裴 潔，彭清潔，劉華雷，張海明，宋念華，郭愛珍

（1.湖北省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，湖北武漢 430070；2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，湖北武漢 430070；3.中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心，山東青島 266030；4.廣州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，廣東廣州 510440）

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湖北省某羊場(chǎng)羊不明原因死亡的緊急流行病學(xué)調(diào)查

裴 潔1，彭清潔2，劉華雷3，張海明4，宋念華1，郭愛珍2

（1.湖北省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，湖北武漢 430070；2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，湖北武漢 430070；3.中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心，山東青島 266030；4.廣州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，廣東廣州 510440）

摘 要：2015年8月，湖北省某新建種羊場(chǎng)出現(xiàn)不明原因死亡的病例。為查明疫病發(fā)生的原因，分析可能的風(fēng)險(xiǎn)因素，及時(shí)提出防控建議，采用現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)相結(jié)合的方式，對(duì)該起疫情進(jìn)行了調(diào)查。綜合現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果和干預(yù)性措施的治療效果，推測(cè)本次疫情發(fā)生的主要原因是疫苗注射、飼養(yǎng)方式轉(zhuǎn)變和飼喂霉變飼料等一系列應(yīng)激因素，誘使羊群發(fā)生呼吸道感染而死亡。

關(guān)鍵詞：山羊；不明原因死亡；應(yīng)激；緊急流行病學(xué)調(diào)查

2015年8月24日，湖北省十堰市某新建種羊場(chǎng)報(bào)告該場(chǎng)羊群出現(xiàn)采食量下降、高燒、咳嗽等癥狀，并陸續(xù)出現(xiàn)死亡病例。為進(jìn)一步了解疫病發(fā)生經(jīng)過，查明可能的風(fēng)險(xiǎn)因素，及時(shí)提出防控措施建議，調(diào)查組于8月28—29日到開展了現(xiàn)場(chǎng)緊急流行病學(xué)調(diào)查。

1　材料與方法

1.1病例定義

自引種之日起，在該種羊場(chǎng)飼養(yǎng)的成年馬頭山羊同時(shí)出現(xiàn)以下2種及2種以上癥狀：精神不振、采食量下降或停止、高熱、咳嗽。

1.2現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查

通過現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查和座談交流，深入了解當(dāng)?shù)匮虻酿B(yǎng)殖分布，近年來疫病流行概況，發(fā)病羊場(chǎng)的地理位置、周邊環(huán)境、管理模式、生產(chǎn)和免疫記錄，以及疫病發(fā)生經(jīng)過、發(fā)病后采取的干預(yù)性措施等。

1.3實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

對(duì)2只病死羊進(jìn)行解剖，采集氣管、心、肺等樣品，冷藏條件下保存送檢。將采集的心、肺樣品處理后涂于加血清的TSA固體培養(yǎng)基上進(jìn)行有氧細(xì)菌培養(yǎng)，對(duì)16S rDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增和測(cè)序，鑒定細(xì)菌種屬；將氣管分泌物、肺組織勻漿液、肺灌洗液經(jīng)細(xì)菌濾器過濾后接種于羊支原體專用培養(yǎng)基，對(duì)可疑菌落用羊支原體特異性PCR方法鑒定。對(duì)分離到的病原菌采用紙片擴(kuò)散法進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn)。

1.4數(shù)據(jù)分析

對(duì)疫病的發(fā)生特征進(jìn)行時(shí)間、空間和群間分布描述，分析疫病流行規(guī)律，探討可能存在的風(fēng)險(xiǎn)因素。應(yīng)用Epi infoTM7對(duì)收集的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1疫病經(jīng)過

2.1.1羊場(chǎng)概況。該種羊場(chǎng)位于十堰市安陽鎮(zhèn)余咀村某座山頭上，占地面積2 300平方米，2015年5月初步建成，規(guī)劃飼養(yǎng)馬頭山羊2 000只。該種羊場(chǎng)周邊均為小山頭，無養(yǎng)殖場(chǎng)戶。 7月17日，從鄰縣種羊場(chǎng)引入108只馬頭山羊，包括公羊5只、母羊103只，部分母羊懷有小羊。引種途中死亡1只母羊，到場(chǎng)后一周內(nèi)陸續(xù)有4只懷孕母羊出現(xiàn)流產(chǎn)。飼喂初期，發(fā)現(xiàn)欄舍的設(shè)計(jì)不便于山羊吃草，故將2棟、3棟的山羊分別轉(zhuǎn)舍至4棟、5棟，待2棟、3棟?rùn)谏峒有尥戤吅笥址謩e將山羊轉(zhuǎn)回（圖1、圖2）。引種后20%的羊只出現(xiàn)疑似羊傳染性膿皰癥狀，未進(jìn)行隔離飼養(yǎng)，經(jīng)紫藥水治療后均已恢復(fù)健康。

