張慧慧，韓麗麗,王華杰，付　莉

(吉林大學(xué)第二醫(yī)院 婦產(chǎn)科，吉林 長春130041)

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*通訊作者

HPV-DNA 載量檢測在宮頸病變診斷及預(yù)測中的意義

張慧慧，韓麗麗,王華杰，付莉*

(吉林大學(xué)第二醫(yī)院 婦產(chǎn)科，吉林 長春130041)

摘要：目的探討檢測女性生殖道感染人乳頭瘤病毒DNA (HPV-DNA) 載量在宮頸病變診斷及預(yù)測中的意義。方法隨機收集正常對照組120例,CINⅠ組60例,CINⅡ組60例,CINⅢ組60例、宮頸癌組60例，采用第二代雜交捕獲實驗(HC-Ⅱ)進行HPV-DNA檢測，分析不同類型宮頸病變與HPV-DNA 載量的關(guān)系。結(jié)果正常對照組HPV-DNA陽性率為58.33%，顯著低于CINⅠ組(75%) 、 CINⅡ組(90%) 、CINⅢ組 ( 91.67%) 及宮頸癌組患者(93.33%) (P<0.01)。正常對照組患者的HPV-DNA載量分級無顯著的相關(guān)性(P>0.01) ，但 CINⅠ-Ⅲ組及宮頸癌組患者的病變程度與HPV-DNA載量分級均具有明顯的相關(guān)性( P<0.01)；在低、中和高度載量中，各級宮頸病變的OR 值分別是CINⅠ組為1.27、2.17 和6.67，CINⅡ組為1.19、9.58 和26.04，CINⅢ組為1.19、8.50 和41.25，宮頸癌組為 0.89、6.25和67.19，結(jié)果表明CINⅠ-Ⅲ組及宮頸癌組OR 值均呈現(xiàn)出隨著HPV-DNA載量級別增高風(fēng)險增高的趨勢。結(jié)論HPV-DNA病毒載量越高，發(fā)生宮頸癌及宮頸癌前病變的風(fēng)險性就越大。提示我們要警惕高載量HPV的持續(xù)感染，預(yù)防宮頸癌前病變及宮頸癌的發(fā)生。

關(guān)鍵詞：人乳頭瘤病毒；宮頸上皮內(nèi)瘤變；宮頸癌；相關(guān)性

(ChinJLabDiagn,2016,20:0786)

宮頸癌發(fā)病率居女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤之首,嚴(yán)重危害患者的健康與生命[1]。近年來，我國宮頸癌的發(fā)生有年輕化趨勢，發(fā)病率以每年2%-3% 的速度增長，嚴(yán)重影響著廣大女性的健康[2]。大量流行病學(xué)及病原學(xué)研究證實，HPV生殖道持續(xù)感染是宮頸上皮內(nèi)瘤變 (CIN) 及宮頸癌發(fā)生的必要條件[3]。從HPV感染發(fā)展成為宮頸癌前病變，再到宮頸癌，一般至少需要10年以上的演變時間，所以，早期及時的治療HPV感染有利于減少宮頸癌前病變及宮頸癌的發(fā)生率。有研究顯示，不同等級的宮頸上皮內(nèi)瘤變和病毒載量之間具有相關(guān)性，即HPV-DNA病毒載量越高，發(fā)生宮頸癌及宮頸癌前病變的風(fēng)險就越大[4]。本研究主要探討女性生殖道感染人乳頭瘤病毒DNA( HPV-DNA) 載量與宮頸病變發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系，為預(yù)防及早期診斷宮頸癌前病變及宮頸癌提供參考。

1資料與方法

1.1臨床資料

病例來自我院2014年9月至2015年9月婦科門診及住院患者，均進行了HPV DNA 檢測及宮頸病理活檢。按照宮頸病變程度分組，共5組，正常對照組120例,CINⅠ組60例,CINⅡ組 60例,CINⅢ組60例、宮頸癌組60例，其中宮頸癌組均為宮頸鱗狀細胞癌，各組病例檢測前均未用藥物及手術(shù)治療。

