李家祥李綺雯

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兒童與青少年鼻咽癌治療結(jié)束時EBV-DNA拷貝數(shù)可預(yù)測生存

李家祥1李綺雯2

【摘要】目的 探討血漿EBV-DNA拷貝數(shù)在兒童與青少年鼻咽癌的診斷意義與預(yù)后分析。方法 回顧性收集161例兒童與青少年鼻咽癌患者治療前后的EBV-DNA拷貝數(shù)的數(shù)值，分析其與總生存、無復(fù)發(fā)生存、無轉(zhuǎn)移生存的關(guān)系。結(jié)果161例兒童與青少年鼻咽癌患者中，有69.6%的EBV-DNA為陽性結(jié)果。在非Ⅳb期患者中，發(fā)現(xiàn)治療前EBV-DNA表達對總生存（P=0.400）、無復(fù)發(fā)生存（P=0.659）和無轉(zhuǎn)移生存（P=0.774）差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。在非Ⅳb期患者中，進行誘導(dǎo)化療后，陰性組較陽性組有更好的無轉(zhuǎn)移生存（P=0.001）。在非Ⅳb期患者中，進行放療后，EBV-DNA拷貝數(shù)為0與＞0比較，無論是總生存（P=0.001）、無復(fù)發(fā)生存（P＜0.001）還是無轉(zhuǎn)移生存（P＜0.001），拷貝數(shù)為0組均獲得更好的生存。結(jié)論 兒童與青少年鼻咽癌治療結(jié)束時EBV-DNA拷貝數(shù)可預(yù)測生存。

【關(guān)鍵詞】兒童；青少年；鼻咽癌；EBV-DNA

1肇慶市第一人民醫(yī)院腫瘤科，廣東肇慶 526060

2中山大學(xué)腫瘤防治中心放療科，廣東廣州 510060

人類皰疹病毒4型（EB）病毒是人類皰疹病毒家族成員之一，系脫氧核糖核酸（DNA）病毒，由173 kb組成［1-2］，是1964年由Epstein和Barr在研究非洲兒童惡性淋巴瘤時發(fā)現(xiàn)的一種親人類B淋巴細胞的皰疹病毒。EB病毒被國際癌癥研究機構(gòu)（IARC）歸為Ⅰ類致癌物質(zhì)，與鼻咽癌密切相關(guān)［3］。在鼻咽癌患者體內(nèi)可以檢測出多種EB病毒抗體，這些抗體指標(biāo)目前多用于鼻咽癌的篩查和輔助診斷［4-6］；但是檢測這些抗體水平對判斷患者預(yù)后的效果尚有分歧［7-10］。鼻咽癌患者血漿中存在著游離于細胞外的EBV-DNA，其拷貝數(shù)與腫瘤負荷呈正相關(guān)，并且隨著腫瘤的進展或消退而變化，能夠預(yù)測腫瘤的復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移［11］。

本研究通過對中山大學(xué)腫瘤防治中心2000年1月至2014年12月161例年齡在20歲以下的兒童與青少年鼻咽癌患者病例進行總結(jié)，對其EBV-DNA拷貝數(shù)在診斷、預(yù)后和隨訪等方面進行回顧分析，探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 中山大學(xué)腫瘤防治中心于2009年

1月至2014年12月共收治20歲以下兒童與青少年鼻咽癌患者161例作為研究對象。所有患者均經(jīng)鼻咽病理活檢證實。所有患者均按中國2008年分期標(biāo)準分期［12］。

1.2 研究方法 常規(guī)檢查包括全身體檢、鼻咽鏡、鼻咽磁共振成像（MRI）或CT、全血常規(guī)、生化常規(guī)、胸片、腹部B型超聲等。其中治療前有161例采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（FQ-PCR）技術(shù)進行EBV-DNA檢測，拷貝數(shù)＜1000/ml為陰性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 選用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件對研究數(shù)據(jù)進行分析和處理，計數(shù)資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 臨床病理特征 161例患者中，男女比例為

3.2 :1，分布于中國18個省份。所有患者均接受隨訪，隨訪期為3～110個月，中位隨訪期為35個月。患者臨床病理特征具體見表1。

表1 161例患者的臨床病理特征

2.2 患者的地區(qū)差異性 161例患者中EBV-DNA陽性112例（69.6%），其中南方六省97例（占所有陽性患者的86.6%），而陰性患者有49例（30.4%），不存在明顯地區(qū)差異（χ2=2.065，P=0.151）。

