楊代宏 郭國領(lǐng)

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黃芩總黃酮凝膠劑的制備工藝

楊代宏 郭國領(lǐng)

【摘要】目的 探討黃芩總黃酮凝膠劑的最優(yōu)制備處方工藝。方法 以凝膠劑的成型性和穩(wěn)定性等為指標(biāo)，通過正交實(shí)驗(yàn)法考察卡波姆940、氮酮、丙二醇、甘油的用量，優(yōu)選黃芩總黃酮凝膠劑的制備處方工藝。結(jié)果 黃芩總黃酮凝膠劑的最優(yōu)工藝處方為：黃芩總黃酮/卡波姆940/氮酮/丙二醇/甘油=2.5%/1.2%/3.5%/15.0%/8.0%。結(jié)論 經(jīng)過試驗(yàn)研究得出的制備工藝簡單、穩(wěn)定、可行，可為黃芩總黃酮凝膠劑的實(shí)際生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】黃芩總黃酮；凝膠劑；正交試驗(yàn)；制備工藝

麗珠醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司，廣東珠海 519020

黃芩為唇形科植物黃芩的干燥根，別名為黃芩茶、土金茶根、黃金條根等，性苦，味寒，歸肺、心、胃、肝膽、大腸經(jīng)，具有清熱燥濕、瀉火解毒、止血安胎之功效［1］。黃酮類化合物是黃芩中的主要有效成分［2］，目前從黃芩中已發(fā)現(xiàn)40多種黃酮類化合物［3］，如黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素和漢黃芩苷等。現(xiàn)代藥理研究表明，黃酮類化合物具有抗炎、抗病毒、抗氧化、抗腫瘤、抗菌、鎮(zhèn)靜、降血壓等作用［4-6］。但也有研究發(fā)現(xiàn)，口服黃芩，總黃酮吸收較差、生物利用度較低［7］。因此，需要通過藥劑等手段來提高這類物質(zhì)的生物利用度。中藥凝膠劑是新發(fā)展起來的一種中藥外用制劑，它將傳統(tǒng)中藥與現(xiàn)代醫(yī)藥技術(shù)進(jìn)行有機(jī)結(jié)合，具有涂展性好、無油膩感、易于清洗、透皮吸收好等優(yōu)點(diǎn)［8］。本研究以黃芩總黃酮為主藥，卡波普940為基質(zhì)，制備凝膠外用制劑，并采用正交試驗(yàn)法優(yōu)選其制備工藝，為黃芩總黃酮臨床治療疾病拓寬應(yīng)用范圍。

1 材料與儀器

1.1 材料 黃芩總黃酮（自制，參照文獻(xiàn)方法［9］）；黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)品（中國食品藥品檢定研究院，批號：110835-201209）；卡波姆940（上海精誠化工有限公司）；氮酮（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）；丙二醇（廣東省光華化學(xué)廠有限公司）；甘油（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；試驗(yàn)用水均為蒸餾水；甲醇、無水乙醇、氫氧化鈉、硝酸鋁、亞硝酸鈉均為分析純。

1.2 儀器 Sartorius LE225D型電子分析天平（蘇州賽恩斯儀器有限公司）；BUG40-12超聲波清洗器［必能信超聲（上海）有限公司］；TGL-16B型臺式離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）；Spectrum-752型紫外分光光度計(jì)（上海光譜儀器有限公司）；電熱恒溫水浴鍋（XM70-4000，北京市永光明醫(yī)療儀器廠）。

2 方法及結(jié)果

2.1 黃芩總黃酮凝膠劑的制備 稱取1 g卡波姆940置于20 ml蒸餾水中，輕微攪拌，放置過夜，得Ⅰ相；稱取丙二醇12 g，甘油8 g，磁力攪拌器攪拌條件下加入Ⅰ相中，得Ⅱ相；精密稱取黃芩總黃酮2.5 g，溶于25 ml無水乙醇中，加入Ⅱ相中，攪拌均勻，得Ⅲ相；稱取2 g氮酮加入Ⅲ相中，攪拌均勻，用適量三乙醇胺調(diào)pH值為6～7，加蒸餾水至100 g，使用磁力攪拌器充分?jǐn)噭?，脫氣泡，裝入避光容器中，放置陰涼處。