1.2樣本采集

采用陰道窺器擴張陰道內(nèi)壁，暴露宮頸，然后將HPV專用毛刷放置于子宮頸外口,順時針轉(zhuǎn)動5 圈刷取細胞，取出毛刷后放入含有保存液的專用瓶中，避免污染，標(biāo)好患者姓名，并于24小時內(nèi)送檢。

1.3檢測方法

采用美國 Digene 公司生產(chǎn)的雜交捕獲 2 代(HC-Ⅱ) 基因雜交信號放大系統(tǒng)檢測樣本中HPV-DNA的含量,HC-II采用 96孔平板法,可一次檢測 13種高危型 HPV(即 HPV16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59和 68)。

1.4結(jié)果判定方法

標(biāo)準(zhǔn)HPV-DNA 檢測的結(jié)果判定依據(jù): 通過相對光單位(RLU) 與標(biāo)準(zhǔn)陽性對照(PC) 的比值來判定，RLU /PC≥1 為陽性，RLU /PC < 1 為陰性，RLU /PC 值越大病毒載量值越高。根據(jù)病毒載量值不同將HPV-DNA 陽性患者分為低度載量組、中度載量組和高度載量組3 個組，其病毒載量值分別為1.00-10.00、10.00-100.00、≥100.00，HPV-DNA 陰性為HPV-DNA陰性組，分別統(tǒng)計各組患者在以上4個等級中的例數(shù)并計算各自的構(gòu)成比及相對危險(OR)。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用 SPSS 17.00 軟件進行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析。各組間率的比較用卡方檢驗，比較分析病毒載量與各級宮頸病變的關(guān)系，采用非條件多項式Logistic 回歸，計算各級宮頸病變的危險度比值比(OR)。

2結(jié)果

2.1不同宮頸病變類型患者的HPV-DNA感染率

正常對照組HPV-DNA陽性率為58.33%，顯著低于CINⅠ組( 75%)、CINⅡ組 (90%) CINⅢ組(91.67%) 及宮頸癌組患者(93.33%) (P<0.01) (見表1)。

表1　宮頸病變患者的HPV-DNA陽性表達

2.2不同宮頸病變患者HPV-DNA 載量與宮頸病變的關(guān)系

以正常對照組作為對照,比較分析病毒載量與各級宮頸病變的關(guān)系，計算各級宮頸病變的危險度比值比(OR)。在低、中和高度載量中，各級宮頸病變的OR 值分別是CINⅠ組為1.27、2.17 和6.67，CINⅡ組為1.19、9.58 和26.04，CINⅢ組為1.19、8.50 和41.25，宮頸癌組為 0.89、6.25和67.19，結(jié)果表明CINⅠ-Ⅲ組及宮頸癌組OR值均隨著HPV-DNA 載量增高危險性增加(見表2)。結(jié)果提示宮頸暴露HPV病毒載量的增加，將加大發(fā)生宮頸病變的危險性。

表2　HPV-DNA病毒載量與宮頸病變的危險性分析(%)

3討論

研究顯示，影響宮頸病變的可能因素有很多，比如病毒感染、免疫缺陷、分娩次數(shù)、性行為及吸煙等，其中 HPV病毒的持續(xù)感染是現(xiàn)在公認的宮頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌發(fā)生的因素[5,6]。但由于婦女一生感染HPV的幾率可高達80%,而且多數(shù)都只是一過性的感染,機體能自行清除，只有少數(shù)持續(xù)感染的患者才有發(fā)展成為宮頸癌的可能性，因此，僅僅只通過HPV 感染來判斷宮頸癌的高風(fēng)險人群存在局限性[7]。 如果能在一定的時間段(6-12個月)內(nèi)重復(fù)檢測 HPV，那么檢出高危宮頸癌患者的準(zhǔn)確性將大大提升[8]。但由于HPV檢測的費用較高，且患者的依從性較差，在實際操作中很難實現(xiàn)。因此HPV-DNA載量只可作為宮頸病變嚴(yán)重程度及治療效果隨訪的參考。