2.3 誘導(dǎo)化療對EBV-DNA的影響 在非Ⅳb期的155例患者中，有125例放療前進行了誘導(dǎo)化療，化療結(jié)束時復(fù)查有EBV-DNA 25例，3例仍呈陽性（≥1000/ml）。

2.4 根治性放療對EBV-DNA的影響 在非Ⅳb期的155例患者中，有151例進行了根治性放療，放療結(jié)束后有124例檢查了EBV-DNA?？截悢?shù)為0的有120例，10例（8.3%）在隨訪期出現(xiàn)復(fù)發(fā)和（或）遠處轉(zhuǎn)移?？截悢?shù)＞0有4例，有3例（75.0%）出現(xiàn)遠處轉(zhuǎn)移，其中＜1000/ml有1例（7個月后出現(xiàn)復(fù)發(fā)及遠處轉(zhuǎn)移），≥1000/ml有2例（均在半年內(nèi)出現(xiàn)遠處轉(zhuǎn)移）。而13例復(fù)發(fā)和（或）遠處轉(zhuǎn)移的患者中，有11例患者復(fù)查了EBV-DNA拷貝數(shù)，其中10例（90.9%）拷貝數(shù)＞0，8例（72.7%）為陽性。

2.5 EBV-DNA表達與生存期的關(guān)系 對EBV-DNA陰性組與陽性組進行比較，發(fā)現(xiàn)治療前EBV-DNA表達對總生存（P=0.400）、無復(fù)發(fā)生存（P=0.659）和無轉(zhuǎn)移生存（P=0.774）均差異無統(tǒng)計學(xué)意義。在進行誘導(dǎo)化療后，EBV-DNA陰性組與陽性組比較總生存和無復(fù)發(fā)生存差異無統(tǒng)計學(xué)意義，而陰性組較陽性組有更好的無轉(zhuǎn)移生存（P=0.001）。在進行放療后，EBV-DNA拷貝數(shù)為0與＞0比較，無論是總生存（P=0.001）、無復(fù)發(fā)生存（P＜0.001）還是無轉(zhuǎn)移生存（P＜0.001），拷貝數(shù)為0均獲得更好的生存，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。見表2。

2.6 失敗模式的比較 在非Ⅳb期患者的隨訪期中，有48例出現(xiàn)復(fù)發(fā)或遠處轉(zhuǎn)移的失敗模式，其中46例對EBV-DNA進行檢測，有44例（95.7%）EBV-DNA拷貝數(shù)＞0，29例（63.0%）＞1000/ml。

2.7 Ⅳb期的EBV-DNA表達與生存期的關(guān)系 在Ⅳb期的6例患者中，在治療前均進行了EBV-DNA檢查，4例（66.7%）為陽性。均接受化療和（或）放療的綜合治療，治療后均檢查EBV-DNA，結(jié)果提示均為陰性。隨訪期內(nèi)，僅1例出現(xiàn)病情進展，該例患者復(fù)查EBV-DNA提示為陽性。

3 討論

長期以來，對腫瘤的病因都在進行探索，一直認為病毒是最可疑的病因之一［3］。研究證實，在鼻咽癌患者血漿和（或）血清中均可以檢測到EBV-DNA，且其含量變化與腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移相關(guān)，該方法可以用于鼻咽癌的診斷、治療及預(yù)后判斷［13］。本研究回顧性分析的161例兒童與青少年鼻咽癌患者中，有69.6%的EBV-DNA為陽性。但是，鼻咽癌高發(fā)區(qū)南方六省與其他地區(qū)的兒童與青少年患者并不存在EBV-DNA地區(qū)差異（P=0.151）。

表2 EBV-DNA表達與生存期的關(guān)系

本研究中，兒童與青少年鼻咽癌患者的不同TNM分期之間的血漿EBV-DNA拷貝數(shù)差異無統(tǒng)計學(xué)意義。在非Ⅳb期患者中，治療前EBV-DNA分組與分期不存在差異（P=0.907），發(fā)現(xiàn)治療前EBV-DNA表達對總生存（P=0.400）、無復(fù)發(fā)生存（P=0.659）和無轉(zhuǎn)移生存（P=0.774）的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義?？紤]治療前EBV-DNA拷貝數(shù)對預(yù)后差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