2.2 黃芩總黃酮凝膠劑中總黃酮含量測定 精密稱取黃芩苷對照品10 mg置于50 ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度制成濃度為0.2 mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品儲備液。用移液管分別精密量取標(biāo)準(zhǔn)品儲備液0.1、0.3、0.5、0.7、0.9、1.1 ml于10 ml容量瓶中，分別加入0.4 ml的5%亞硝酸鈉溶液，搖勻并靜置6 min，然后再加入0.4 ml的10%硝酸鋁溶液，同樣搖勻并靜置6 min，最后加入4 ml的4%氫氧化鈉溶液，用甲醇稀釋定容至刻度，搖勻并靜置15 min。以甲醇做空白在510 nm處測定紫外吸光度，以吸光度A作縱坐標(biāo)，濃度C作橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得線性回歸方程為：A= 9.9871C+0.0311，R2=0.9995，可見，在0.02～0.22 mg/ml范圍內(nèi)具有良好線性關(guān)系。

2.3 評分標(biāo)準(zhǔn) 按照以下評分標(biāo)準(zhǔn)對凝膠劑進(jìn)行綜合評分，滿分10分，見表1。

表1 黃芩總黃酮凝膠劑的評分標(biāo)準(zhǔn)

2.4 單因素考察

2.4.1 卡波姆940用量考察 按2.1項(xiàng)方法，平行制備5 份凝膠，加入卡波姆940的量分別為0.8、1.0、1.2、1.4、1.6 g，靜置觀察并按2.3項(xiàng)對所得凝膠劑進(jìn)行評分，綜合評分分別為8.3、9.3、8.6、7.8、7.1分。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，卡波姆940用量的變化對所得凝膠劑的質(zhì)量評分有一定影響，且當(dāng)卡波姆940用量為1 g時(shí)所得凝膠劑的綜合評分最高。

2.4.2 丙二醇用量考察 按2.1項(xiàng)方法，平行制備5份凝膠，加入丙二醇的量分別為7.5、10.0、12.5、15.0、17.5 g，靜置觀察并按2.3項(xiàng)對所得凝膠劑進(jìn)行評分，綜合評分分別為7.2、7.8、8.5、9.2、8.3分。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，丙二醇用量的變化對所得凝膠劑的質(zhì)量評分有一定影響，且當(dāng)丙二醇用量為15 g時(shí)所得凝膠劑的綜合評分最高。

2.4.3 甘油用量考察 按2.1項(xiàng)方法，平行制備5份凝膠，加入甘油的量分別為6、7，8、9、10 g，靜置觀察并按2.3項(xiàng)對所得凝膠劑進(jìn)行評分，綜合評分分別為7.4、8.4、9.4、8.6、7.1分。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，甘油用量的變化對所得凝膠劑的質(zhì)量評分有一定影響，且當(dāng)甘油用量為8 g時(shí)所得凝膠劑的綜合評分最高。

2.4.4 氮酮用量考察 按2.1項(xiàng)方法，平行制備5份凝膠，加入氮酮的量分別為2.5、3.0、3.5、4.0、4.5 g，靜置觀察并按2.3項(xiàng)對所得凝膠劑進(jìn)行評分，綜合評分分別為7.7、8.3、9.0、8.5、7.7分。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，氮酮用量的變化對所得凝膠劑的質(zhì)量評分有一定影響，且當(dāng)?shù)昧繛?.5 g時(shí)所得凝膠劑的綜合評分最高。

2.5 正交試驗(yàn)優(yōu)化黃芩總黃酮凝膠劑制備工藝 由單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，卡波姆940、氮酮、丙二醇、甘油的用量，在所選定范圍內(nèi)，對黃芩總黃酮凝膠劑的質(zhì)量評分有一定影響，為得到最佳制備工藝，特選正交試驗(yàn)法來同時(shí)考察上述4個(gè)因素試驗(yàn)結(jié)果的影響，正交試驗(yàn)水平與因素設(shè)計(jì)見表2所示，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表3所示。

