王振財(cái)

（朝陽(yáng)市中心血站，遼寧 朝陽(yáng) 122000）

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離心法和虹吸法制備冷沉淀凝血因子的比較

王振財(cái)

（朝陽(yáng)市中心血站，遼寧 朝陽(yáng) 122000）

【摘要】目的 研究比較離心法和虹吸法制備冷沉淀對(duì)凝血因子Ⅷ因子、Fbg（纖維蛋白原）含量。方法 將我站2015年1月至2015年6月收集的新鮮冰凍血漿200袋按照統(tǒng)計(jì)學(xué)原理袋數(shù)相同對(duì)照組和觀(guān)察組。對(duì)照組冰凍血漿使用離心法監(jiān)測(cè)凝血因子，觀(guān)察組冰凍新鮮血漿使用虹吸法進(jìn)行檢測(cè)，比較兩種檢測(cè)方法結(jié)果。結(jié)果 檢測(cè)結(jié)果顯示，虹吸法制備的Ⅷ因子含量多余離心法制備的含量，數(shù)據(jù)符合統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P ＜0.05）；與此同時(shí)，離心法檢測(cè)制備的Fbg含量均多于虹吸法制備的含量，數(shù)據(jù)符合統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。結(jié)論 在檢測(cè)冷凍血漿凝血因子的時(shí)候，采用虹吸方法進(jìn)行制備，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)更優(yōu)于離心制備方法。虹吸制備方法操作簡(jiǎn)單，受到人為因素比較少，儀器操作少，因而虹吸制備冷沉淀將取代離心方法，質(zhì)量更值得信賴(lài)。

【關(guān)鍵詞】離心法；虹吸法；凝血因子

在醫(yī)學(xué)逐步發(fā)展的過(guò)程中，冷沉淀因子制備越來(lái)越受到重視，同時(shí)臨床使用量也在不斷增多。在治療甲型血友病、纖維蛋白原與血管型血友病方面具有明顯的效果。臨床所指的冷沉淀凝血因子是新鮮冰凍血漿在3 ℃左右融化后產(chǎn)生的血漿冷沉淀蛋白部分而冷上清則是冷沉淀制備過(guò)程中應(yīng)當(dāng)去除掉的血漿上清［1］。受到多種因素的影響，Ⅷ因子活性不強(qiáng)，半衰期非常容易失活。因而，選用較為可靠的制備方法非常重要。本文將我站2015年1月至2015年6月收集的新鮮冰凍血漿200袋為研究對(duì)象。研究比較離心法和虹吸法制備冷沉淀對(duì)凝血因子Ⅷ因子、Fbg（纖維蛋白原）含量。

1 資料與方法

1.1 一般資料：將我站2015年1月至2015年6月收集的新鮮冰凍血漿200袋為研究對(duì)象。按照統(tǒng)計(jì)學(xué)原理袋數(shù)相同對(duì)照組和觀(guān)察組。兩組新鮮冰凍血漿并存在差異。

1.2 方法。虹吸法：觀(guān)察組血漿使用虹吸方法進(jìn)行檢測(cè)。將新鮮冰凍的冷凍血漿放置在4T.6C型低溫恒溫循環(huán)水浴槽中，將空聯(lián)袋懸掛在箱的外面，并且要保持兩袋之間有一定的距離。在冰凍新鮮血漿逐漸融化的時(shí)候，受到虹吸的作用，融化的血漿會(huì)逐漸流向空袋中，隨后就會(huì)剩余（42±7）mL的白色結(jié)晶顆粒，而這些就是冷沉淀。在經(jīng)過(guò)熱合后將其低溫保存進(jìn)行備用。

離心法：對(duì)照組血漿采用離心的方法。將冰凍新鮮血漿放置在4 ℃冰箱中逐漸融化12～15 h。血漿在血漿袋中逐漸融化直至有小冰塊的時(shí)候?qū)⑵淙〕觯S后采用低溫離心。離心操作10 min，離心轉(zhuǎn)速保持每分鐘2500轉(zhuǎn)，溫度控制在2 ℃。使用轉(zhuǎn)移袋經(jīng)過(guò)無(wú)菌操作后將上層冷上清血漿分出，留下25 mL的血漿進(jìn)行冷沉淀，經(jīng)過(guò)熱合后進(jìn)行低溫儲(chǔ)存使用。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：本次實(shí)驗(yàn)操作中所產(chǎn)生的數(shù)據(jù)都經(jīng)過(guò)SPSS17.0的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。采用t檢驗(yàn)原理來(lái)對(duì)資料比進(jìn)行分析，產(chǎn)生的數(shù)據(jù)統(tǒng)一用χ2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)結(jié)果的數(shù)據(jù)P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