本組研究中，正常對照組中有41.67%患者的HPV呈陰性,感染病毒高度載量的患者僅占6.67%,反之，有26.27%的CINⅠ患者和41.67%的CINⅡ患者感染高度病毒載量，在CINⅢ組及宮頸癌組中,更是有高達55.00%及71.67%的患者呈高度病毒載量?？梢姼卟《据d量的患者比低病毒載量者發(fā)生高級別上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌的風(fēng)險明顯升高。與陰性組相比，低、中和高度載量三組發(fā)生CINⅢ的危險性增加：[OR(95% CI):1.19(0.32-4.39)、8.50(2.76-26.15)和41.25(12.42-137.05)]，發(fā)生宮頸癌的危險性也增加[OR(95% CI):0.89(0.19-4.22)、6.25(1.76-22.26)和67.19(18.91-238.65)]，OR值均呈現(xiàn)出逐漸遞增的趨勢，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，提示當(dāng)患者持續(xù)感染高載量的HPV-DNA病毒時，其患高級別上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌的風(fēng)險性增高。本研究結(jié)論與國內(nèi)大樣本研究結(jié)果基本一致[4]。

綜上所述，HPV-DNA病毒載量越高，發(fā)生宮頸癌及宮頸癌前病變的風(fēng)險性越大。這提示我們要警惕高載量HPV的持續(xù)感染，預(yù)防宮頸癌前病變及宮頸癌的發(fā)生。

參考文獻：

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Significance of human papillomavirus DNA load detection in the diagnosis and prediction of cervical neoplasia

ZHANGHui-hui,HANLi-li,WANGHua-jie,etal.

(TheSecondHospitalofJilinUniversity,Changchun130041,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate and detect the human papillomavirus DNA (HPV-DNA) load in the cervix of the female genital tract infection,which is significant in diagnosis and prediction of cervical neoplasia.MethodsIn normal control group,120 cases were collected,60 cases in CINⅠgroup,60 cases in CINⅡ group,60 cases in CINⅢ group and 60 cases in cervical cancer group.HPV-DNA was detected by the Hybrid Capture Ⅱ(HC-Ⅱ) system,and to analysis the relationship between different types of cervical neoplasia and HPV-DNA load.ResultsThe positive rate of HPV-DNA in normal control group was 58.33%,which was significantly lower than that of CINⅠgroup (75%),CINⅡ group (90%),CINⅢ group (91.67%) and cervical cancer group (93.33%) (P<0.01).There was no significant correlation between HPV-DNA load levels in normal control group(P>0.01),but CINⅠ group,CINⅡ group,CINⅢgroup and cervical cancer were significantly correlated with HPV-DNA (P<0.01);At low,medium and high loads,the odds ratio(OR) values of different levels of cervical neoplasia were CINⅠgroup:1.27，2.17 and 6.67,CINⅡgroup:1.19、9.58 and 26.04,CINⅢgroup:1.19，8.50 and 41.25,the results showed that the OR values of CINⅠ-Ⅲ groups and cervical cancer group showed an increasing trend with the incre- ase of HPV-DNA loading level.ConclusionThe higher HPV-DNA viral load,the higher the risk of cervical cancer and cervical intraepithelial neoplasia may be greater,which prompted us to be wary of high load HPV persistent infection,prevention of cervical intraepithelial neoplasia and cervical cancer.

Key words:Human papillomavirus;Cervical intraepithelial neoplasia (CIN);Cervical cancer;relationship

文章編號：1007-4287(2016)05-0786-03

中圖分類號：R737.33

文獻標(biāo)識碼：A

(收稿日期：2015-12-17)