嚴(yán)　羽，任煒煒，蔣衛(wèi)民

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脂代謝異常實(shí)證病人載脂蛋白E基因型分布及與血清胰島素水平的關(guān)系

嚴(yán)羽1，任煒煒1，蔣衛(wèi)民2

1.南京中醫(yī)藥大學(xué)(南京 210029)；2.南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院

摘要：目的探討中醫(yī)辨證為實(shí)證的脂代謝異常病人載脂蛋白E(ApoE)基因型分布及與血清胰島素水平的關(guān)系。方法采用全序列基因測(cè)序法檢測(cè)119例中醫(yī)辨證為實(shí)證的脂代謝異常病人和100名健康體檢者ApoE基因型，并檢測(cè)脂代謝異常病人空腹血糖、胰島素水平，分析其與ApoE基因多態(tài)性的相關(guān)性。結(jié)果中醫(yī)辨證為實(shí)證的脂代謝異常病人E3/3基因型及ε3等位基因頻率顯著低于健康體檢者(P<0.01)，而E3/4基因型及ε4等位基因頻率則顯著高于健康體檢者(P<0.01)；E3/4+E4/4型空腹胰島素顯著高于E2/2+E2/3型(P<0.05)。結(jié)論ε4等位基因可能是中醫(yī)辨證為實(shí)證的脂代謝異常病人的易感基因，且含ε4等位基因者具有更高的空腹胰島素水平。

關(guān)鍵詞：脂代謝異常；載脂蛋白E；基因多態(tài)性；胰島素；中醫(yī)辨證

載脂蛋白E(apolipoprotein E，ApoE)是脂蛋白的結(jié)構(gòu)成分，其具有結(jié)合和運(yùn)轉(zhuǎn)脂質(zhì)的功能，在血脂代謝中發(fā)揮重要作用[1]。在前期納入的212例脂代謝異常病人的研究中發(fā)現(xiàn)，脂代謝異中醫(yī)辨證特點(diǎn)與ApoE基因多態(tài)性可能相關(guān)[2]，同時(shí)ApoE基因差異分布在胰島素抵抗病人中同樣存在[3]。本研究進(jìn)一步探討中醫(yī)辨證為實(shí)證的脂代謝異常病人ApoE基因分布及與血清胰島素水平的關(guān)系。

1資料與方法

1.1研究對(duì)象119例中醫(yī)辨證為實(shí)證的脂代謝異常病人全部選自江蘇省中醫(yī)院心臟科門診和住院病人，其中門診病人62例，住院病人57例。脂代謝異常診斷參照《中國(guó)成人血脂異常防治指南》2007年版[4]，男54例，年齡 34歲～78歲(50.3歲±12.7歲)，女65例，年齡 45歲～80歲(51.3歲±11.3歲)，所有病例均排除糖尿病糖尿病和繼發(fā)性脂代謝異常病人。同時(shí)選擇年齡、性別匹配的100名無血緣關(guān)系的健康江蘇地區(qū)漢族人群(男52例，女48例)，年齡(50.2±15.1)歲。

1.2中醫(yī)辨證分型標(biāo)準(zhǔn)參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》提出的中醫(yī)高脂血癥診斷分型標(biāo)準(zhǔn)[5]。

1.3觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法采用全序列基因測(cè)序法檢測(cè)ApoE基因多態(tài)性[3]。所有脂代謝異常病人空腹12 h后采集2 mL靜脈血，由江蘇省中醫(yī)院檢驗(yàn)科采用全自動(dòng)生化儀測(cè)定空腹血糖(FBG)和空腹胰島素(FINS)水平。

2結(jié)果

2.1脂代謝異常實(shí)證病人及健康體檢者ApoE表型分布及等位基因頻率比較119例中醫(yī)辨證為實(shí)證的脂代謝異常病人檢出三種純合子，分別為E2/2、E3/3、E4/4；三種雜合子分別為E2/3、E2/4、E3/4，100名健康體檢者則未檢出E2/2和E4/4純合子，余純合子和雜合子的檢出則與實(shí)證病人相同，脂代謝異常病人及健康體檢者ApoE基因分布符合Hardy-Weinberg(H-W)平衡法則，提示各組數(shù)據(jù)分布具有群體代表性。實(shí)證脂代謝異常病人E3/3基因型及ε3等位基因頻率均顯著低于健康體檢者(χ2=19.58，P<0.01；χ2=24.01，P<0.01)，而E3/4基因型及ε4等位基因頻率則顯著高于健康體檢者(χ2=14.59，P<0.01；χ2=24.6，P<0.01)，說明實(shí)證脂代謝異常病人較健康人群ApoE基因型及等位基因分布存在差異。詳見表1。