見(jiàn)表1。

表1 離心法與虹吸法制備冷沉淀凝血因子結(jié)果比較（±s）

表1 離心法與虹吸法制備冷沉淀凝血因子結(jié)果比較（±s）

離心法　　虹吸法　t　PⅧ因子含量　82.38±2.81　105.97±15.71　17.89　?。?.05 Fbg 含量　149.97±4.12　92.56±3.79　4.25　?。?.05

3 討 論

對(duì)臨床診療來(lái)說(shuō)，冷沉淀制品質(zhì)量的優(yōu)劣將直接影響臨床治療效果。因而，在臨床治療的過(guò)程中選用合適的制備方法非常重要。從近年來(lái)臨床研究比較兩種方法的檢測(cè)結(jié)果與分析，就會(huì)發(fā)現(xiàn)虹吸制備方法相對(duì)比離心制備方法更具有優(yōu)勢(shì)。在比較兩種方法檢測(cè)指標(biāo)的時(shí)候發(fā)現(xiàn)，虹吸法制備的Ⅷ因子含量多余離心法制備的含量，數(shù)據(jù)符合統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）；與此同時(shí)，離心法制備的Fbg含量均多于虹吸法制備的含量，數(shù)據(jù)符合統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。在分析的時(shí)候就會(huì)發(fā)現(xiàn)，離心方法制備冷沉淀是制備出速凍的血漿，隨后將新鮮冰凍血漿放到一定溫度范圍的冰箱過(guò)夜，在冷沉淀結(jié)晶后，進(jìn)行離心分層。隨后就將血漿排除，剩下的就是結(jié)晶冷沉淀。血站制備冷沉淀的時(shí)候使用該種方法的不足之處表現(xiàn)在冰箱內(nèi)溫度并不是恒定不變的，很難保證在制備的過(guò)程中，冰箱溫度一直都處于該范圍。溫度不斷波動(dòng)，促使凝血因子活性降低，致使得出率下降。將冰凍血漿放置在冰箱過(guò)夜，時(shí)間較長(zhǎng)就會(huì)有蛋白析出，這樣也會(huì)降低凝血因子得出率，同時(shí)還會(huì)對(duì)其活性造成一定影響。而虹吸法制備冷沉淀保證例在恒溫的狀態(tài)下，并且整個(gè)融化的過(guò)程中保證水分與血漿的充分接觸。CT-4T.6C水浴式低溫融化箱使用獨(dú)特循環(huán)水流在保證溫度均勻的情況下，還可以快速溶解。因?yàn)槔涑恋頃?huì)在2～6 ℃會(huì)結(jié)晶，析出特性。因而，虹吸法就是利用這一特點(diǎn)，從新鮮冰凍血漿中進(jìn)行提取沉淀。正是基于此，對(duì)于析出的沉淀而言，恒定溫度就是關(guān)鍵性的因素。與此同時(shí)，由于冷沉淀凝血因子并不是非常的穩(wěn)定。因而在提取的時(shí)候時(shí)間越短越好［2］。

綜上所述，在制備冷凍血漿凝血因子的時(shí)候，采用虹吸方法進(jìn)行制備，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)更優(yōu)于離心制備方法。虹吸制備方法操作簡(jiǎn)單，受到人為因素比較少，儀器操作少，因而虹吸制備冷沉淀將取代離心方法，質(zhì)量更值得信賴(lài)。

參考文獻(xiàn)

［1］ 徐利強(qiáng)，李建，周忠英，等.冷沉淀凝血因子制備工藝改良［J］.中國(guó)生化藥物雜志，2011，32（12）:145-146.

［2］ 楊江存，理芒會(huì)，于青，等.新鮮冰凍血漿融化后不同放置時(shí)間凝血因子的變化［J］.中國(guó)輸血雜志，2013，18（22）:211-212.

中圖分類(lèi)號(hào)：R457.1

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

文章編號(hào)：1671-8194（2016）02-0031-01