2.1.2時(shí)間分布。7月17日引種后，該場(chǎng)零星發(fā)生羊只死亡，但未引起重視。此后，該種羊場(chǎng)在7月30日和8月14日，對(duì)全群免疫羊痘疫苗和預(yù)防羔羊痢疾、羊猝狙、羊腸毒血癥及羊快疫的三聯(lián)四防疫苗，注射后部分羊只出現(xiàn)短暫精神不振，但很快恢復(fù)正常。8月16日開始，羊只陸續(xù)出現(xiàn)高熱、咳嗽等臨床癥狀，嚴(yán)重者死亡。臨死前病羊體態(tài)瘦弱、部分出現(xiàn)體溫下降。至8月29日，全場(chǎng)存欄的89只成年山羊中死亡18只，隔離24只（圖3）。

圖1　發(fā)病羊場(chǎng)的場(chǎng)區(qū)布局

圖2　發(fā)病羊場(chǎng)的棟舍內(nèi)布局

圖3　發(fā)病羊場(chǎng)羊只死亡病例的時(shí)間分布曲線

2.1.3空間和群間分布。現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，首起死亡病例發(fā)生在7月26日，來自2棟。截至8月29日，107只成年公羊中，42只發(fā)病，襲擊率為39.3% ；18只死亡，死亡率為16.8%。從發(fā)病情況看，2棟、3棟均有羊只發(fā)病，包括公羊、母羊。不同欄舍和不同性別的發(fā)病情況均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（表1）。從死亡情況看，2棟羊只的死亡情況與3棟差異顯著（OR=6.41，95%CI：1.73～23.72）， 公羊的死亡情況與母羊差異顯著（OR=25.14，95%CI：2.62～241.61），可見死亡病例在羊群中存在明顯的空間和群間分布特征（表2）。

2.2實(shí)驗(yàn)室診斷

對(duì)2只病死山羊進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)解剖，其中1只可見心包有積液、絮狀物，心肌變軟；胸腔有少量黃色積液；右肺萎縮，左肺與胸壁粘連嚴(yán)重，有實(shí)變；另1只可見心臟有出血點(diǎn)，肺臟尖葉有實(shí)變，腎臟表面有少許出血點(diǎn)，真胃黏膜破潰、脫落，盲腸粘膜出血（圖4～圖7）。

表1　發(fā)病羊場(chǎng)不同欄舍和不同性別羊只的發(fā)病情況

表2　發(fā)病羊場(chǎng)不同欄舍和不同性別羊只的死亡情況

圖4　右肺與胸壁粘連

圖5　肺部實(shí)變

圖6　真胃黏膜破潰

圖7　盲腸粘膜出血

根據(jù)病死羊的臨床表現(xiàn)和剖檢變化，初步懷疑為支原體感染。但對(duì)肺、氣管等組織樣品進(jìn)行支原體培養(yǎng)，結(jié)果為陰性。從肺、氣管中分離到大腸桿菌、單胞菌和不動(dòng)桿菌，經(jīng)藥敏試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，分離細(xì)菌對(duì)諾氟沙星、丁胺卡那、氧氟沙星、大觀霉素、洛美沙星敏感。

2.3干預(yù)性措施

8月16日，對(duì)發(fā)病羊使用青霉素、柴胡、氨基比林進(jìn)行治療，無顯著效果。8月18日開始使用氟苯尼考治療，8月24日換用恩諾沙星。將發(fā)病羊進(jìn)行隔離，飼喂于1棟。采取不同欄舍飼養(yǎng)人員嚴(yán)格分開、在欄舍門口加消毒盆、每天進(jìn)行一次欄舍消毒等措施。

