗， 鼠抗人 IgG 型 DcR3蛋白單克隆抗體（美國(guó)eBioscience公司）。即用型廣譜SABC組化試劑盒及顯色試劑盒均購(gòu)自武漢博士德公司；按試劑盒上步驟進(jìn)行操作， DcR3陽(yáng)性表達(dá)為胞漿著棕黃色。無(wú)著色或著色<25%為陰性（-）， 著色范圍25%～50%為陽(yáng)性（+）， 著色范圍>50%為強(qiáng)陽(yáng)性（++）。所有切片由病理科醫(yī)生協(xié)助閱片判讀。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的比較采用非參數(shù)檢驗(yàn)法。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 DcR3在鼻咽癌組織和正常鼻咽黏膜組織中的表達(dá)比較鼻咽癌組織中DcR3蛋白的表達(dá)（-）6例， （+）24例， （++）10例；正常鼻咽黏膜組織中DcR3蛋白的表達(dá)（-）26例， （+）11例， （++）3例；鼻咽癌組織中DcR3蛋白的表達(dá)明顯高于正常鼻咽黏膜組織， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2. 2 DcR3在鼻咽癌組織中的表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系DcR3蛋白的表達(dá)與鼻咽癌組織中的分化程度、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)（P<0.05）， 與年齡、性別無(wú)關(guān)（P>0.05）。見表2。

3 討論

DcR3是一種新發(fā)現(xiàn)的腫瘤壞死因子受體（TNFR）超家族成員， 能與多種細(xì)胞因子結(jié)合從而抑制細(xì)胞凋亡， 并參與腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸。DcR3能與Fas競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合FasL， 并以劑量依賴性方式阻斷FasL誘導(dǎo)的凋亡[3]。另外， DcR3還可能通過(guò)PI3K依賴的調(diào)節(jié)機(jī)制， 促進(jìn)腫瘤的遷移和侵襲。大量研究證實(shí)DcR3與許多惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān)[4-6]。

文獻(xiàn)報(bào)道， DcR3蛋白及基因在人類的許多惡性腫瘤（如肝癌、胃腸道腫瘤、胰腺癌、乳腺癌等）呈高度表達(dá)狀態(tài)， 提示DcR3具有高度的腫瘤特異性[7]。有研究發(fā)現(xiàn)92%的乳腺癌組織及轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中DcR3呈陽(yáng)性表達(dá)， 并且DcR3與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[8]。有研究發(fā)現(xiàn)在腎細(xì)胞癌中DcR3與integrin α 4、 MMP7、uPA均陽(yáng)性表達(dá)， 與腎細(xì)胞癌的臨床病理參數(shù)密切相關(guān)， 導(dǎo)致了腎細(xì)胞癌的局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及不良預(yù)后， 證實(shí)DcR3是通過(guò)PI3K/AKT途徑導(dǎo)致了腫瘤的發(fā)生發(fā)展[9， 10]。本次研究顯示DcR3在鼻咽癌組織中呈高表達(dá)， DcR3與腫瘤的分化程度、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病理參數(shù)密切相關(guān)， 與年齡和性別無(wú)關(guān)。說(shuō)明 DcR3在鼻咽癌形成發(fā)展中起重要作用。

大量研究證實(shí)在EB病毒相關(guān)性腫瘤中， DcR3過(guò)度表達(dá)尤為顯著[4， 8]。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)， 在EB病毒相關(guān)性霍奇金淋巴瘤、成人T淋巴細(xì)胞白血病和EB病毒感染的膿胸相關(guān)B細(xì)胞淋巴瘤中見DcR3 mRNA擴(kuò)增及過(guò)表達(dá)[11]。大量的研究證實(shí)EB病毒與鼻咽癌密切相關(guān)， 而低分化和未分化的鼻咽癌患者EB病毒核抗原幾乎100%陽(yáng)性， 因此在鼻咽癌中DcR3與EB病毒的關(guān)系需要進(jìn)一步研究[2， 5]。

總之， DcR3在鼻咽癌組織中表達(dá)與腫瘤的分化程度、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病理參數(shù)密切相關(guān)， 促進(jìn)了鼻咽癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移。DcR3在許多惡性腫瘤組織及血清中呈陽(yáng)性表達(dá)， 而其單克隆抗體的制備也在研究中， 對(duì)鼻咽癌預(yù)防、生物治療及基因治療的新領(lǐng)域具有重要意義。

參考文獻(xiàn)

[1] 孫磊， 陳陽(yáng)， 黃洋文， 等.支持向量機(jī)算法對(duì)鼻咽癌與正常鼻咽細(xì)胞株拉曼光譜分析.光譜學(xué)與光譜分析， 2013， 33（6）：1566-1569.

[2] 黃偉， 潘建基， 陳榮， 等.鼻咽癌離體組織拉曼光譜的測(cè)量.光譜學(xué)與光譜分析， 2009， 29（5）：1304-1307.

[3] 張文玲， 周艷宏， 肖嵐， 等.鼻咽癌分子標(biāo)志物研究.生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展， 2008， 35（1）：7-13.

[4] 董勤， 劉剛， 劉天惠， 等.鼻咽癌患者指甲的紅外光譜研究.光譜學(xué)與光譜分析， 2004， 24（12）：1543-1545.

[5] 范松青， 張文玲， 徐麗娜， 等.組織微陣列技術(shù)研究腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因在鼻咽癌中的表達(dá)與臨床意義.生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展， 2009， 36（5）：616-623.

[6] 李桂源， 劉華英， 周鳴， 等.鼻咽癌癌變的分子機(jī)理.生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展， 2006， 33（10）：922-931.

[7] 王艷萍， 袁淑蘭， 陳曉禾， 等.毫米波輻照誘導(dǎo)鼻咽癌細(xì)胞凋亡及分子機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.紅外與毫米波學(xué)報(bào)， 2001， 20（4）： 283-286.

[8] 劉華英， 彭淑平， 周鳴， 等.鼻咽癌的表觀遺傳學(xué)研究進(jìn)展.生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展， 2007， 34（7）：673-681.

[9] 孟曉萍， 盧碩， 周緒紅， 等. EGF受體和IGF-1受體在人鼻咽癌組織中的表達(dá)及臨床意義. 武漢大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版）， 2009， 30（3）：294-298.

[10] 畢小剛， 董博， 張宇紅， 等. 誘捕受體3在胃癌中的表達(dá)及其臨床意義. 腫瘤研究與臨床， 2008， 20（11）：749-751.

[11] 龔龍， 李先明， 李子煌， 等. HIF-1α和GLUT-1在鼻咽癌中的表達(dá)及其臨床意義. 中國(guó)癌癥雜志， 2012， 22（4）：269-275.

[收稿日期：2016-04-22]