表2 正交試驗(yàn)水平與因素設(shè)計(jì)

表3 正交試驗(yàn)結(jié)果及分析

由表3的極差分析可知，各考察因素對黃芩總黃酮凝膠劑綜合評分的影響程度不同，按由大到小的次序排列為：A＞B＞C＞D，即卡波姆940的用量＞丙二醇用量＞甘油用量＞氮酮用量。最佳制備工藝為A2B3C2D2，即卡波姆940的用量為1.2 g，丙二醇用量為15 g，甘油用量為8g，氮酮用量3.5 g。

2.6 最佳制備工藝的驗(yàn)證 按2.1項(xiàng)方法，平行制備3份凝膠，加入卡波姆940量為1.2 g、丙二醇15 g、甘油8 g、氮酮3.5 g，靜置觀察并按2.3項(xiàng)對所得凝膠劑進(jìn)行評分，綜合評分分別為9.3、9.7、9.4分，平均為9.467分，RSD%=2.20%，表明該制備工藝條件所得出的黃芩總黃酮凝膠劑質(zhì)量最好且工藝穩(wěn)定。

3 討論

中藥凝膠劑是一種新型的中藥外用制劑，已廣泛應(yīng)用于臨床。黃芩總黃酮具有多種藥理作用，但臨床中并未見其相關(guān)制劑，鑒于黃芩總黃酮抗氧化、延緩皮膚衰老的作用，將其制備成釋藥性好、無毒無刺激性的凝膠劑，以期開發(fā)黃芩總黃酮的臨床價(jià)值。本研究以卡波姆為基質(zhì)并通過正交試驗(yàn)法確立其最佳制備工藝，在質(zhì)量優(yōu)劣評定過程中，選用光澤度、離心度、均勻度、熱穩(wěn)定性和高濕穩(wěn)定性等為考察指標(biāo)，并參考文獻(xiàn)［10］制訂綜合評分表予以評定，雖存在一定主觀因素，但較為簡便、實(shí)用，可反映各個(gè)因素對凝膠劑質(zhì)量的綜合影響。本研究結(jié)果表明，按如下比例投料比較合適：卡波姆940為1.2%，丙二醇為15.0%，甘油為8.0%，氮酮為3.5%。同時(shí)，經(jīng)驗(yàn)證試驗(yàn)證實(shí)該條件較為合理、穩(wěn)定，且操作簡單，易實(shí)現(xiàn)大批量生產(chǎn)。研究中發(fā)現(xiàn)，卡波姆940和丙二醇的用量對該凝膠劑的制備的影響較大，而甘油和氮酮的用量對其影響相對較小，在實(shí)際生產(chǎn)需要以兩者的用量為考慮重點(diǎn)。本研究對正交試驗(yàn)所優(yōu)選出的最佳制備處方工藝進(jìn)行了驗(yàn)證，結(jié)果顯示該工藝條件合理、穩(wěn)定，可為黃芩總黃酮凝膠劑的批量生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

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Preparation Technology of Total Flavonoids from Radix

Yang Daihong Guo Guoling

【Abstract】Objective To study on the optimum preparation technology of the total flavonoids from the root of the root of the total flavonoids.Methods Taking the gel forming properties and stability as investigation indexes,the amount of carbomer-940,azone,propylene glycol,glycerine was chosen as investigating factors by orthogonal test to optimize the preparation process of the Scutellaria baicalensis Georgi total flavones Gel.Results The optimum preparation process were as follows:the total flavones/carbomer-940/azone/propylene glycol/glycerine=2.5%/1.2%/ 3.5%/15.0%/8.0%.Conclusion The preparation process is simple, stable and feasible,which can provide theoretical basis for the actual production of the total flavonoids in Radix.

【Key words】Total flavonoids from Radix;Gel;Orthogonal test;Preparation technology

【中圖分類號】R943

【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A 【DOI】10.12010/j.issn.1673-5846.2016.05.004

作者簡介：楊代宏，本科學(xué)歷，工程師。研究方向：藥物制劑