2.4潛在風(fēng)險(xiǎn)因素分析

該種羊場(chǎng)引種山羊來源于鄰縣的馬頭山羊種羊場(chǎng)，其采用的是“公司+農(nóng)戶”的養(yǎng)殖模式。本次調(diào)查的108只山羊系該公司從當(dāng)?shù)?戶散養(yǎng)戶中收購的128只馬頭山羊中篩選出來的，余下20只山羊繼續(xù)飼喂于該公司種羊場(chǎng)內(nèi)。通過追溯，發(fā)現(xiàn)剩余的20只山羊曾經(jīng)出現(xiàn)過短暫采食量下降、咳嗽等癥狀，經(jīng)常規(guī)用藥后痊愈，說明該批羊群在引種前就已經(jīng)存在呼吸系統(tǒng)病原菌的隱性感染。

結(jié)合臨床癥狀和剖檢變化，初步懷疑為支原體感染，但組織樣品經(jīng)實(shí)驗(yàn)室分離檢測(cè)，結(jié)果卻為陰性，可能與8月16日開始連續(xù)對(duì)病羊使用青霉素、氟苯尼考、恩諾沙星等藥物治療有關(guān)。8月24日換用恩諾沙星后，病情逐漸出現(xiàn)好轉(zhuǎn)。從治療情況看，恩諾沙星的效果較好。

引種前，各散養(yǎng)戶對(duì)羊群普遍采取半放牧的形式喂養(yǎng)。該種羊場(chǎng)引種后，羊群全部飼喂在欄舍內(nèi)。飼養(yǎng)方式的改變使得山羊?qū)θ︷B(yǎng)環(huán)境不適應(yīng)，導(dǎo)致羊群生長(zhǎng)速度減緩，對(duì)疫病的抵抗力下降。此外，現(xiàn)場(chǎng)查看還發(fā)現(xiàn)飼喂的小部分玉米存在霉變現(xiàn)象。臨床解剖發(fā)現(xiàn)病死山羊腎臟出現(xiàn)局部淤血、盲腸粘膜出血，證實(shí)霉變飼料危害著羊只的健康。

臨床數(shù)據(jù)顯示，2棟和3棟羊只的死亡情況差異顯著，可能與引種前各散養(yǎng)戶飼喂的羊只隱性感染狀況不同有關(guān)。公羊和母羊的死亡情況差異顯著，可能是由于公羊欄舍均靠近糞便處理溝道。棟舍外的糞便長(zhǎng)期堆積發(fā)酵后產(chǎn)生的惡臭氣體刺激公羊呼吸道，使得公羊的發(fā)病情況更為嚴(yán)重。

3　分析與討論

3.1通過流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀觀察、病理剖檢和干預(yù)性措施的治療效果，推測(cè)該種羊場(chǎng)發(fā)生的本次疫情主要是由于羊群經(jīng)過長(zhǎng)途運(yùn)輸，到場(chǎng)后經(jīng)歷轉(zhuǎn)欄、疫苗注射、飼養(yǎng)方式轉(zhuǎn)變等一系列刺激產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)[1]，誘使機(jī)體內(nèi)的呼吸系統(tǒng)條件性病原菌產(chǎn)生致病力，導(dǎo)致羊只發(fā)生呼吸道感染，個(gè)別病羊因采食霉變的飼料使得病情進(jìn)一步加重從而出現(xiàn)死亡。

3.2實(shí)驗(yàn)室從死羊的呼吸道中分離到大腸桿菌、單胞菌和不動(dòng)桿菌，多為分布廣泛的條件性病原菌，當(dāng)機(jī)體抵抗力降低時(shí)可導(dǎo)致動(dòng)物發(fā)生呼吸系統(tǒng)和消化系統(tǒng)的疫病。通過藥敏實(shí)驗(yàn)，證明分離的細(xì)菌對(duì)沙星類藥物敏感，臨床用藥也證明了恩諾沙星對(duì)本次疫情有顯著的治療效果。有文獻(xiàn)[2]報(bào)道，許多地區(qū)由于從外地引進(jìn)山羊常發(fā)生山羊支原體病，病羊和隱性帶菌羊是主要傳染源。泰樂菌素等大環(huán)內(nèi)酯類抗生素、恩諾沙星等喹諾酮類藥物對(duì)支原體的早期治療有一定的效果[3]。雖然實(shí)驗(yàn)室未分離到支原體，但是從發(fā)病情況和治療效果看，不排除存在支原體感染的可能性。