在非Ⅳb期患者中，進行誘導(dǎo)化療后，EBV-DNA陰性組與陽性組比較總生存和無復(fù)發(fā)生差異無統(tǒng)計學(xué)意義，而陰性組較陽性組有更好的無轉(zhuǎn)移生存（P=0.001）。誘導(dǎo)化療后EBV-DNA拷貝數(shù)可以作為預(yù)測遠處轉(zhuǎn)移的指標(biāo)，進行誘導(dǎo)化療爭取EBV-DNA轉(zhuǎn)為陰性可能對降低遠處轉(zhuǎn)移有幫助。

在非Ⅳb期患者中，進行放療后，EBV-DNA拷貝數(shù)為0與＞0比較，無論是總生存（P=0.001）、無復(fù)發(fā)生存（P＜0.001），還是無轉(zhuǎn)移生存（P＜0.001），拷貝數(shù)為0組均獲得更好的生存。放療是鼻咽癌的主要治療手段，放療后EBV-DNA拷貝數(shù)可以作為判斷遠期預(yù)后的標(biāo)準，進行根治性放療后爭取EBV-DNA轉(zhuǎn)為0可能對提高預(yù)后有幫助。

定期定量檢測放療后鼻咽癌患者血漿中EBV-DNA水平，對監(jiān)測轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)是一個有臨床意義的指標(biāo)［11］。本研究中，95.7%的復(fù)發(fā)和（或）轉(zhuǎn)移患者出現(xiàn)EBV-DNA升高，其中63.0%達到陽性標(biāo)準。

Ⅳb期患者接受化療±放療綜合治療后，100%EBV-DNA拷貝數(shù)提示均為陰性，隨訪期內(nèi)僅1例出現(xiàn)病情進展，該例患者復(fù)查EBV-DNA提示為陽性。對于Ⅳb期患者，EBV-DNA亦可作為治療及預(yù)后判斷的指標(biāo)。

大量研究證明，EB病毒與鼻咽癌關(guān)系密切［13-15］。基于本研究結(jié)果，EBV-DNA可作為兒童與青少年鼻咽癌診斷的輔助檢查，在進行放化療為主的綜合治療后，EBV-DNA轉(zhuǎn)陰對提高預(yù)后有一定幫助，定期檢測EBV-DNA對監(jiān)測兒童與青少年鼻咽癌轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)具有重要臨床意義。由于本研究為回顧性分析，結(jié)論仍存在商榷之處，也許真正能明確兒童與青少年鼻咽癌治療結(jié)束時EBV-DNA拷貝數(shù)預(yù)測生存的意義，還需要一個多中心的臨床試驗才能得出正確的結(jié)論。

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At the end of the Treatment of Children and Adolescents with Nasopharyngeal Carcinoma EBV-DNA copy number can Predict Survival

Li Jiaxiang Li Qiwen

【Abstract】Objective To explore the plasma EBV-DNA copy number - the diagnostic significance and prognosis of nasopharyngeal carcinoma in children and adolescents.Methods Retrospectively collected 161 cases of child and adolescent patients with nasopharyngeal carcinoma before and after treatment of EBV DNA copy number value, analyzes its and total survival,relapse-free survival,no transfer of the survival of the relationship.Results This study analyzed retrospectively in 161 cases of child and adolescent patients with nasopharyngeal carcinoma,69.6% of EBV DNA for positive results.In patients with non Ⅳ b period,found that the treatment of former EBV DNA expression for total survival（P=0.400）,relapse-free survival（P=0.659）,and no transfer of survival（P=0.774）had no statistical difference. In patients with non Ⅳ b period, carries on the induction chemotherapy,negative than positive group have better without metastasis survival（P=0.001）.In patients with non Ⅳ b period,after radiotherapy,EBV-DNA copy number is equal to zero compared with greater than zero,both overall survival（P=0.001）,relapse-free survival（P＜0.001）or the transfer of survival（P＜0.001）,copy number of 0 group has obtained better survival.Conclusion At the end of the treatment of children and adolescents with nasopharyngeal carcinoma EBV-DNA copy number can predict survival.

【Key words】Children;Teenagers;Nasopharyngeal carcinoma;EBV-DNA

【中圖分類號】R739.62

【文獻標(biāo)志碼】A 【DOI】10.12010/j.issn.1673-5846.2016.05.058

作者簡介：李家祥（1983-），學(xué)士學(xué)位，主治醫(yī)師。研究方向：腫瘤放射治療學(xué)。E-mail：docli0314@foxmail.com；lijiajoal@163.com通信作者：李綺雯，E-mail：：liqw@sysucc.org.cn