表1　高脂血癥實(shí)證病人及健康體檢者ApoE表型分布及等位基因頻率比較 　例(%)

2.2ApoE不同基因型實(shí)證脂代謝異常病人血清血糖、胰島素水平比較因納入樣本有限，檢出的部分基因型含量很低，參照相關(guān)文獻(xiàn)[6]將意義相近的基因型進(jìn)行合并分析，結(jié)果E3/4+E4/4基因型FINS水平與E3/3基因型比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但顯著高于E2/2+E2/3基因型(P<0.05)，提示FINS水平含ε4等位基因者顯著高于含ε2等位基因者，而3組FBG比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。詳見表2。

表2　不同ApoE基因型FBG、FINS水平比較(±s)

3討論

脂代謝異常是動(dòng)脈粥樣硬化性疾病重要的風(fēng)險(xiǎn)因素，而胰島素抵抗及代償性的高胰島素血癥是高脂血癥常合并伴有的代謝異常，兩者的重疊發(fā)生則更進(jìn)一步增加了心血管事件的風(fēng)險(xiǎn)。深入研究脂代謝異常和胰島素抵抗兩者復(fù)雜的相關(guān)性是臨床積極控制代謝紊亂的迫切需求。作為脂蛋白配體、結(jié)構(gòu)與功能蛋白的載脂蛋白E，由于不同等位基因所編碼的3種異構(gòu)體具有不同的與其自身受體及低密度脂蛋白(LDL)受體的結(jié)合能力，對(duì)脂質(zhì)代謝發(fā)揮著重要影響[7]。國(guó)內(nèi)不同種族人群研究結(jié)果均顯示：高脂血癥病人與同種族健康人群存在ApoE基因型及等位基因分布的差異[8]，而對(duì)江蘇漢族胰島素抵抗人群進(jìn)行研究也發(fā)現(xiàn)，ApoE基因可能是胰島素抵抗重要的易感基因[3]，Dembinskakiec等[9]研究結(jié)果提示在高胰島素血癥病人中E4/3基因型的頻率明顯高于正常胰島素水平組。

脂代謝異常是西醫(yī)學(xué)概念，中醫(yī)古代文獻(xiàn)一般以“膏濁”“血濁”“痰濁”記載，如《靈樞·逆順肥瘦》有曰：“……此人重則氣澀血濁”，中醫(yī)臨床辨證多從虛實(shí)論治，且以實(shí)證居多。脂代謝異常雖與后天飲食、運(yùn)動(dòng)等生活方式密切相關(guān)，但其發(fā)生與遺傳背景也具有重要關(guān)系，探尋中醫(yī)虛實(shí)辨證的遺傳學(xué)基礎(chǔ)也將對(duì)進(jìn)一步提高中醫(yī)的臨床療效具有重要意義。本研究采用了較以往免疫印跡、雙相電泳等方法更為可靠的全序列基因測(cè)序法，檢測(cè)119例中醫(yī)辨證為實(shí)證的脂代謝異常病人及100名健康體檢者ApoE基因型，并分析不同基因分布者血糖及胰島素水平，結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)含ε4等位基因的實(shí)證脂代謝異常者空腹胰島素水平顯著高于含ε2等位基因者，提示含ε4等位基因的中醫(yī)辨證為實(shí)證的脂代謝異常病人可能具有更為明顯的胰島素抵抗特點(diǎn)。本研究為在冠心病、脂代謝異常、胰島素抵抗等疾病表現(xiàn)為實(shí)證的病人中尋找共同的遺傳學(xué)基礎(chǔ)提供了可能，當(dāng)然，由于時(shí)間有限，且測(cè)序法經(jīng)費(fèi)高昂等原因，納入的總體樣本含量偏小，因此得出的初步結(jié)論是否可靠還有待于今后大樣本人群研究的證實(shí)。

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(本文編輯郭懷印)

基金項(xiàng)目：江蘇省自然科學(xué)基金資助課題(No.BK20131456)；江蘇省中醫(yī)藥局資助課題(No.LZ13030)；江蘇高校優(yōu)勢(shì)學(xué)科建設(shè)工程資助項(xiàng)目(No.PAPD)

通訊作者：蔣衛(wèi)民，E-mail：jwm0410@163.com

中圖分類號(hào)：R589R259

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

doi：10.3969/j.issn.1672-1349.2016.11.022

文章編號(hào)：1672-1349(2016)11-1252-02

(收稿日期：2016-01-16)

·心血管病臨床觀察/研究·