3.3根據(jù)現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查情況，對(duì)該種羊場(chǎng)提出了有針對(duì)性的預(yù)防控制建議：繼續(xù)對(duì)病羊進(jìn)行治療，對(duì)全群羊只進(jìn)行預(yù)防性用藥；增加羊只的戶外活動(dòng)時(shí)間和光照時(shí)間，可能情況下進(jìn)行半放牧飼養(yǎng)；停喂霉變飼料，增加全價(jià)配合飼料；改善欄舍內(nèi)外環(huán)境，及時(shí)清除糞便，加強(qiáng)欄舍和環(huán)境的清潔消毒。9月8日，該場(chǎng)已無死亡病例，病羊均逐漸恢復(fù)。

3.4由于資料有限，本次調(diào)查對(duì)風(fēng)險(xiǎn)因素的分析都停留在假設(shè)階段，無法通過數(shù)據(jù)進(jìn)行驗(yàn)證。規(guī)?；B(yǎng)羊場(chǎng)戶，尤其是種羊場(chǎng)應(yīng)建立完善的養(yǎng)殖管理檔案，對(duì)動(dòng)物的引種、飼養(yǎng)、免疫、用藥、診療等各方面都要做詳細(xì)記錄，便于追溯。引進(jìn)的羊只需要經(jīng)過嚴(yán)格檢疫和隔離飼養(yǎng)，防止購進(jìn)病羊或隱性感染羊。隔離期間，應(yīng)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，減少應(yīng)激反應(yīng)，增強(qiáng)羊只對(duì)疫病的抵抗力[5]。

3.5近年來，湖北省出臺(tái)很多扶持政策，發(fā)展以牛羊產(chǎn)業(yè)為主的草食畜牧業(yè)。有些投資者看到有利可圖，開始從事養(yǎng)羊業(yè)，但不懂飼養(yǎng)管理、疫病防控、生物安全等知識(shí)。本次調(diào)查的種羊場(chǎng)，建有標(biāo)準(zhǔn)化羊舍，配有高科技設(shè)備，聘有經(jīng)驗(yàn)豐富的養(yǎng)殖人員。但因場(chǎng)內(nèi)缺乏專業(yè)獸醫(yī)，當(dāng)發(fā)生高燒、咳嗽這種常見疫病時(shí)，不能及時(shí)采取有效措施進(jìn)行控制，致使疫病發(fā)展嚴(yán)重，最終給養(yǎng)殖場(chǎng)造成了經(jīng)濟(jì)損失。這提示政府在推動(dòng)畜牧業(yè)發(fā)展的同時(shí)，還需強(qiáng)化獸醫(yī)隊(duì)伍的教育培訓(xùn)，提高養(yǎng)羊場(chǎng)戶的防病意識(shí)和能力。

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（責(zé)任編輯：朱迪國(guó)）

中圖分類號(hào)：S851.3

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

文章編號(hào)：1005-944X（2016）04-0019-04

DOI：10.3969/j.issn.1005-944X.2016.04.006

通訊作者：宋念華

An Outbreak Investigation of Goats Died of Unknown Causes in A Farm of Hubei Province

Pei Jie1，Peng Qingjie2，Liu Hualei3，Zhang Haiming4，Song Nianhua1，Guo Aizhen2
（1.Hubei Animal Disease Prevention and Control Center，Wuhan，Hubei，430070；2.College of Veterinary Medicine，Huazhong Agricultural University，Wuhan，Hubei，430070；3.China Animal Health and Epidemiology Center，Qingdao，Shandong，266030；4.Guangzhou Animal Disease Prevention and Control Center，Guangzhou，Guangdong，510440）

Abstract：In August 2015，unknown death cases appeared continuously in a new goat farm of Hubei province. A fi eld investigation and laboratory test were carried out to fi nd out the main reasons of the disease and the possible risk factors. According to the fi eld investigation，laboratory test results and effective intervention measures，it was speculated that the stress factors of immunization，the change of feeding and moldy food induced severe respiratory infection， caused goats died with the serious condition.

Key words：goat；unknown death；stress；outbreak investigation